基礎科學中國畜牧獸醫文摘２０１４年３ｏ卷第１ｏ期
俞小紅（蘇州市畜牧獸醫站，江蘇蘇州
２１５１２８）
［摘要］採用布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）和布氏桿菌病抗體ｅｌｉｓａ試驗等兩種方法對本地２８８頭奶牛進行布氏杆
菌病檢測，兩者陽性符合率為８３．ｏ％，陰性符合率為９８．３％，總體符合率為９６．９％。結果表明：單獨採用ｒｂｔ檢測布氏桿茵病存在假陽性和假陰性現象，ｅｌｉｓａ試驗陽性檢出率、敏感性和特異性均高於ｒｂｔ，兩者結合運用於該病檢測，對有效防控布氏桿菌病起到了重要作用。
［關鍵詞］奶牛
布氏桿菌病檢測方法研究
近年來，布氏桿菌病的發病率呈上公升趨勢，本病的傳播流行陰性的樣本中虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）檢出率為陰性的樣本比率嚴重影響到畜牧業的持續健康發展，更嚴重威脅著人類的健康，為ｒｂｔ特異性。
已成為嚴重的公共衛生問題。
目前，江蘇省奶牛布氏桿菌病按照現階段國家動物疫病監測
計畫分類標準屬二類地區，對所有乳用、種用牛／羊進行布氏桿菌病監測。實行以監測、檢疫、生物安全和淨化為主的綜合防治措施。加強奶牛布氏桿菌病監測，撲殺陽性牛是控制「兩病」的關鍵措施之一。
根據有關規定，蘇州市奶牛布氏桿菌病監測方案從２０１１年開始由原來的１年１次監測頻次增加為１年２次，上、下半年各監測１次，並且嚴格按照規定執行，一旦發現陽性牛經省級動物
疫病預防和控制中心監測部門複核確診為陽性的立即撲殺，但仍存在淘汰不淨的現象，因此，建立科學的監測方案，優化檢測方法，提高檢測方法的靈敏度和特異性是淨化奶牛布氏桿菌病的前
提和基礎。為此，我們在市內的部分市、區重點陽性牛場開展奶
牛布氏桿菌病優化檢測方法的研究試驗。
１材料和方法
１．１研究材料
１．１．１儀器裝置
酶標儀、離心機、微量**器、水浴箱、玻板等。
１．１．２試驗材料
（１）試劑：布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗抗原，購自中國獸
醫藥品監察所，１５ｍｌ／瓶；布魯氏菌病虎紅凝集試驗陽性血清、陰性血清，購自青島易邦生物工程****，１ｍｙ瓶；布氏桿菌抗體ｅｌｉｓａ檢測試劑盒，購自北京愛德士元亨生物科技****，
２×９６。
（２）試驗動物：吳中區、相城區、常熟市的重點陽性奶牛場。根據試驗需要並結合牛場實際，本試驗共選取了２８８頭奶牛作為試驗樣本。
１．２試驗內容和方法
１．２．１試驗內容
（１）奶牛布氏桿菌病檢測：分別用布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）和布氏桿菌抗體檢測（ｅｌｉｓａ）試驗檢測布氏桿菌病，比較虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）和ｅｌｉｓａ這兩種方法的優缺點。
（２）兩種檢測方法的陰、陽性檢出率和符合率的比較：兩種
方法檢出陽性、陰性樣本數佔總檢測數的百分率為陽性、陰性檢出率。兩種方法檢測都為陽性的樣本數量佔兩者分別檢出陽性樣本數量之和的百分率為兩者的陽性符合率。兩種方法檢測都為陰性的樣本數量佔兩者分別檢出陰性樣本數量之和的百分率為兩者的陰性符合率。
兩種方法檢測都為陰性和陽性樣本數之和佔總檢
測樣本數的百分率為兩者的總體符合率。
