做實驗需要注意的五大細節

2022-08-17 19:39:06 字數 2049 閱讀 6012

實驗的成功率很重要,而要提高成功率,就必須注意細節。以下是做實驗需要注意的五大細節:

一,記錄

人的記憶力是有限的,在做實驗的時候,不可能記住做過的每一步。例如實驗記錄如果不及時寫,第二天就會忘記很多,一周之後就完全忘記了。所以做實驗一定要做好實驗記錄。

記錄一要及時,否則就會忘記,最好是隨時記錄。二要詳細,因為乙個很小的細節可能就是實驗失敗或者成功的原因,如果沒有記下這個細節,實驗出問題了就難以找到原因。例如,做實驗用的試劑是哪一瓶,什麼時候配的(尤其是容易失效的試劑),如果是用pbst配的5%bsa,加了0.

02%的sodium azide抑制微生物生長,就應該記錄為5%而不是5%bsa。三要整潔,如果過於潦草,看起來很不方便,需要找相關資訊的時候就難以找到。配好的試劑做好標籤也是一種記錄,標籤一定要詳細:

包括試劑名稱、配置日期、配置者及其它必要資訊。在配試劑的時候,為了防止忘記貼標籤的情況,應該先貼標籤,再加試劑。電子記錄有易於檢索的優點,對於某些重要資訊,可以記錄到電子文件(例如word文件)裡面。

二,核查

很多時候,我實驗失敗的原因是沒有仔細核查,例如沒有核查果蠅的表型,沒有仔細檢查試劑的標籤,沒有核查離心機的轉速,沒有檢查heat block的溫度等等。每乙個小錯誤都可能導致實驗失敗,所以一定要養成仔細核查的習慣。具體來說,在加試劑的時候,一定要仔細核查標籤(包括試劑名稱、配置日期),是否有沉澱,顏色是否改變等;使用儀器的時候,要核查設定,例如溫度、轉速、時間設定等;電泳的時候,要核查是否有氣泡冒出;使用實驗動物的時候,要核查表型等。

三,分裝

諺語說:不要把所有雞蛋都放到同乙個籃子裡。同樣,在做實驗的時候,有時也不要把所有試劑都放到同乙個容器裡。

分裝有很多好處。第一,保險。可以防止因為汙染、變質等原因損失全部試劑或者樣品。

第二,容易混勻。結冰的試劑需要全部溶解然後vortex才可以混勻,如果很大體積,有時會等不及全部溶解就開始加樣,會導致濃度不均。一般溶液都是先溶解溶質濃度高的,就像是結冰的汽水一邊融化一邊喝,一開始很甜,最後幾乎沒有甜味了,是因為糖份的存在會降低熔點,含糖量高的先溶解了。

分裝後,每一管溶液量小,解凍時容易全部溶解。注意在分裝的時候一定要全部溶解並充分混勻。第三,延長保質期。

很多試劑都要低溫儲存。如果不分裝,每次使用的時候都全部受熱一次,變質就會很快。分裝之後,每次使用只有少量試劑受熱,其它的還可以繼續保持於低溫,可以延長使用壽命。

抗體、體積較大的酶、熱不穩定的其它試劑等最好分裝儲存於-20度或者更低的溫度。

四,混勻

實驗對很多試劑的用量都有明確要求。要保證實驗的成功和可重複性,必須保證試劑用量一致。用量等於體積乘以濃度,如果溶液不混勻的話,濃度就會不同,即使加樣體積一樣,實際的量也可能不一樣。

所以,一定要保證試劑是充分混勻。結冰的試劑,必須完全溶解才可以使用。容易沉澱的試劑,使用之前必須充分vortex後再快速離心一下才能使用。

五,備份

在《at the bench》一書裡,作者說如果實驗室發生**等危急情況,首先應該搶救的不是試劑,而是實驗記錄。因為有了實驗記錄才可以完成**。其實,為了防止實驗記錄丟失的情況,可以把實驗記錄掃瞄為pdf文件以備份。

同時,對於重要的研究資料,最好整理成電子文件例如excel或word文件,並且養成對自己的電腦檔案定期備份的習慣。此外,質粒、轉化後的細菌也需要備份。最好備份兩份以降低丟失的概率。

六,順序

有時候需要給很多試管加不同的試劑。這麼多試管和試劑,一不小心,就會忘記哪一管或者哪一樣試劑加了沒有。即使是只有兩三個試管,我有時候加了乙個樣品,忽然就忘記是加了哪一管了。

如果是按字母或者數字順序加樣的話,在這種情況下,就會清楚是加了哪一管。

具體來說,給試管加樣的時候,按照試管的字母順序,數字順序排列。例如做同乙個質粒的酶切,用了四種酶,分別是xbai,kpni,bamhi,bsteii,就按照從左至右分別為bamhi,bsteii,kpni, xbai的順序排列。把要加的試劑寫在紙上,按照從上至下,從左至右的順序加樣。

對於同乙個試劑,加一管,就把試管往左、右或者上、下移動一格。電泳時,不同的泳道順序為marker、control、實驗組。如果有多個marker或者control,也按照字母或者順序排列。

收集樣品時,按照先時間順序,後字母、數字順序排列樣品。

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