HPLC操作規程和注意事項

2022-08-28 02:06:02 字數 775 閱讀 3779

3. c18柱絕對不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。

4. 每次做完樣品後應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

5. 長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭封好儲存,注意不能用純水儲存柱子,而應該用有機相(如甲醇等),因為純水易長黴。

6. 不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致幫浦不進液。

7. 更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振盪邊清洗,然後插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。

8. 不要高壓沖洗柱子,不要在高溫下長時間使用矽膠鍵合相色譜柱

9. 溶劑瓶中的砂芯過濾頭容易破碎,在更換流動相時注意保護,當發現過濾頭變髒或長菌時,不可用超聲洗滌,可用5%稀硝酸溶液浸泡後再洗滌;

10. 操作過程若發現壓力很小,則可能管件連線有漏,注意檢查。

11. 在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩衝液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩衝液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。

12. 裝流動相的容器和色譜系統中的**過濾器等裝置應該定期清洗或更換。

13. 使用緩衝液或含鹽的流動相,實驗完成後應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:

不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料衝塌陷。

14. 如色譜柱要長時間儲存,必須存於合適的溶劑下。對於反相柱可以儲存於純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存於嚴格脫水後的純正己烷中,離子交換柱可以儲存於水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,並將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。

儲存的溫度最好是室溫。

HPLC操作注意事項

hplc 高效液相色譜 操作注意事項 換上新的流動相 停流 換上新流動相 閥門轉到沖洗端 4ml min流速,變化率10min 實現流速前再確認一下是否轉到沖洗端 沖洗20min 停流 閥門轉到過柱端 設定流速 總流量為1ml min 變化率為5min。緩衝鹽會在高有機相濃度的溶液中析出,導致管路堵...

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