第一類：諾貝爾獎及發展趨勢
1、2002簡1——分別以一句話簡介1999和2023年諾貝爾獎獲獎專案中有關細胞生物學的內容
2、2005簡1——簡介2002和2023年諾貝爾獎獲獎專案中有關細胞生物學的內容主題
3、2004簡6——請談談如何理解目前生物學研究中分子生物學向細胞生物學回歸的現象
4、2006簡3——什麼是幹細胞？概述幹細胞的型別與功能，並簡要敘述幹細胞研究的意義和前景
5、2008簡6——最近美國和日本科學家分別將人體**細胞改造成類似胚胎幹細胞，這一成果在理論上、實踐上有何意義？
6、2009問答4-----綠色螢光蛋白（gfp）的發現及研究者獲得了2023年諾貝爾化學獎，他們的具體貢獻是什麼？該成果在細胞生物學有關領域研究中有何應用？簡述應用的原理與主要步驟。
參***：諾貝爾獎獲獎專案中有關細胞生物學的內容主題
1、2023年，美國科學家甘特·布洛貝爾。他發現了蛋白質內控制蛋白質在細胞內傳輸和定位的訊號。獲得諾貝爾醫學及生理學獎。
2、2023年瑞典科學家阿爾維德·卡爾松、美國科學家保羅·格林加德、奧地利科學家埃里克·坎德爾因在人類腦神經細胞間訊號的相互傳遞方面獲得的重要發現，而共同獲得諾貝爾醫學及生理學獎
3、2023年美國科學家利蘭·哈特韋爾、英國科學家蒂莫西·亨特、保羅·納斯因發現了細胞週期的關鍵分子調節機制，而共同獲得諾貝爾生理學及醫學獎。
4、2023年英國科學家雪梨·布雷內、約翰·蘇爾斯頓、美國科學家羅伯特·霍維茨因選擇線蟲作為新穎的實驗生物模型，找到了對細胞每乙個**和分化過程進行跟蹤的細胞圖譜，而共同獲得諾貝爾醫學及生理學獎。
5、2023年美國科學家保羅·勞特布林、英國科學家彼得·曼斯菲爾德因在核磁共振成像技術領域的突破性成就，而共同獲得諾貝爾生理學及醫學獎。
6、2023年美國科學家理查德·阿克塞爾和琳達·巴克，以表彰兩人在氣味受體和嗅覺系統組織方式研究中作出的貢獻，共同獲得諾貝爾生理學及醫學獎。
7、2023年諾貝爾生理學或醫學獎授予澳大利亞科學家巴里"馬歇爾和羅蘋"沃倫，以表彰他們發現了導致胃炎和胃潰瘍的細菌——幽門螺桿菌。
8.2023年諾貝爾生理學或醫學獎授予美國科學家安德魯·菲爾和克雷格·梅洛，以表彰他們發現了控制基因資訊流動的基本機制，rna干擾的發現。
9.2023年諾貝爾生理學或醫學獎授予美國科學家馬里奧-卡佩奇和奧利弗-史密西斯、英國科學家馬丁-埃文斯，這三位科學家是因為「在涉及胚胎幹細胞和哺乳動物dna重組方面的一系列突破性發現」而獲得這一殊榮的。這些發現導致了一種通常被人們稱為「基因打靶」的強大技術。
這一國際小組通過使用胚胎幹細胞在老鼠身上實現了基因變化。
基因打靶技術
基因打靶技術是一種定向改變生物活體遺傳資訊的實驗手段，它的產生和發展建立在胚胎幹(es)細胞技術和同源重組技術成就的基礎之上，並促進了相關技術的進一步發展。基因打靶技術將廣泛應用於基因功能研究、人類疾病動物模型的研製以及經濟動物遺傳物質的改良等方面。
1．原理
首先獲得es細胞系，利用同源重組技術獲得帶有研究者預先設計突變的中靶es細胞。通過顯微注射或者胚胎融合的方法將經過遺傳修飾的es細胞引入受體胚胎內。經過遺傳修飾的es細胞仍然保持分化的全能性，可以發育為嵌合體動物的生殖細胞，使得經過修飾的遺傳資訊經生殖系遺傳。
獲得的帶有特定修飾的突變動物提供研究者乙個特殊的研究體系，使他們可以在生物活體中研究特定基因的功能。目前，在es細胞進行同源重組己經成為一種對小鼠染色體組上任意位點進行遺傳修飾的常規技術。通過基因打靶獲得的突變小鼠己經超過千種(相關資料庫參見文獻)，並正以每年數百種的速度增加。
通過對這些突變小鼠的表型分析，許多與人類疾病相關的新基因的功能已得到闡明，並直接導致了現代生物學研究各個領域中許多突破性的進展。
2．實驗流程
3．特點
基因打靶技術是一種定向改變生物活體遺傳資訊的實驗手段。通過對生物活體遺傳資訊的定向修飾包括基因滅活、點突變引人、缺失突變、外源基因定位引入、染色體組大片段刪除等，並使修飾後的遺傳資訊在生物活體內遺傳，表達突變的性狀，從而可以研究基因功能等生命科學的重大問題，以及提供相關的疾病**、新藥篩選評價模型等。基因打靶技術的發展己使得對特定細胞、組織或者動物個體的遺傳物質進行修飾成為可能。
