培養基濕熱滅菌

2022-10-14 22:45:05 字數 949 閱讀 7755

濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法,以高溫高壓水蒸氣為介質,由於蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質變性或凝固,最終導致微生物的死亡,所以該法的滅菌效率比乾熱滅菌法高。

一、 方法

煮沸滅菌法;巴氏滅菌;間歇滅菌;高壓蒸汽滅菌等。

(1)煮沸滅菌法:是指將待滅菌物置於沸水中滅菌的方法。煮沸時間通常為30-60分鐘。該法滅菌效果較差,常用於注射器、注射針等器皿的消毒。

(2)巴氏滅菌:利用病原體不是很耐熱的特點,用適當的溫度和保溫時間處理,將其全部殺滅。但經巴氏消毒後,仍保留了小部分無害或有益、較耐熱的細菌或細菌芽孢。

(3)間歇蒸汽滅菌法:利用反覆多次的流通蒸汽加熱,殺滅所有微生物,包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法,但要重複3次以上,每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過夜,目的是使芽胞發育成繁殖體。

若被滅菌物不耐100℃高溫,可將溫度降至75℃~80℃,加熱延長為30~60分鐘,並增加次數。適用於不耐高熱的含糖或牛奶的培養基。

(4)高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3℃,維持15-20分鐘。

二、 對培養基的影響

1、 形成沉澱物:有機物,如多肽類沉澱;無機物,如磷酸鹽、碳酸鹽等沉澱。

2、 破壞營養,提高色澤:褐變,產生氨基酸、焦糖或黑色素。

3、 改變培養基的ph,一般為降低ph

4、 降低培養基濃度,氣溫低時會增加冷凝水

三、解決方法

溫度的選擇

培養基滅菌過程中,除微生物被殺死外,還伴隨著培養基成分被破壞,在加熱下氨基酸及維生素等受破壞。在生產中必需選擇既能達到滅菌目的,又能使培養基成分破壞減至最少的條件。

滅菌過程微生物死亡是屬於一級反應動力學型別,在其它條件不變時,反應速度常數κ與溫度的關係可用阿累尼烏斯方程式表示:

lnk=lnk0-ea/rt

達到相同的滅菌效果,提高滅菌溫度可以明顯縮短滅菌時間,並可減少培養基因受熱時間長使營養成分遭到破壞的損失。

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