顯影和定影：
i 將ecl plus 顯色液的a 液和b 液在容器裡體積混合，根據膜的大小來確定顯色液的量，1 min 後，將膜與顯色液充分接觸。
ii 反應1 - 5 min 後，吸去膜上殘餘液，將膜轉移至一乾淨保鮮膜上，包好，放入壓片夾中。
iii 剪一張比膜尺寸稍大的x 光片，開啟壓片夾，將x 光片放在膜上，一旦放上，便不能移動。關上壓片夾，開始計時。
iv 根據訊號強弱調整**時間，一般1 - 5 min，也可選擇不同時間多次壓片以達最佳效果。
v **結束後，開啟壓片夾，將x 光片迅速浸入備好的顯影液中顯影，待出現明顯條帶後，終止顯影。一般1 - 2 min（20 - 25 ℃）。
vi 顯影結束後，用水沖洗x 光片，放到定影液中，定影時間一般為5 - 10 min，以膠片透明為止。
vii 用水沖洗去底片上殘留的定影液，室溫下晾乾。
問：在westernblot在加ecl發光劑後，壓片（**）時間如何掌握？
答：壓片時間一般圍繞10s，再加前後兩個梯度，基本滿足**要求
問：壓片後在顯影液中該顯影多長時間？如何判斷
答：顯影時間可以在顯影過程中用紅光檢測，顯影幾秒以後對著紅光看一看，黑影出來以後就定影，否則可以繼續顯影
問：顯影後放在定影液裡又該放多長時間？拿出來後是否要清水漂洗？還是在顯影後在清水裡漂洗一下再放入定影液？
答：定影前一般用清水漂洗一下，定影效果會好一些。膠片在定影液的時間沒有什麼講究，定影幾秒以後就可以見光了，在暗室外面可以仔細看，可隨時拿出來
問：顯影液定影液一般可以用多長時間？
答：顯影液定影液一般可以重複使用至少一次，發現效果不佳時就應該更換
顯影液和定影液完全可以在日光燈下配置，可以用濾紙慮一下再用。但是貯存的時候應該密封、避光。用時均勻噴在膜上3分鐘，再到暗室顯影。
暗室裡面，所有操作都可以在紅光下進行，不會**。我們實驗室是自動洗片機，我們在外面用ecl配好染好膜後進入暗室，開啟紅燈，事實顯示，亮的紅燈暗的紅燈相差不大，然後壓片，很快捷。
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