原料處理：
原料：香菇。
試劑：蒸餾水，葡萄糖，苯酚，鋁片， 固體，濃硫酸，95%乙醇稀鹽酸，ph試紙，復合酶（木瓜蛋白酶：纖維素酶=2：1），
裝置和儀器：100ml容量瓶，6個50ml容量瓶，玻璃棒，蒸餾裝置（溫度計、沸石、三口燒瓶、冷凝管），燒杯若干，錐形瓶若干，棕色瓶乙個，抽濾瓶，1、2、5、10ml吸液管，電子天平，真空乾燥箱，恆溫水浴鍋，紫外分光光度計，粉碎機，40、60、80、100目的篩子， dl700-0.55×1.
5超高壓等靜壓機（上海大隆高壓裝置廠），真空幫浦，thz-82a台式恆溫振盪器，台式離心機。
1、標準葡萄糖溶液的配製
精密稱取105℃乾燥至恒重的葡萄糖100.0mg，加蒸餾水溶解並定容於100ml容量瓶中，搖勻，配成濃度為1mg/ml標準葡萄糖溶液備用。
2、5%苯酚試劑的配製。
苯酚水浴加熱溶解後稱取100g，加鋁片0.1g(先用1：6的鹽酸除去鋁片表面氧化鋁後，再稱量使用)，加入碳酸氫鈉30g，蒸餾，收集178-182℃的餾分，取餾出液7.
5g，加入蒸餾水150ml，得5.0％的苯酚溶液，置於棕色瓶中備用。
3、標準曲線繪製
以葡萄糖作為標準品，採用苯酚—硫酸比色法，用紫外分光光度計測定多醣含量。
精密吸取已配製的葡萄糖標準品溶液0.5，1，1.5，2，2.
5，3ml置於6個50ml容量瓶中，加蒸餾水至刻度線，搖勻。精密吸取2ml，分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，以溶劑蒸餾水為空白作對照，在400～600nm內掃瞄，最大吸收波長為490nm。
在490nm處，測吸光值，以濃度為縱座標，吸光值為橫座標，繪製標準曲線，得出葡萄糖標準品濃度y（ug/ml）與吸光值x的回歸方程：y=15.336x-0.
0298，r2=0.9997。在2.
5～15.0 ug/ml範圍內呈線性關係。
預處理：
將新鮮清洗乾淨，除去其根部，將剩下的菌傘擠壓，切小塊放入真空乾燥箱乾燥，待香菇恆質量，放入粉碎機中粉碎，將粉碎後的香菇粉依次通過40，60，80，100目的篩子，得到40目以下、40～60目、60～80目、80～100目、100目粒度以上的樣品，過篩之後把各級香菇粉分別裝到清潔乾燥的燒杯中，編號貼上標籤，置於真空乾燥箱中待用。
一、熱水法提取香菇多醣的方案
原料：香菇。
試劑：0.5%naoh，95%乙醇，蒸餾水。
裝置和儀器：燒杯（若干），玻璃棒，溫度計，錐形瓶（若干），漏斗，水浴鍋，稱量天平，thz-82a台式恆溫振盪器,台式離心機，紫外線分光光度計。
提取的方法與步驟：
1、粉碎度對提取率的影響
分別稱取40、60、80、100目的香菇粉5g，放入到250ml的錐形瓶中，加入蒸餾水100ml，混合均勻後置於90℃水浴鍋中，水浴提取2h，提取兩次，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合後過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到粉碎度與提取率的關係。
2、料液比對提取率的影響
稱取80目的香菇粉5g六份，放入到250ml的錐形瓶中，分別加入蒸餾水75、100、125、150、175、200ml，混合均勻後置於90℃水浴鍋中，水浴提取2h，提取兩次，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合後過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到粉碎度與提取率的關係。
3、提取溫度對提取率的影響
稱取80目的香菇粉5g，放入到250ml的錐形瓶中，加入蒸餾水100ml，混合均勻後置於65、75、80、85、90、95、100℃水浴鍋中，水浴提取2h，提取兩次，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合後過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到粉碎度與提取率的關係。
