蛋白質定量分析實驗
實驗一雙縮脲法測定蛋白質含量
實驗原理：在蛋白質分子中含有許多肽鍵，與雙縮脲結構類似。含有兩個以上肽鍵的蛋白質可與雙縮脲試劑發生顯色反應（雙縮脲反應），在一定濃度範圍內，顏色的深淺與蛋白質濃度成正比。
故可用比色法測定蛋白質含量。（雙縮脲法的靈敏度為1—20mg）
實驗結果：(標準蛋白質溶液濃度為10mg/ml)
由散點圖(1)可以看出，點（1.25，0.331）嚴重偏離回歸方程趨勢線，故捨去該點，重新製作回歸線性方程散點圖可得散點圖(2)如下，
將已稀釋待測液吸光度y=0.067代入回歸方程，解得x=0.246mg/ml。則未稀釋待測液濃度為12.3mg/ml
結果分析：在由所有資料得出的散點圖（1）中，回歸係數r2=0.9935＞0.
99，但因為從圖中可明顯觀察到點（1.25，0.331）嚴重偏離回歸方程趨勢線，因此捨去此點重新製作散點圖（2），其回歸係數r2=0.
9998＞0.99，且無明顯偏離趨勢線的點。因此，可用於計算待測液的蛋白質含量。
存在較為嚴重偏離趨勢線的點說明我們在實驗過程中可能存在失誤，未將實驗器具徹底清洗乾淨或存在其他汙染等問題，應吸取教訓，在以後的實驗中改進缺點。
實驗三考馬斯亮藍結合法測定蛋白質含量
實驗原理：考馬斯亮藍g-250可以與蛋白質通過范德華力結合，顏色由紅色轉變為藍色，並且最大吸收峰由465nm變為595nm，因此可以通過測定595nm處的光吸收的增加量測出其結合蛋白質的量。使用考馬斯亮藍結合法測定蛋白質含量，具有靈敏度高（1-5μg）、測定速度快、干擾物質少等優點，現已被廣泛使用。
實驗結果：a標本=0.192 a標準=0.431 （蛋白標準液濃度為500μg/ml）
樣品中蛋白質的含量=a標本/a標準*500=222.738μg/ml=0.222mg/ml，故未稀釋待測液的濃度為11.1mg/ml
結果分析：使用標準管法進行測量，因實驗資料太少，可能存在較大誤差，對比實驗一結果，兩者存在誤差，可能是由於實驗中操作不夠規範而出現了誤差。
實驗四紫外分光光度法測定蛋白質含量
實驗原理：蛋白質分子中存在酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸，其中的共軛雙鍵使蛋白質具有吸收紫外光的性質，吸收高峰在280nm波長處。由於各種蛋白質所含芳香族氨基酸的量相差很少，因此在此波長範圍內吸光度值與其濃度成正比，可做定量測定。
其靈敏度為50-100μg。
實驗結果：散點圖如下圖（散點圖（3））
將已稀釋待測液的吸光度y=0.185帶入線性回歸方程，得x=0.222mg/ml，則可計算得原待測液蛋白質濃度=44.4mg/ml。
結果分析：
回歸係數r2=0.999＞0.99,且無明顯偏離趨勢線的點，故實驗資料可以用來計算待測液的蛋白質含量。
但所得待測液蛋白質濃度與之前兩個實驗所得結果差距較大，懷疑原因為稀釋液借出過程中被汙染，導致出現誤差。
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