－、目的要求
識別和掌握蘋、梨和棗主要病害的症狀及其病原菌的形態特徵；學習描繪病害症狀圖和病原形態圖的技巧；學習徒手切片和挑製片技術。
二、材料、儀器和用具
材料：蘋、梨和棗主要病害的玻盒標本，浸漬標本、新鮮標本和病原菌玻片標本；各種蘋果病害的掛圖和多**課件。
儀器和用具：電視顯微系統、顯微鏡，放大鏡，載玻片，蓋玻片、解剖針、鑷子，培養皿，雙面刀片、通草，浮載劑等。
三、實驗操作
（一）蘋果腐爛病 （apple canker）
1. 症狀觀察症狀表現為潰瘍型和枝枯型兩種，以潰瘍型為主。
潰瘍型病部紅褐色，略隆起，水漬狀，組織鬆軟，用手指按壓即下陷。後皮層腐爛，流出黃褐色汁液，溼腐狀，有酒糟味。病斑圓形或橢圓形，邊緣不清晰；後期病部失水乾縮，黑褐色下陷，生黑色小粒點（外子座及分生孢子器）。
天氣潮濕，病部產生橘紅色卷鬚狀物(分生孢子角)，生黑色粒點（內子座及子囊殼）。
枝枯型病部形狀不規則，紅褐色或暗褐色，有明顯的赤褐色輪紋，具黑色小粒點。
提示: 蘋果樹腐爛病與幹腐病的症狀有相似之處，注意該病在發生部位（主幹和主枝）、流出黃褐色汁液的多少、酒糟味的濃淡、黑色小點的大小和疏密、潮濕時有無桔黃色卷鬚狀物等上兩病的區別。
2. 病原觀察
病菌有性態為蘋果黑腐皮殼（valsa mali miyabe et yamada），屬子囊菌亞門。無性態為殼囊孢（cytospora sp.），屬半知菌亞門。
外子座黑色圓錐形，子座內含1個扁瓶形、幾個相通的腔室分生孢子器，直徑為480 μm ～1600 μm。分生孢子梗無色、長10.5～20.
5 μm；分生孢子無色，單胞，香蕉形或臘腸形，兩端圓，微彎曲，4.0～10.0 μm×0.
8～1.7 μm；具橘紅色卷鬚狀孢子角。
內子座在外子座的下面或旁邊形成，內含3～14個子囊殼。子囊殼球形或燒瓶形，直徑為320～540μm，具有長頸、頸長540 μm～860 μm，頂端有孔口。子囊長橢圓形或紡錘形，一端較寬，頂端鈍圓或較平，28～35 μm×7.
0～10.5 μm，內含8個子囊孢子，子囊孢子排列成兩行或不規則，無色，單胞，臘腸形或香蕉形7.5～10.
0 μm×1.5～1.8 μm。
提示: 注意觀察該病原菌的分生孢子器和子囊殼均分別生於外子座和內子座上的特徵、分生孢子器為多腔室及從器口湧出桔黃色卷鬚狀物的特點。
（二）蘋果褐斑病（marssonia leaf brown spot）
1. 症狀觀察
褐斑病主要危害葉片，也能危害葉柄和果實。葉部症狀病斑有三種型別：
1.1同心輪紋型病斑近圓形，直徑為1cm～2cm，中心褐色，四周黃色，周圍有綠色暈，病斑中部生排列成同心輪紋的黑色小粒點。
1.2 針芒型病斑褐色，不規則，上生由黑色小點(分生孢子盤)和黑色菌索組成呈針芒放射狀擴充套件。
1.3 混合型病斑很大，近圓形或不規則形，直徑約0.5cm～3cm，暗褐色，黑色小點在病斑中部呈同心輪紋狀排列，病斑外圍呈放射狀排列。
果實症狀病斑圓形或不整形，直徑約6 mm～12 mm。病斑褐色，凹陷，表面有黑色小粒點。
提示: 注意觀察該病葉部病班周圍具綠色邊緣及黑色小點（分生孢子盤）與線（菌索）相連呈放射狀的特徵；注意症狀的三種型別特點、注意與蘋果花葉病（病毒病害）的花葉的區別。
2. 病原觀察
有性態為蘋果雙殼菌［diplocarpon mali harada et sawamura］，屬子囊菌亞門。無性態為蘋果盤二孢[marssonina coronaria ( d**is.)d**is]，屬半知菌亞門。
無性態菌索，多分枝，穿行於表皮下，交叉點上著生分生孢子盤。分生孢子盤初埋生於角質層下，成熟後外露，直徑為100 μm～200 μm。分生孢子梗呈柵狀排列，無色、單胞、棍棒狀，大小15～20μm×3～4μm。
孢子梗頂生分生孢子，分生孢子無色，雙胞，中間縊縮，上大且圓，下小而尖，呈倒葫蘆狀。大小為13.2～18μm×7.
