一、手和**黏膜消毒效果監測
1、取樣時間:在消毒後立即取樣。
2、取樣方法
(1) 手的取樣:被檢人五指併攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返塗擦 2 次(乙隻手塗擦面積約 30cm2)，並隨之轉動取樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入 10ml 含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，立即送檢。
(2) **粘膜取樣:用 5cm×5cm 的標準滅菌規格板，放在被檢**處，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子 1 支，在規格板內橫豎往返均勻塗擦各 5 次，並隨之轉動棉拭子，剪去手接觸部位後，將棉拭子投入 10ml 含相應中和劑的無菌洗脫液的試管內，立即送檢。不規則的粘膜**處可用棉拭子直接塗擦取樣。
3、檢測方法
(1) 細菌總數檢測:將取樣管在混勻器上振盪20s或用力振打 80 次，用無菌吸管吸取 1.0ml 待檢樣品接種於滅菌平皿，每一樣本接種2個平皿，內加入已溶化的 45℃～48℃ 的營養瓊脂 15ml～18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置 36℃±1℃溫箱培養 48h，計數菌落數。
取樣結果計算方法：
平板上菌落數 × 稀釋倍數
細菌總數(cfu/cm2
取樣面積(cm2)
(2) 致病菌檢測:致病菌的檢測依據汙染情況進行相應指標檢測的原則執行。
4、結果判定
(1) 消毒洗手
ⅰ、ⅱ類區域工作人員：細菌總數≤5cfu/cm2，並未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單孢菌為消毒合格。
ⅲ類區域工作人員：細菌總數≤10cfu/cm2，並未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。
ⅳ類區域工作人員：細菌總數≤15cfu/cm2，並未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。
母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的工作人員手上，不得檢出沙門菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌為消毒合格。
(2)**黏膜：參照手的衛生學標準執行。
5、注意事項
**粘膜取樣處，若表面不足 5cm×5cm 可用相應面積的規格板取樣。
二、物品和環境表面消毒效果的監測
1、取樣時間:在消毒處理後進行取樣。
2、取樣方法:用 5cm×5cm 的標準滅菌規格板，放在被檢物體表面，取樣面積≥100cm2，連續取樣 4 個，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子 1 支，在規格板內橫豎往返均勻塗擦各 5 次，並隨之轉棉拭子，剪去手接觸部位後，將棉拭子投入 10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，立即送檢。
門把手等不規則物體表面用棉拭子直接塗擦取樣。
3、檢測方法
(1) 細菌總數檢測：檢測方法將取樣管在混勻器上振盪20s或用力振打 80 次，用無菌吸管吸取 1.0ml 待檢樣品接種於滅菌平皿，每一樣本接種2個平皿，內加入已溶化的 45℃～48℃ 的營養瓊脂 15ml～18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置 36℃±1℃溫箱培養 48h，計數菌落數。。
小型物體表面的結果計算，用 cfu/件表示。
(2) 致病菌檢測：致病菌的檢測依據汙染情況進行相應指標檢測的原則執行。
4、結果判定
ⅰ、ⅱ類區域：細菌總數≤5cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
ⅲ類區域細菌：總數≤10cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
ⅳ類區域細菌：總數≤15cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
母嬰同室、早產兒室、嬰兒室、 新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門菌。
5、注意事項
(1) 取樣時間:在滅菌處理後，存放有效期內取樣。
(2) 樣本量及處理:按消毒技術規範3.17.5.2（1）執行。
三、空氣消毒效果的監測
1、取樣時間：在消毒處理後、操作前進行取樣。
2、取樣方法：平板暴露法
(1) 布點方法:室內面積≤30m2，設內、中、外對角線3點，內、外點布點部位距牆壁1m處；室內面積＞30m2，設 4 角及** 5 點，4 角的布點部位距牆壁 1m 處。
(2) 取樣方法：將普通營養瓊脂平板(直徑為 9cm)放在室內各取樣點處，取樣高度為距地面 1.5m 取樣時將平板蓋開啟，扣放於平板旁，暴露 5min，蓋好立即送檢。
3、檢測方法：按照消毒技術規範2.1.3要求進行。
平板暴露法結果計算公式：
細菌總數（cfu/m3）=50000n/（a × t）
式中a為平板面積（cm2）；t為平板暴露時間（min）；n為平均菌落數（cfu）。
4、結果判定
ⅰ類區域：細菌總數≤10cfu/m3(或0.2cfu/平板)，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；