4、提取時間對提取率的影響
稱取80目的香菇粉5g五份，放入到250ml的錐形瓶中，加入蒸餾水100ml，混合均勻後置於90℃水浴鍋中，水浴提取2、3、4、5、6h，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合後過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到粉碎度與提取率的關係。
5、提取次數對提取率的影響
稱取80目的香菇粉5g四份，放入到250ml的錐形瓶中，加入蒸餾水100ml，混合均勻後置於90℃水浴鍋中，水浴提取2h，提取1、2、3、4次，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合後過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到粉碎度與提取率的關係。
二、復合酶法提取香菇多醣的方案
原料：香菇，
試劑：蒸餾水，稀鹽酸，ph試紙，復合酶（木瓜蛋白酶：纖維素酶=2：1），濾紙
裝置和儀器：真空乾燥箱，粉碎機，40、60、80、100目的篩子，燒杯（若干），三角瓶（若干），水浴鍋，量筒，漏斗，稱量天平，thz-82a台式恆溫振盪器，台式離心機。
提取的方法與步驟：
單因素實驗條件確定：
1、物料粒度對香菇多醣提取率的影響
分別稱取40目以下、40～60目、60～80目、80～100目、100目粒度以上的香菇粉各2g，放入到250ml的三角瓶中，標號貼上標籤，各加入蒸餾水30ml（料液比1∶15），混合均勻後置於50℃水浴鍋中，水浴1h，調節ph至6.5;稱取適量的按一定比例混合的復合酶（木瓜蛋白酶：纖維素酶=2：
1），放入100ml的燒杯中，加入5ml蒸餾水溶解，香菇溶液放在水浴中預熱至酶解溫度55℃，將酶液加入到香菇溶液中，在恆溫振盪器上提取，反應結束，過濾，將三角瓶放到沸水鍋中，10min沸水浴滅酶，滅酶結束，冷卻至室溫，將酶提取液放入到離心管中，調至4000r/min離心，取上清液，即得到酶提取多醣清液;將濾液稀釋一定的倍數（3倍），取2ml溶液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到物料粒度與提取率的關係。
2、料液比對香菇多醣提取率的影響
準確稱取80～100目粒度的香菇粉5份，每份2g，放入到250ml的三角瓶中，標號貼上標籤，分別加入蒸餾水20ml（料液比為1∶l0），30ml（料液比為1∶15），40ml（料液比為1∶20），50ml（料液比為1∶25），60ml（料液比為1∶30），混合均勻後置於50℃水浴鍋中，水浴1h，調節ph至6.5;稱取適量的按一定比例混合的復合酶（木瓜蛋白酶：纖維素酶=2：
1），放入100ml的燒杯中，加入5ml蒸餾水溶解，香菇溶液放在水浴中預熱至酶解溫度55℃，將酶液加入到香菇溶液中，在恆溫振盪器上提取，反應結束，過濾，將三角瓶放到沸水鍋中，10min沸水浴滅酶，滅酶結束，冷卻至室溫，將酶提取液放入到離心管中，調至4000r/min離心，取上清液，即得到酶提取多醣清液;將濾液稀釋一定的倍數（3倍），取2ml溶液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到料液比與提取率的關係。
3、復合酶濃度對香菇多醣提取率的影響
準確稱取80～100目粒度的香菇粉6份，每份2g，放入到250ml的三角瓶中，標號貼上標籤，分別加入蒸餾水40ml（料液比為1∶20），混合均勻後置於50℃水浴鍋中，水浴1h，調節ph至6.5;分別稱取適量的按一定比例混合的復合酶（木瓜蛋白酶：纖維素酶=2：
1）0.002g（為香菇粉乾質量的0.1%），0.
004g（為香菇粉乾質量的0.2%），0.006g（為香菇粉乾質量的0.
3%），0.008g（為香菇粉乾質量的0.4%），0.
010g（為香菇粉乾質量的0.5%），0.012g（為香菇粉乾質量的0.
