概念化學發光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,clia),是將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，用於各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術。是繼放免分析、酶免分析、螢光免疫分析和時間分辨螢光免疫分析之後發展起來的一項最新免疫測定技術。
時間分辨螢光免疫測定（trfia）是以鑭系元素標記抗原或抗體，並與時間分辨測定技術結合而建立起來的一種新型非放射性微量免疫分析技術，它根據鑭系元素螯合物的發光特點，用時間分辨技術測量螢光，同時檢測波長和時間兩個引數進行訊號分辨，可有效地排除非特異螢光的干擾，極大地提高了分析靈敏度。
原理化學發光免疫分析包含兩個部分, 即免疫反應系統和化學發光分析系統。化學發光分析系統是利用化學發光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化, 形成乙個激發態的中間體, 當這種激發態中間體回到穩定的基態時, 同時發射出光子(hm) , 利用發光訊號測量儀器測量光量子產額。免疫反應系統是將發光物質(在反應劑激發下生成激發態中間體) 直接標記在抗原(化學發光免疫分析) 或抗體(免疫化學發光分析) 上, 或酶作用於發光底物。
魯公尺諾(1umino1)、異魯公尺諾(isolumino1)及其衍生物、吖啶酯(aciidinimester)衍生物、辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase，hrp)和鹼性磷酸酶(alkalinephosphatase，alp)是目前clia中使用最多的四類標記物。
時間分辨螢光免疫測定（trfia）基本原理
用三價稀土離子及其鰲合劑作為示蹤物，代替螢光物質、同位素或酶，標
記蛋白質、激素、抗原、抗體、核酸探針等物質，當免疫反應體系發生後，根據稀土離子螯合物的螢光光譜的特點，用時間分辨螢光分析儀測定免疫反應最後產物中螢光強度。根據螢光強度或相對螢光強度比值，來判斷反應體系中分析物的濃度，達到定量分析之目的。
應用化學發光免疫分析技術（clia）
各種激素、病毒抗原抗體、腫瘤標誌物、感染性疾病、心臟標誌物、**藥物檢測等各種抗原、抗體和半抗原
時間分辨螢光免疫測定（trfia）應用廣泛
1.多肽類：蛋白質、激素（甲狀腺激素、甾體類激素）。
2.病原體抗原/抗體
3.病毒性肝炎標誌物
4.腫瘤相關抗原
5.藥物
6.核酸
優缺點優點
化學發光免疫分析法（clia）
單個樣本檢測速度快，適合做急診；
靈敏度較高；
自動化程度高；
時間分辨螢光免疫技術（trfia）
發射光和激發光有較大的stokes位移——高特異性
長壽命螢光，降低其他物質的螢光干擾——高靈敏度
半衰期長達幾十萬年，試劑受干擾小——高穩定性
螢光壽命長，易於自動化
重複性好
標準曲線範圍寬
結果可靠
與其它技術的相對優勢：
（1）、是現有的免疫檢測方法中靈敏度最高的
（2）、是現有的免疫檢測方法中穩定性最好的
（3）、多標記檢測是目前所有免疫檢測技術中獨一無二的
缺點化學發光免疫分析法（clia）
發光過程短
本底較高
儀器故障率較高
試劑穩定性差
檢測精度不高
試劑**高
時間分辨螢光免疫測定（trfia）
測量方式複雜
儀器成本及維護費用高
環境及樣品中同元素可導致本底干擾等
化學發光與時間分辨螢光方法學比較
化學發光免疫技術原理圖
時間分辨免疫技術原理圖
鑭系元素的螢光光譜stokes位移示意圖
時間分辨光譜技術
時間分辨光譜技術 trs 慧聰網2005年11月30日9時4分評論0條進入論壇 激發時，每次放電的電流波形和 時間視窗當分析 即光被積分的時間段 與每個元素的分析靈敏度有極大的關係。根據放電時的電流波形，選擇適當的trs視窗位置，可以 1 避開放電初始階段產生背景的高峰電流，2 確定具有最佳信背比的...
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