ⅱ類區域：細菌總數≤200cfu/m3(或4cfu/平板)，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；
ⅲ類區域：細菌總數≤500cfu/m3(或10cfu/平板)，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。
5、注意事項
取樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min 進行取樣。
四、醫療器械滅菌效果的監測
1、取樣時間: 在滅菌處理後，存放有效期內取樣。
2、無菌檢驗
無菌檢驗是指檢查經滅菌的敷料、縫線、一次性使用的醫療用品、無菌器械以及適合於無菌間查的其它品種是否無菌的一種方法。
無菌檢驗應在潔淨度為100級單向流空氣區域內進行，應嚴格遵守無菌操作，避免微生物汙染；對單向流空氣區域及工作檯面，必須進行潔淨度驗證。
（1） 無菌檢驗前準備
1）洗脫液與培養基無菌性試驗:無菌試驗前 3d，於需-厭養培養基與黴菌培養基內各接種 1ml 洗脫液，分別置 30℃～35℃與 20℃～25℃培養 72h，應無菌生長。
2）陽性對照管菌液製備:
①在試驗前一天取金黃色葡萄球菌[cmcc(b)26003]的普通瓊脂斜面新鮮培養物，接種1環至需-厭氧培養基內，在 30℃～35℃培養 16h～18h 後，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至10 cfu/ml～100cfu/ml;
②取生孢梭菌[cmcc(b)64941]的需氧菌、厭氧菌培養基新鮮培養物1接種環種於相同培養基內，於30℃～35℃培養 18h～24h後，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至10 cfu/ml～100cfu/ml;
③取白色念珠菌[cmcc（f）98001]真菌瓊脂培養基斜面新鮮培養物1接種環種於相同培養基內，於20℃～25℃培養 24h後，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至10cfu/ml～100cfu/ml。
（2）無菌操作: 取縫合針、針頭、刀片等小件醫療器械5件直接浸入 6 管需-厭氧培養管(其中一管作陽性對照)與 4 管黴菌培養管。 培養基用量為 15ml/管。
1)取5付注射器，在 5ml 洗脫液中反覆抽吸 5 次，洗下管內細菌，混和後接種需-厭養菌培養管(共 6 管，其中 1 管作陽性對照)與黴菌培養管(共 4 管)。 接種量：1ml注射器為 0.
5ml，2ml注射器為 1ml，5ml～10ml 注射器為 2ml，20ml～50ml注射器為 5ml，培養基用量：接種量為 2ml 以下為 15ml/管，接種量5ml為 40ml/管。
2)手術鉗、鑷子等大件醫療器械取 2 件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反覆塗抹取樣，將棉拭子投入 5ml 無菌洗脫液中，將取樣液混勻，接種於需-厭氧培養管(共 6 管，其中 1 管作陽性對照)與黴菌培養基(共 4 管)。接種量為 1ml/管，培養基用量為 15ml/管。
（3）培養:在待檢樣品的需-厭氧培養管中，接種預先準備的金黃色葡萄球菌陽性對照管液 1:1000 稀釋 1ml，將需-厭氧培養管以及陽性與陰性對照管均於 30℃～35℃培養 5d，黴菌培養管與陰性對照管於 20℃～25℃培養 7d，培養期間逐日檢查是否有菌生長，如加入供試品後培養基出現混濁或沉澱，經培養後不能從外觀上判斷時，可取培養液轉種入另一支相同的培養基中或斜面培養基上，培養 48h～72h 後，觀察是否再現混濁或在斜面上有無菌落生長，並在轉種的同時，取培養液少量，塗片染色，用顯微鏡觀察是否有菌生長。
（4）結果判定:陽性對照在 24h 內應有菌生長，陰性對照在培養期間應無菌生長，如需-厭氧菌及黴菌培養管內均為澄清或雖顯混濁但經證明並非有菌生長，判為滅菌合格；如需-厭氧菌及黴菌培養管中任何1管顯混濁並證實有菌生長，應重新取樣，分別同法複試 2 次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否則判為滅菌不合格。
3、注意事項
（1）送檢時間不得超過 6h，若樣品儲存於 0℃～4℃，則不得超過24h。
（2）被取樣本表面積＜100cm2取全部表面；被取樣本表面積≥100cm2，取 100cm2。
（3）若消毒因子為化學消毒劑，取樣液中應加入相應中和劑。
消毒滅菌效果監測制度
醫院必須對消毒 滅菌效果定期進行監測並做好記錄備查。滅菌合格率必須達到 100 不合格物品不得進入臨床使用。監測方法見中華人民共和國衛生部 消毒技術規範 2002 年版 1 對使用中消毒劑 滅菌劑進行生物和化學監測。1 生物監測 消毒劑每季度一次 其含菌量必須 100cfu 時 不得檢出致病原性微生...
消毒滅菌效果監測制度
一 對使用中的消毒劑 滅菌劑進行染菌量和濃度檢測 1.染菌量監測 消毒劑每季度1次，其細菌含量必須 100cfu ml，不得檢出致病性微生物。滅菌劑每月檢測1次，不得檢出任何微生物。2.濃度檢測 應根據消毒 滅菌劑的效能定期檢測 如含氯消毒劑 過氧乙酸等應現用現配，每次配製後都應測試濃度，對戊二醛的...
消毒與滅菌效果的評價方法和標準
中華人民共和國國家標準 消毒與滅菌效果的評價方法與標準 gb15981 1995 evaluating method and standard for the efficacy of disinfection and sterilization 第一篇壓力蒸汽滅菌效果評價方法與標準 1 主題內容與適...