HPLC操作注意事項

hplc（高效液相色譜）操作注意事項

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換上新的流動相：停流——換上新流動相——閥門轉到沖洗端——4ml/min流速，變化率10min（實現流速前再確認一下是否轉到沖洗端）—— 沖洗20min——停流——閥門轉到過柱端——設定流速（總流量為1ml/min），變化率為5min。

緩衝鹽會在高有機相濃度的溶液中析出，導致管路堵塞，損傷儀器。因此使用緩衝鹽時有機溶液的含量應小於80%。

三．柱壓上限

建立的液相方法其柱壓上限應小於3800psi

四．流動相的使用

任何流動相必須用0.22um濾膜抽濾兩遍。其ph值及流動相的選擇必須在色譜柱允許範圍內。

五．樣品的處理

樣品進樣前必須過0.22um的濾膜。其ph值，分子量大小，在流動相中的溶解性及純度必須符合要求。

六.色譜柱的清洗

色譜柱使用前以及使用後都必須用10%甲醇水，流速1ml/min沖洗45min。

七.儀器關機步驟

進樣完以後，關閉檢測器及柱溫箱——將流動相換為甲醇和水——用10%甲醇水，流速1ml/min清洗色譜柱45min——用100%甲醇（hilic極性柱用90%甲醇水），流速1ml/min儲存色譜柱45min——停流——拆下色譜柱——關閉脫氣機，二元溶劑管理器及電腦。