HPLC的常見問題及解答

2022-12-05 16:12:02 字數 1451 閱讀 3116

一、問:用hplc進行分析時保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?

答:關於漂移問題:

1. 溫度控制不好,解決方法是採用恆溫裝置,保持柱溫恆定

2. 流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等

3. 柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡

關於快速變化問題

1. 流速發生變化,解決辦法是重新設定流速,使之保持穩定

2. 幫浦中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出。

3. 流動相不合適,解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合

二、問:液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什麼?

答: 1. 篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。

2. 存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子

三、問:hplc靈敏度不夠的主要原因及解決辦法

答: 1. 樣品量不足,解決辦法為增加樣品量

2. 樣品未從柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子

3. 樣品與檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器

4. 檢測器衰減太多。調整衰減即可。

5. 檢測器時間常數太大。解決辦法為降低時間引數

6. 檢測器池窗汙染。解決辦法為清洗池窗。

7. 檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。

8. 記錄儀測壓範圍不當。調整電壓範圍即可。

9. 流動相流量不合適。調整流速即可。

10. 檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器,重作校正曲線。

四、問:做hplc分析時,柱壓不穩定,原因何在?如何解決?

答:原因可能有:

1. 幫浦內有空氣,解決的辦法是清除幫浦內空氣,對溶劑進行脫氣處理;

2. 比例閥失效,更換比例閥即可;

3. 幫浦密封墊損壞,更換密封墊即可;

4. 溶劑中的氣泡,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時改變脫氣方法;

5. 系統檢漏,找出漏點,密封即可;

6. 梯度洗脫,這時壓力波動是正常的。

五、問:我購買的hplc柱驗收測試時柱壓過高,請問為什麼?

答:柱壓過高是hplc柱使用者最常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常並不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因。

1. 拆去保護預柱,看柱壓是否還高,否則是保護柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;

2. 把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查;

3. 將柱子的進出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動相沖洗柱子,(此時不要連線檢測器,以防固體顆粒進入流動池)。這時,如果柱壓仍不下降,再檢查;

4. 更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質,正是這些雜質將篩板堵塞引起壓力上公升。若柱壓還高,請與廠商聯絡。 一般情況下,在進樣器與保護柱之間接乙個**過濾器便可避免柱壓過高的問題,sge提供的rheodyne 7315型過濾器就是解決這一問題的最佳選擇。

HPLC常見問題

問 用hplc進行分析時保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?答 關於漂移問題 1溫度控制不好,解決方法是採用恆溫裝置,保持柱溫恆定 2流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發 反應等 3柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡 關於快速變化問題 1流速發生變化,解決辦法是...

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