組培苗汙染原因分析

現在許多科研單位和花木生產企業都已配臵了組織培養室。組培技術已成為重要的生物技術之一。然而有的組培室組培苗的數量和質量卻一直沒有質的飛躍，究其原因，最主要的因素就是汙染所造成的。

被汙染後首先是生產成本的提高；其二，對植株造成傷害；其三，增加接種源受汙染的機率。

一、常見汙染源

組織培養過程中的汙染源主要有以下幾種：（1）戶外風大，菌類進屋機會多。有風就有沙，有沙就有塵，有塵就有菌，菌塵共存，這是菌類進屋的主要原因之一。

（2）屋內太潮，菌類繁衍多。需保持室內空氣乾燥，如使用空調「除濕」功能，也可減少真菌生長繁殖。（3）人員帶菌多。

在整個操作室內，人員可說是最大的帶菌者，不管在毛髮或是衣服等地方，都隱藏著數不清的菌類。在進入操作室前，最好能對作業人員進行清潔處理，比如換上乾淨的白大褂，換上實驗室的鞋，衣服鞋每星期洗一次，上超淨台前手要用肥皂清洗兩遍，接種前手再用酒精擦拭一遍。（4）屋內不乾淨。

紫外線能殺滅或抑制真菌生長，因此應在每次接種前進行20分鐘的紫外燈消毒。（5）清理屋內帶菌組培苗。在植物病害中，真菌所引起的病害尤其嚴重，且因會產生孢子，隨著空氣飄散。

一旦落入適當的環境下，一粒小小的孢子便會擴大成乙個菌落，汙染整個組織培養瓶。因此一旦有真菌汙染的組培苗，就要用高壓滅菌器徹底消滅，以防擴散。（6）接種不正確。

不正確操作也會增加汙染機率，如開蓋太快，滅菌不夠，操作過慢等。

接種過程應該輕開蓋，快操作。

二、汙染原因及汙染苗搶救

若汙染菌類是零星分散在培養基中，則可確定是人為引起的汙染，比如培養基滅菌不徹底；超淨工作台長時間不換濾網，致使淨化能力降低；接種用具滅菌不徹底；操作不正確，動作生硬緩慢，開瓶時間太久，接種臺擺放物品雜亂，操作中心在人體範圍之內；接種室長期不滅菌，菌類太多等。

若汙染菌類是從材料周圍長起，則可證明是植物材料帶菌引起。可能是接種用具滅菌不徹底，接種時材料被汙染；或者是未及時發現汙染苗，接種過程交叉感染等。

若菌類從材料培養基以上部分長起，而不是從培養基先長起，且發生在5天以後，則說明是材料帶的內生菌。若從培養基以下開始長菌，發生時間較早，且有從裡向外的趨勢，則說明是切口引起的汙染，原因可能是滅完菌後，未剪去兩個切口或雖剪但器具帶菌。

真菌汙染後，如果已形成孢子，則必須經高壓滅菌後扔掉，即使僅形成菌絲也應處理後扔掉，因為菌絲能夠達到材料內部，因此，真菌汙染是滅絕性的。如果是細菌汙染，由於細菌繁殖是靠芽孢，細菌不會瀰散在整個空間，因此只要及時發現，可將材料上部未感菌的部分剪下轉接，材料仍可以用。

用抗生素等殺菌藥劑進行處理，這種方式雖有不少報道，但至今還未發現那種抗生素能夠對各種菌都有效，並且也會影響植物材料的正常生長分化。還有一些藥劑雖然殺菌效果好，但往往容易引起鹽害，

也無法利用。