（３）敏感性和特異性的比較：以布氏桿菌抗體檢測（ｅｌ１ｓａ）試驗為結果判定標準，布氏桿菌抗體檢測（ｅｌｉｓａ）試驗檢測為陽性的樣本中虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）檢測為陽性的樣本比率為ｒｂｔ的敏感性，布氏桿菌抗體檢測（ｅｌｉｓａ）試驗檢測為７４
１．２．２檢測方法
（１）布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）：按照ｇｂ／ｔ１８６￣一２ｏ０２方法進行。
（２）布氏桿菌抗體ｅｌｉｓａ檢測試驗：具體操作按照試劑盒說明書進行。２結果與分析２．１抗體檢測
用布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）和布氏桿菌抗體檢測試劑盒（ｅｌｉｓａ）試驗分別對２８８頭奶牛進行了布氏桿菌抗體的檢測，兩種方法的檢測結果見表１。表１兩種試驗檢測結果統計
２．２兩種檢測方法的比較
從表１中可以看出，２４頭虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）陽性牛中檢出布氏桿菌病抗體ｅｌｉ
ｓａ試驗陽性２２頭，陰性２頭。２６４頭虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）陰性牛中檢出布氏桿菌病抗體ｅｌｉ
ｓａ試驗陽性牛７頭，陰性２５７頭。虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）的陽性檢出率為布氏桿菌病抗體ｅｌｉｓａ試驗陽性檢出率
為１０．
兩種方法的陽性符合數為２２頭，陽性符合率為８３．
陰性符合數為２５７頭，陰性符合率為兩者的總體符合率為以布氏桿菌病抗體ｅｌｉｓａ試驗作為結果判定標準，２９頭布氏桿菌病抗體ｅｌｉｓａ試驗陽性牛中，虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）檢出
的陽性牛為２２頭，敏感性為７５．
頭布氏桿菌病抗體ｅｈｓａ試驗陰性牛中虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）檢出的陰性牛為
２５７頭，特異性為小結與討論
（１）通過布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）和布氏杆
菌病抗體ｅｌｉｓａ試驗兩種方法的比較（表１），可以看出ｅｌｉ
ｓａ陽性檢出率（１０．
１％）高於兩者的陽性符合率為８３．
ｏ％，陰性符合率為９８．３％，總體符合率為９６．９％，說明兩種方法總體檢測結果比較一致，具有較好的符合率。
（２）從表１可以看出，布氏桿菌病抗體ｅｌｉｓａ試驗２９頭陽性牛中虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）只檢出２２頭陽性牛，有７頭為ｒｂｔ
陰性；布氏桿菌病抗體ｅｌｉ
ｓａ試驗２５９頭陰性牛中虎紅平板凝集試驗（ｒｂｔ）檢出的陰性牛為２５７頭，有２頭ｒｂｔ為陽性。從檢測數
據可以看出，以布氏桿菌病抗體ｅｌｉ
基礎科學中國畜牧獸醫文摘２０１４年３ｏ卷第１ｏ期
潤、半透明、灰白色小菌落。分離純化後的細菌經革蘭氏染色鏡果顯示：磺胺類、呋喃類和一些抗生素類對本病有一定的療效。
檢後觀察，視野中可見有大量散在排列，形態均一的革蘭氏陰性但磺胺類藥物可抑制鵪鶉生長，並干擾飼料、飲水的攝入和蛋的
短桿菌，兩端鈍圓，中等大小。綜合臨床診斷和細菌分離結果分生產。僅有短期經濟價值；呋喃類以呋喃唑酮為好，拌人濃度為析，細菌的形態上符合沙門氏菌的特性。