6%），放入100ml的燒杯中，標號貼上標籤，加入5ml蒸餾水溶解，香菇溶液放在水浴中預熱至酶解溫度55℃，分別將酶液加入到香菇溶液中，在恆溫振盪器上提取，反應結束，過濾，將三角瓶放到沸水鍋中，10min沸水浴滅酶，滅酶結束，冷卻至室溫，將酶提取液放入到離心管中，調至4000r/min離心，取上清液，即得到酶提取多醣清液;將濾液稀釋一定的倍數（3倍），取2ml溶液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到復合酶濃度與提取率的關係。
三、高壓提取香菇多醣的詳細方案
試劑：蒸餾水，苯酚，鋁片， 固體，濃硫酸，葡萄糖
裝置和儀器：100ml容量瓶，玻璃棒，蒸餾裝置（溫度計、沸石、三口燒瓶、冷凝管），電子天平，紫外分光光度計， 1、2、5、10ml吸液管，水浴鍋，dl700-0.55×1.
5超高壓等靜壓機（上海大隆高壓裝置廠），真空幫浦，抽濾瓶。
提取的方法與步驟：
1、溶劑的選擇實驗
準確稱取100目的香菇粉5份，每份1g，放入到200ml的燒杯中，標號貼上標籤，分別加入40ml蒸餾水、5%乙醇、10%乙醇、95%乙醇、甲醇不同的溶劑，混合均勻，放入塑膠袋中並封口，密封，室溫浸泡24h，然後將樣品放入高壓容器內，啟動高壓油幫浦，公升高到所需的壓力，並在此壓力下保持一定時間(壓力:500mpa；保壓時間:5min)；然後快速開啟控制高壓油路的閥門，在2秒鐘之內卸除壓力，取出高壓加工後的樣品，去除包裝後，抽濾去除濾渣，得到香菇多醣的提取液，將濾液稀釋一定的倍數（3倍），取2ml溶液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到選擇的溶劑與提取率的關係。
2、浸泡時間的選擇實驗
準確稱取100目的香菇粉9份，每份1g放入到200ml的燒杯中，標號貼上標籤，，分別加入50ml蒸餾水，混合均勻，放入塑膠袋中並封口，密封，室溫浸泡時間分別為0，1，2，3，4，6，8，12，24h，然後分別將樣品放入高壓容器內，啟動高壓油幫浦，公升高到所需的壓力，並在此壓力下保持一定時間(壓力:200mpa；保壓時間:2min)；然後快速開啟控制高壓油路的閥門，在2秒鐘之內卸除壓力，分別取出高壓加工後的樣品，去除包裝後，抽濾去除濾渣，得到香菇多醣的提取液，將濾液稀釋一定的倍數（3倍），取2ml溶液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然後置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多醣提取率，得到浸泡時間與提取率的關係。
正交設計多醣提取實驗方案
多醣正交實驗方案 基本提取工藝流程 黃精 百合乾燥粉碎 石油醚脫脂2次 加水熱提 提取液過濾 水浴濃縮 離心取上清 加入sevag試劑脫蛋白操作 取上層水層 加無水乙醇沉澱 收集沉澱 用水溶解 過濾除雜質 重複1次醇沉 收集沉澱 加水溶解定容 成為貯備液。精密量取貯備液 加水稀釋定容 供測多醣含量。...
金絲小棗中多醣的提取
第 期 總第 期 年 月 農產品加工學刊 文章編號 金絲小棗中多醣的提取 楊新超，王瑞龍，秦余香，劉月輝，王軍 濟南大學醫學與生命科學學院，山東濟南 摘要 以金絲小棗為材料，研究了多醣提取的最佳條件。棗汁通過脫色 濃縮 乙醇沉澱 乾燥得到多醣，其中脫色 的最佳條件為活性碳的質量分數為 脫色 溫度為 ...
太子參多醣提取方法對比研究及工藝優化
作者 劉東張春紅陳鑫凌秋嫣韓邦興陳乃富 安徽農業科學 2014年第35期 摘要 目的 太子參多醣提取工藝對比研究得出最優方案，並對最優工藝進行優選。方法 分別採用水提醇沉法 超聲波法 微波輔助熱水提取法提取太子參多醣，對比得出最優方法，且對最優提取法的工藝引數進行優化。結果 最優提取方法為超聲波法 ...