2～8.4μm，內含2～4個油球，偶有單胞的分生孢子產生。
有性態子囊盤肉質，缽狀，大小105～200μm×80～125μm。子實層由子囊和側絲組成，子囊闊棍棒狀，有囊蓋，大小40～49μm×12～14μm。子囊內含8個子囊孢子。
子囊孢子香蕉形，一端稍彎曲，成熟後有隔膜，大小24～30μm×5～6μm。
提示: 病原菌以無性態常見。其種名蘋果盤二孢告之我們病原菌的產孢結構為分生孢子盤、分生孢子為雙胞；注意觀察雙胞的特點、有無油球。
（三）蘋果白粉病（apple powdery mildew）
白粉病主要危害新梢、嫩葉，也危害花器、芽、幼果等。
1. 症狀觀察
新梢症狀節間縮短、葉細長、葉緣上捲、質脆、被一層白粉覆蓋，後期變為黃褐色、重者梢枯死。
葉片症狀病葉生褪綠斑，生長受阻而皺縮不平；葉片窄小，縱卷、變脆直至枯死脫落。
花瓣症狀花淡黃或綠色，變窄，扭曲，乾枯脫落。
芽症狀芽瘦小，灰褐色至暗褐色，芽鱗鬆散，張口呈刷狀。
果實症狀在果頂或梗窪等處產生白粉斑，稍後形成網狀鏽斑，硬塊，易造成龜裂。
受害部產生白色粉狀物（病菌的菌絲和分生孢子）為該病最明顯的特徵。一些地區，在葉背主脈、支脈、葉柄上生成堆的黑色小點（閉囊殼）。
提示: 症狀部位以產生白色粉狀覆於表面及後期生黑色小點（閉囊殼，一些地方產生）為其特點；注意觀察新梢發病後節間縮短、葉細長、上捲的特點。
2. 病原觀察
病原為白叉絲單囊殼[podosphaera leucotricha( ev.)salm],屬子囊菌亞門。
無性態分生孢子梗直接在菌絲上產生，短棍棒狀。分生孢子串生，向基性成熟，無色，單胞，橢圓形，16.4～26.4×14.4～19.2μm。
有性態閉囊殼近球形，初無色，後變淡黃色，成熟後褐色至黑褐色，直徑75～100×70～100μm。附屬絲兩種，一種生於閉囊殼頂部，3～10枝，基部褐色，端部色淡，透明，分隔，頂端有二叉狀分枝，直立，長度為閉囊殼3～7倍；另一種生於閉囊殼基部，黃褐色，較粗，彎曲，有的也分叉，長度一般小於閉囊殼直徑。閉囊殼內生1個子囊，子囊橢圓形或球形，50.
4～55.0μm×45.5～51.
5μm，內含8個子囊孢子。子囊孢子無色，單胞，橢圓形，16.8～22.
8μm×12～13.2μm 。
提示: 挑取黑色小點製片，注意觀察閉囊殼兩種附屬絲的形態；然而用解剖針於低倍鏡下輕壓蓋玻片，讓閉囊殼破裂、子囊發布；注意觀察閉囊殼內子囊的個數及子囊內子囊孢子的個數。
（四）蘋果黴心病（apple mould core and core rot）
1. 症狀觀察
果實症狀生長期田間外部症狀不明顯，病果偶見果面發黃，果形不正，或者著色較早。發病嚴重的果實，明顯呈畸形。貯藏期，果心霉爛發展更快，病果果面可見水漬狀、褐色不規則形的溼腐斑塊，斑塊可連成片，以致全果腐爛。
果心症狀剖開病果，心室變褐，逐漸向外擴充套件，具粉紅色、灰綠色、黑褐色和白色黴狀物。
提示: 病果外觀無明顯症狀。剖果後可見心室及果肉（如已擴充套件時）有粉紅色、灰綠色、黑褐色和白色黴狀物（依病原種類不同而異，但一般僅有一優勢種）。
2. 病原觀察
蘋果黴心病是由多種真菌侵染所致，常見的有鏈格孢菌[alternaria alternata (fr.)keissl]、粉紅單端孢菌[trichothecium roseum (bull) link]串球鐮刀菌（fusarium moniliforme sheld）等3種。此外，還有青黴菌(penicillium sp.
