獲取葉表皮可行的方法

2023-01-26 22:48:04 字數 858 閱讀 4622

方法一、取當年移植的各種植株基部完好的新鮮葉片,洗淨,撕下葉表皮,用0.5%亞甲基藍染色30 min,蒸餾水洗去多餘染料後, 30%甘油封片。(也可以不染色)

方法二、 葉表皮裝片每種植物取無病斑、成熟的葉片,將其近中段連同中脈橫剪取數段,用沸水煮沸15~20 min,浸10% naclo3溶液至上下表皮輕挑易離析時取出,小心分離上下表皮、水洗、軟毛刷沾洗粘連葉肉,再水洗,

方法三、 1.選取約1 cm2大小的葉片,放入20% naocl溶液中浸泡直至葉片完全變白,浸泡時間依葉片質地不同而異。如果常溫下處理時間較長,可將材料放入30e左右的恆溫箱中,或者適當提高naocl溶液的濃度,加快試驗進度。

2.待葉片變白後用鑷子將其取出,用蒸餾水清洗數次以洗去葉片表面殘留的naocl溶液,然後將其置於潔淨的載玻片上,放在解剖鏡下進行上、下表皮剝離。剝離時,先用解剖針(一次性1ml注射器代替)輕輕挑去上層表皮,再用挖耳勺將葉肉組織輕輕刮去,直至剩下下層表皮。

在操作過程中葉片應保持濕潤,水分過多會影響殘存的葉肉細胞剔除,葉片過於乾燥則會在操作過程中發生捲曲。

3.將剝離好的葉表皮用蒸餾水沖洗乾淨後,轉移到一塊滴有蒸餾水的潔淨載玻片上,在蒸餾水中用鑷子或解剖針將葉表皮展平。

方法四、剪取葉中部 1 cm × 1 cm 帶中脈的部分,放入faa 固定液中( 至少24 h) ,然後置於濃度20%次氯酸鈉溶液中離析,使表皮與葉肉充分解離。離析時間視材料性質而定。時間過短,葉肉與表皮結合仍很緊密,而過長則表皮易破碎。

因此,在離析過程中可每隔一段時間( 約 1h) 對材料進行檢查,選取最佳撕皮時間[8 -9]。紫鴨蹠草、紫斑牡丹、吊蘭離析時間分別約9、8、6 h。

撕皮與染色。將離析好的材料轉入盛有蒸餾水的燒杯內,然後在水中小心撕取表皮。若撕下的表皮有明顯葉肉附著,可用鑷子輕輕刮去。

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