０．０４％，作為預防則０．０１１％即可，可連用１０ｄ；也可以同樣濃度配
２．２生化試驗結果
成飲水。注意：呋喃類用藥不可過量，拌藥均勻、溶解充分，否
細菌的生化特性符合沙門氏菌的特性，葡萄糖、麥芽糖、甘則，易發生中毒。氯黴素等一些抗生素對本病也有一定療效。但
露醇產酸產氣；對蔗糖、肌醇、乳糖不發生反應，呈現陰性；對現在對呋喃類和抗生素類藥物的耐藥菌株已屢有發現，主要是一硫化氫、構櫞酸鹽、鳥氨酸脫羧酶呈陽性。些藥物的濫用，導致細菌的抗藥性增強，甚至發生變種，所以，２．３動物致病性試驗結果在用藥之前最好做藥敏試驗。各類藥物可以交叉使用。
實驗組小白鼠均在２４ｈ內死亡，對照組小白鼠均健活。解剖人類沙門氏菌食物中毒潛伏期約７～２４ｈ，間或可延長至數死亡小白鼠，主要病變有：肝淤血，胃內膨脹鼓氣，腸道出血，日，吃進的細菌量愈大、細菌毒力愈大，則潛伏期愈短，常突然脾腫大呈紫褐色。
取小白鼠肝做成觸片，革蘭氏染色可見與病死發病，體溫公升高、伴有頭痛、噁心、腹痛、嘔吐和腹瀉，**可鵪鶉做病料時一樣的革蘭氏陰性桿菌。將所分離的細菌採用麥用抗生素和氫化考的松，脫水可滴注葡萄糖鹽水，３～４ ｄ內康康凱培養基３７℃培養，４８ｈ後在平板上形成圓形凸起、光滑、溼復。潤、半透明、灰白色菌落。
挑取單個菌落作生化試驗符合生化反以上所述，在一定程度上反應了生產實際中禽沙門氏菌的發應效果。病原因及如何通過藥敏試驗加強對**藥物的選擇，及其公共衛
２．４藥敏試驗結果
生意義，為禽類沙門氏菌病的綜合防制措施提供了幫助。
本菌對複方新諾明、環丙沙星高度敏感；對氯黴素、呋喃妥參考文獻因中度敏感；對慶大黴素低敏、丁胺卡那黴素低敏。［１］徐耀輝，焦新安，胡青海，等．雞白痢和雞傷寒沙門氏菌的
３討論ｐｃｒ～ｒｆｌｐ分子類別【ｊ１．揚州大學學報（農業與生命科學版），
通過臨床診斷、細菌形態及生化試驗結果顯示鹽城大豐地區
送檢鵪鶉病例中所分離培養出的細菌符合沙門氏菌的生化特性，
【２】陸承平．獸醫微生物學【ｍ］．北京：中國農業出版社，２００１：
致病性試驗顯示分離菌株具有致病性，由此初步診斷出這個疑似２２３—２４０．
病例為沙門氏菌感染。
［３］聞玉梅．現代獸醫微生物學［ｍ］．上海：上海醫科大學出版社，
選用７種臨床上常用的抗菌藥物對其進行藥敏試驗，結果表
明，分離菌株對複方新諾明、環丙沙星高度敏感；對氯黴素、呋【４１姜泊．分子生物學常用實驗方法［ｍ］．北京：人民軍醫出版社，
喃妥因中度敏感；對慶大黴素、丁胺卡那黴素低敏。藥敏試驗結
１９９５：１ｏ７．
（上接第７４頁）
ｒｂｔ試驗敏感性（７５．９％）較ｅｌｉｓａ試驗低，檢測的血清中布氏桿陰性，造成誤診和漏診。ｅｌｉｓａ是ｏｉｅ國際**中指定的試驗，操
菌病抗體還未達到布氏桿菌病虎紅凝集抗原檢測的肉眼可見凝集作簡便，敏感性極高，能較早檢測到凝集抗體，及早發現隱性帶濃度，我們分析這可能是造成實驗結果出現假陰性現象（漏診）菌牛口】，彌￥￣ｒｂｔ的不足。如果在普查、引進新牛或重點陽性、可
30例布氏桿菌病的觀察與護理體會
作者 張莉莉侯玉紅陳慧妍 中國實用醫藥 2014年第36期 摘要 目的 布氏桿菌病的觀察與護理方法。方法回顧性分析30例患者的臨床資料，護理方法包括心理護理 發熱多汗的護理 關節疼痛的護理 併發症的觀察及健康教育。結果經過1個療程的 25例痊癒，另外5例經過2 3個療程後痊癒。除了關節疼痛以外，沒有...
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