【中圖分類號】r19 【文獻標識碼】a 【文章編號】1004-7484（2013）03-0655-01
衛生檢驗中的微生物學是生命科學領域涉及面廣，應用性強的一門學科，隨著科學的飛速發展，人們由過去被動認識客觀事物，發展到積極創造各種實驗方法，主動去認識客觀事物。在多年的檢測實踐中體會到，革蘭氏染色是微生物染色方法中最典型，重要的一種，在鑑別微生物及臨床選用藥物諸方面具有非常重要的意義。
經典的革蘭氏染色方法由草酸按結晶紫初染一碘液媒染一酒精脫色一沙黃復染四個主要步驟組成。酒精脫色一步，則是革蘭氏染色成敗的關鍵，脫色不夠會造成假陽性，脫色過度又會出現假陰性。脫色時間長短除與菌齡相關外，還與塗片的厚薄均勻相關，操作中必須注意掌握脫色的程度。
為克服這一不足，實踐中探索性改用了正丙醇脫色。通過比較試驗發現，用酒精脫色，脫色時間過長革蘭氏陽性細菌金黃色葡萄球菌通過染色會產生革蘭氏陰性反應，若菌齡越老，顏色脫去的時間越短。而改用正丙醇脫色，脫色時間在一革蘭氏陰性細菌大腸桿菌初染成的蘭紫色被脫去，而金黃色葡萄球菌仍為蘭紫色，即使是脫色時間長達1分鐘，金黃色葡萄球菌蘭紫也不會脫去，且老齡菌體，脫色較長時間不受影響。
可見用正丙醇脫色，時間便於控制，也不影響革蘭氏染色反應。
也可用甘油代替香柏油。由於香柏油的折射率與玻璃折射率非常相近，在細菌觀察中香柏油被常用為物鏡與標本之間一種介質，不僅可以增加照明度，也可提高解析度。但使用香柏油觀察後，永久裝片，物鏡，測量微生物大小校正用的鏡台測微尺的清洗必須使用強有機溶劑二甲苯，二甲苯則對人體具有很強毒害作用，是一類劇毒物品，有致癌作用。
實驗室通風不暢，長時間觀察操作，大量實驗證明，空氣中二甲苯濃度過高，人吸入過多會造成頭暈，嘔心不舒服症狀。此外由於染色玻片上香柏油難以用自來水清洗，往往使用後丟棄較多造成玻片浪費。在染色觀察細菌的一些實驗中，改用折射率與香柏油相近的甘油，基本能達到同樣的觀察效果，且使用甘油有更大優越性。
由於甘油親水性，物鏡可用擦鏡紙沾無水乙醇擦洗，自製染色的標本易用自來水清洗，標本片涼乾後又可儲存，且可反覆觀察使用。改用甘油作為油浸系的介質，避免使用清洗劑二甲苯，有利於操作者身體健康。
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