【摘要】腦組織石蠟切片的染色結果，易出現切片染色不清楚，脫片、假陽性，假陰性出現。免疫組化這些結果的出現，與組織固定，抗原修復，內源性過氧化物酶活性的滅活，抗體質量，顯色試劑質量，蘇木素質量，時間上的把握及技術人員熟練程度有關，得出了免疫組化的過程的很多細節及各個步驟的主要的注意事項，提高腦組織切片的免疫組化染色操作技術。
【關鍵詞】腦組織；石蠟切片；免疫組化；染色
隨著免疫組化技術廣泛應用於科學和醫學各個領域的研究和診斷中，免疫組化的技術已經成為一種基本的檢測技術，如何提高免疫組化的技術，特別是腦組織切片在免疫組化中的檢測，是每乙個科研人員在檢測中最關心的問題，現將近幾個月大鼠腦組織切片的免疫組化技術的一些體會和細節概況如下：
1 腦組織固定體會
用4%的多聚甲醛固定，固定之前要保持腦組織的平整和完整，不能被擠壓，以免影響細胞的形態，影響電鏡下觀察。
2 腦組織防脫片的處理
（1）傳統的防脫片的處理方法有延長烤片的時間、提高烤片的溫度和重新脫水［2］。免疫組化前，切片在58-60℃的恆溫箱中烤2-24 h［1］，在脫蠟和脫水過程中，把切片稍晾乾後再行下一步的免疫組化過程。但不能進行高溫烤片，在乾燥的條件下加熱切片可以加速組織中抗原的氧化而破壞組織中的抗原［2］。
（2）玻片進行化學試劑處理玻片為充分洗淨乾燥的磨砂防脫載玻片。可以選用免疫組織化學染色中常用防脫片劑即多聚-l-賴氨酸(poly-llysine)對載玻片進行處理，處理後載玻片不易脫片。
3 抗原修復
（1）少數抗體可以選擇酶消化法.如原位末端標記法（tunel）試劑盒中以蛋白酶k為消化酶，在這過程中，注意蛋白酶k的濃度不能過高，過程中不能超過10 min，以免修復太過出現假陰性，且bps洗滌要徹底。
（2）熱修復注意事項。
高壓加檸檬酸鹽(ph6. 0)緩衝液修復，時間為5分鐘，冷卻後連續修復2次。水浴鍋修復時水溫為95℃，修復時間為15～60 min。
須等緩衝液冷卻至室溫,才能把切片取出，取切片時防燙傷。
石蠟切片製作流程
一.取材 1，樣品要求 長，寬各1cm左右，厚不超過5mm 2，固定液 10 固定液或4 多聚甲醛 組織塊 20 1為宜 3，固定時間 依大小而定，一般3 5h即可，如24h或更長，應密封瓶口，封前換液 4,修塊 二.脫水 1，水洗 將固定組織塊放入廣口瓶，瓶口用紗布包好，置流水下水洗，水洗時間依固...
石蠟切片製作過程
一 材料與用具 1 材料 魚 性腺 腸 肝胰臟等。2 用具 溶蠟箱 蠟杯 不同熔點的石蠟 酒精燈等。二 實驗內容與步驟 1 取材及固定 取動物體上的小塊組織成為組織塊。組織塊的大小以不超過0.5立方厘公尺為宜。切去組織塊時動作要輕，切忌用力牽引或挾持，以免組織內部發生變化。組織塊取下後，先用先用0....
石蠟切片的製作方法
石蠟切片 1 儀器 石蠟切片機 烘箱 顯微鏡 染色缸 小培養皿 鑷子 毛筆 吸水紙 紗布 載玻片 蓋玻片等。2 試劑 faa固定液 70 酒精90ml 冰醋酸5ml 5ml 10 番紅水溶液 0.5 固綠 用95 的酒精配製 酒精 100 95 80 70 50 二甲苯 蒸餾水 甘油 中性樹膠等。3...