遺傳前言研究

2023-01-17 14:21:01 字數 3353 閱讀 6624

高通量測序技術(high-throughputsequencing)又稱「下一代」測序技術("next-generation"sequencingtechnology),以能一次並行對幾十萬到幾百萬條dna分子進行序列測定和一般讀長較短等為標誌。

基因晶元:該技術係指將大量(通常每平方厘公尺點陣密度高於 400 )探針分子固定於支援物上後與標記的樣品分子進行雜交,通過檢測每個探針分子的雜交訊號強度進而獲採樣品分子的數量和序列資訊。

gwas(genome-wide association study),即全基因組關聯分析,是指在人類全基因組範圍內找出存在的序列變異,即單核苷酸多型性(snp),從中篩選出與疾病相關的snps。

腫瘤幹細胞:腫瘤中具有自我更新能力並能產生異質性腫瘤細胞的細胞。

自殺基因(suicide gene),是指將某些病毒或細菌的基因匯入靶細胞中,其表達的酶可催化無毒的藥物前體轉變為細胞毒物質,從而導致攜帶該基因的受體細胞被殺死,此類基因稱為自殺基因。

fish(fluorescence in situ hybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或dna纖維切片上的靶dna與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶dna與核酸探針的雜交體。

原理:將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、地高辛,可利用該報告分子與螢光素標記的特異親和素之間的免疫化學反應,經螢光檢測體系在鏡下對待測dna進行定性、定量或相對定位分析。

實驗流程:fish樣本的製備→探針的製備→探針標記→雜交→染色體顯帶→螢光顯微鏡檢測→結果分析。

small interfering rna (sirna):是一種小rna分子(~21-25核苷酸),由dicer(rnaase ⅲ家族中對雙鏈rna具有特異性的酶)加工而成。sirna是sirisc的主要成員,激發與之互補的目標mrna的沉默。

rna干涉(rnainterference,rnai)是指內源性或外源性雙鏈rna(dsrna)介導的細胞內mrna發生特異性降解,從而導致靶基因的表達沉默,產生相應的功能表型缺失的現象

sirna有如下特點:

1. 長度約在22nt左右。

2. 依賴dicer酶的加工,是dicer的產物,所以具有dicer產物的特點。

3. 生成需要argonaute家族蛋白存在。

4. 是risc組分。

5. sirna合成是由雙鏈的rna或rna前體形成的。

6. sirna一般是人工體外合成的,通過轉染進入人體內,是rna干涉的中間產物;植物體內也存在內源的sirna。

7. 結構上, sirna是雙鏈rna。

8. 在dicer酶的加工過程中, sirna對稱地**於雙鏈rna的前體的兩側臂。

9. 在作用位置上, sirna可作用於mrna的任何部位,並與mrna完全互補。

10. 在作用方式上, sirna只能導致靶標基因的降解,即為轉錄水平後調控。

11. sirna不參與生物生長,是rnai的產物,原始作用是抑制轉座子活性和病毒感染。

microrna (mirna) 是一類由內源基因編碼的長度約為22 個核苷酸的非編碼單鏈rna 分子,它們在動植物中參與轉錄後基因表達調控。到目前為止, 在動植物以及病毒中已經發現有28645 個mirna 分子。大多數mirna 基因以單拷貝、多拷貝或基因簇(cluster) 的形式存在於基因組中

rna干擾(rna interference, rnai)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈rna(double-stranded rna,dsrna)誘發的、同源mrna高效特異性降解的現象。基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(tgs)和轉錄後水平的基因沉默(ptgs)兩類:tgs是指由於dna修飾或染色體異染色質化等原因使基因不能正常轉錄;ptgs是啟動了細胞質內靶mrna序列特異性的降解機制。

有時轉基因會同時導致tgs和ptgs。

由於使用rnai技術可以特異性剔除或關閉特定基因的表達,(長度超過三十的dsrna會引起干擾素毒性)所以該技術已被廣泛用於探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的**領域。

動物轉殖是一種通過核移植過程進行無性繁殖的技術。不經過有性生殖過程,而是通過核移植生產遺傳結構與細胞核供體相同動物個體的技術,就叫做動物轉殖。

真核基因組的特點之一就是存在多基因家族(multi gene family)。多基因家族是指由某一祖先基因經過重複和變異所產生的一組基因。多基因家族大致可分為兩類:

一類是基因家族成簇地分布在某一條染色體上,它們可同時發揮作用,合成某些蛋白質;另一類是乙個基因家族的不同成員成簇地分布不同染色體上,這些不同成員編碼一組功能上緊密相關的蛋白質。

細胞週期(cell cycle)是指細胞從一次**完成開始到下一次**結束所經歷的全過程,分為間期與**期兩個階段。

側翼序列就是側翼基因。 側翼基因:在第乙個和最後乙個外顯子的外側,都有一段不被轉錄的非編碼區。

稱為側翼序列,包括啟動子(promoter),增強子(enhancer),終止子(terminator)等。側翼序列調節基因表達

交叉遺傳:男性患者的x連鎖致病基因必然來自母親,以後又必定傳給女兒,這種遺傳方式稱交叉遺傳。

真核生物的基因組相當於基因的一股由只有乙個複製dna序列(也稱單一dna,unique sequence,single copy sequence,nonrepetitive sequence等)和具有多數反覆存在的dna順序組成,稱後者為重複順序。

遺傳標記是指在遺傳分析上用作標記的基因,也稱為標記基因。

遺傳標記包括形態學標記(morphological marker)、細胞學標記(cytological marker)、生物化學標記(biochemical marker)、免疫學標記(immune genetic markers)和分子標記(molecular marker)五種型別。

hnrna遺傳資訊從dna分子轉錄到rna分子中的過程稱為轉錄(transcription)。在真核生物中,最初轉錄生成的rna稱為不均一核rna(heterogeneous nuclear rna,hnrna)。核內不均一rna為存在於真核生物細胞核中的不穩定、大小不均的一組高分子rna(分子量約為105~2×107,沉降係數約為30-100s)之總稱。

佔細胞全部rna之百分之幾,在核內主要存在於核仁的外側。認為hnrna多屬信使rna(messenger ribonucleic acid,mrna)之前體,包括各種基因的轉錄產物及其成為mrna前的各中間階段的分子,在5'末端多附有間隙結構,而3'的末端附有多聚腺苷酸聚合酶分子。這些hn-rna在受到加工之後,移至細胞質,作為mrna而發揮其功能。

大部分的hnrna在核內與各種特異的蛋白質形成複合體而存在著。

遺傳工程也叫基因工程(gene engineering)基因操作(gene manipulation)或重組dna技術(recombination dna technique)是20世紀70年代以後興起的一門新技術其主要原理是用人工的方法把生物的遺傳物質通常是脫氧核糖核酸(dna)

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