)，擬青黴菌(paecilomyces sp.)、節孢狀鐮刀菌( sherb.)等20餘屬的真菌。
2.1 t. roseum 分生孢子梗直立，有少數橫隔或無隔，不分枝，梗端稍大。
分生孢子自梗端單個地以向基式連續產生一串孢子。孢子形成後，靠著生痕彼此連線而聚集在孢子梗的頂端，形成外觀圓形至矩形的孢子頭。分生孢子梨形或倒卵形，兩個孢室，上孢室較下孢室為大，下孢室基端明顯收縮變細，著生痕在基端或其一側，透明或粉紅色，12～18 μm×8～10 μm。
2.2 a.. alternata 分生孢子梗直立，分枝或不分枝，淡橄欖色至綠褐色，有屈曲，頂端常膨大而具多個孢子痕，大小5～12.
5 μm×3～6 μm，分生孢子組成鏈，有的長鏈由10個孢子組成。孢子有喙或無喙，形狀變化極大，表面平滑或有瘤，濃橄欖色至深橄欖色，有橫隔膜1～9個，縱隔膜0～6個，大小7～70 μm×6～22.5 μm。
2.3 f. moniliforme 子座黃色、褐色或紫色，產生的菌絲為鮮黃色至淺粉紅色。
分生孢子串珠狀，單胞，稜形至卵圓，大小4～30 μm×1.5～5 μm。大分生孢子生於分生孢子座或分生孢子團內，淡紅色至紅褐色，孢子細長、稍彎、具3～5個隔膜，大小為20～70 μm×2～4.
5 μm。
（五）蘋果炭疽病（apple bitter rot）、輪紋病（apple ring rot）和褐腐病（apple brown）
1. 症狀觀察
1.1輪紋病蘋果輪紋病又稱粗皮病、輪紋褐腐病。
果實症狀以皮孔為中心，水漬狀褐色腐爛斑點，呈同心輪紋狀向四周擴充套件，病斑不凹陷，爛不變形，病組織呈軟腐狀，病斑的中部產生黑色小粒點，散生，不突破表皮。
1.2炭疽病
果實症狀病斑圓形，直徑1～2 cm，中心生黑色小粒點(分生孢子盤)，常呈同心輪紋狀排列。潮濕時，溢位緋紅色粘質團(分生孢子團)。爛部呈圓錐狀幹腐。
1.3褐腐病又名菌核病。
果實症狀病斑中心部逐漸形成同心輪紋狀排列的灰白色、絨球狀菌絲團，這是褐腐病的典型症。病果乾縮呈黑色僵果。
提示: 上述三種蘋果果實病害的共同特徵是呈現輪紋的共同特徵，但組成輪紋的病徵或病狀不同。輪紋病的輪紋由深淺褐色的症狀組成；炭疽病的輪紋由病徵黑色小點（分生孢子盤）或肉紅色粘質物（分生孢子和粘質物）組成；褐腐病的輪紋是由病徵灰白色、絨球狀菌絲團組成。
此外，它們在病斑大小、是否凹陷等方面也不同。
2. 病原觀察
2.1病原輪紋病有性態為貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型［botryosphaeria berengeriana f. sp.
piricola (nose) koganezawa et sakuma］屬子囊菌亞門；無性態為簇**殼菌 (dothiorella gregaria)，屬半知菌亞門。
無性態分生孢子器扁圓形或橢圓形，直徑383～425 μm；分生孢子無色、單胞，紡錘形或橢圓形，大小24～30 μm×6～8 μm。
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