實驗六PEG法誘導細胞融合

2022-11-29 08:18:05 字數 916 閱讀 5476

【實驗材料】

1. 材料新鮮雞血細胞。

2. 器材離心機、天平、顯微鏡、離心管、水浴鍋、血球計數板、載玻片、蓋玻片、離心管、容量瓶、燒杯和注射器等。

3. 試劑

(1)0.85%生理鹽水。

(2)雙蒸水。

(3)肝素:肝素是一種抗凝劑,在體內外都有抗凝血作用。。

(4)hanks:hanks液是生物實驗中最常用的無機鹽溶液和平衡鹽溶液。

(5)50% peg溶液:稱取一定量的peg(mw= 4000)放入燒杯,沸水浴加熱使之融化,待冷卻至50℃時,加入等體積預熱至50℃的hanks液,混勻,置於37℃備用。可再配製60%和30%的peg溶液做對比研究不同濃度peg的融合效果。

(6)詹納斯綠b染液。

【實驗方法】

1.把雞殺掉取血,使血液與肝素的比例達1:4左右,混勻後待用。

2.取此貯存雞血1 ml加入4 ml 0.85%生理鹽水,充分混勻,1000 r/min離心5 min,棄去上清,重複上述條件離心兩次。最後棄去上清,加hanks液4 ml,離心。

3.棄去上清,加hanks液,製成細胞懸液。

4.取上述細胞懸液鏡檢。如果密度過大,用hanks液調整細胞間距離0.5至1倍細胞直徑大小。

5.取以上細胞懸液l ml於離心管,放入37℃水浴中預熱。同時將50% peg液一併預熱15 min。

6.將50% peg溶液0.5 ml逐滴沿離心管壁加入到1 ml細胞懸液中,邊加邊搖勻,然後放入37℃水浴中保溫30 min。中途隨時鏡檢觀察細胞融合情況。

7.加入hanks液至8 ml,靜置於水浴中15 min左右。

8.將詹納斯綠b染液加入試管,混勻,10min後取少量懸浮液於載玻片上,蓋上蓋玻片,觀察細胞融合情況。

在高倍鏡下可以看到有兩個或兩個以上的雞紅細胞膜融合在一起,形成乙個異核體細胞。要注意辨別融合細胞與重疊的雞紅細胞。

實驗六精餾實驗

對於雙組分混合液的蒸餾,若已知汽液平衡資料,測得塔頂流出液組成xd 釜殘液組成xw,液料組成xf及回流比r和進料狀態,就可用 法在y x圖上,或用其他方法求出理論塔板數nt。精餾塔的全塔效率et為理論塔板數與實際塔板數n之比,即 影響塔板效率的因素很多,大致可歸結為 流體的物理性質 如粘度 密度 相...

實驗五 實驗六

一 實驗目的 掌握fir濾波器的設計方法 二 實驗裝置 計算機 zy13dsp12bd實驗箱 5402evm板。三 實驗原理 參考教材第七章第二節 fir濾波器的dsp實現方法 四 實驗內容 將採集到的訊號經過dsp處理,將fir處理後的波形在ccs中顯示出來。五 實驗步驟 1 用 機將計算機與zy...

物理實驗法總結

1 控制變數法 在實驗中或實際問題中,常有多個因素在變化,造成規律不易表現出來,這時可以先控制一些物理量不變,依次研究某乙個因素的影響和利用。如氣體的性質,壓強 體積和溫度通常是同時變化的,我們可以分別控制乙個狀態參量不變,尋找另外兩個參量的關係,最後再進行統一。歐姆定律 牛頓第二定律等都是用這種方...