4．應用
基因打靶技術在基因功能研究中的應用、應用基因打靶技術研製人類疾病動物模型、應用基因打靶技術改良動物品系和研製動物反應器等。
幹細胞：
4、2006簡3#——什麼是幹細胞？概述幹細胞的型別與功能，並簡要敘述幹細胞研究的意義和前景
答案：幹細胞(stem cell)是一種未充分分化，尚不成熟的細胞，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能，醫學界稱之為「萬用細胞」。 幹細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。
幹細胞有兩種分類方法，一是根據幹細胞所處的發育階段分為胚胎幹細胞(embryonic stem cell，es細胞)和成體幹細胞(somatic stem cell)。第二種分類方法是根據幹細胞的發育潛能分為三類：全能幹細胞(totipotent stem cell,tsc)、多能幹細胞（pluripotent stem cell）和單能幹細胞（unipotent stem cell）。
胚胎幹細胞的發育等級較高，是全能幹細胞，而成體幹細胞的發育等級較低，是多能或單能幹細胞。
胚胎幹細胞（embryonic stem cell， es細胞）：胚胎幹細胞當受精卵**發育成囊胚時，內層細胞團（inner cell mass）的細胞即為胚胎幹細胞。胚胎幹細胞具有全能性，可以自我更新並具有分化為體內所有組織的能力。
成體幹細胞：成年動物的許多組織和器官，比如表皮和造血系統，具有修復和再生的能力。成體幹細胞在其中起著關鍵的作用。
在特定條件下，成體幹細胞或者產生新的幹細胞，或者按一定的程式分化，形成新的功能細胞，從而使組織和器官保持生長和衰退的動態平衡。過去認為成體幹細胞主要包括上皮幹細胞和造血幹細胞。最近研究表明，以往認為不能再生的神經組織仍然包含神經幹細胞,說明成體幹細胞普遍存在，問題是如何尋找和分離各種組織特異性幹細胞。
成體幹細胞經常位於特定的微環境中。微環境中的間質細胞能夠產生一系列生長因子或配體，與幹細胞相互作用，控制幹細胞的更新和分化。造血幹細胞造血幹細胞是體內各種血細胞的唯一**，它主要存在於骨髓、外周血、臍帶血中。
幹細胞的用途：非常廣泛，涉及到醫學的多個領域。目前，科學家已經能夠在體外鑑別、分離、純化、擴增和培養人體胚胎幹細胞，並以這樣的幹細胞為「種子」，培育出一些人的組織器官。
幹細胞及其衍生組織器官的廣泛臨床應用，將產生一種全新的醫療技術，也就是再造人體正常的甚至年輕的組織器官，從而使人能夠用上自己的或他人的幹細胞或由幹細胞所衍生出的新的組織器官，來替換自身病變的或衰老的組織器官。利用造血幹細胞移植技術已經逐漸成為**白血病、各種惡性腫瘤放化療後引起的造血系統和免疫系統功能障礙等疾病的一種重要手段。科學家預言，用神經幹細胞替代已被破壞的神經細胞，有望使因脊髓損傷而癱瘓的病人重新站立起來；不久的將來，失明、帕金森氏綜合症、愛滋病、老年性痴呆、心肌梗塞和糖尿病等絕大多數疾病的患者，都可望借助幹細胞移植手術獲得**。
5、2008簡6#——最近美國和日本科學家分別將人體**細胞改造成類似胚胎幹細胞，這一成果在理論上、實踐上有何意義？
答案：美國和日本科學家分別將人體**細胞改造成類似胚胎幹細胞，再一次證明了動物細胞的全能性，同時可能意味著風靡一時的胚胎幹細胞轉殖技術退出舞台。因為這種被稱為「直接改造」的技術不僅能避免人體胚胎轉殖技術引發的倫理爭議，其高效、便利也為進一步醫學應用開啟了大門。
英國科學家伊恩·威爾默特在乙份宣告中說:「我們現在可以設想這麼乙個時代:能夠以一種簡單方式製造幹細胞，任何人身上的組織標本均能培育出任何組織器官。
」 這項技術尚不能完全取代胚胎細胞轉殖技術，因為它現階段的實驗方式存在潛在***。美日研究小組利用逆轉錄酶病毒「改造」**細胞，這種病毒可能使基因產生變異，引發腫瘤等***。因此，在評估和克服這一潛在風險前，「萬能細胞」還不能用於器官移植等臨床應用。
6、2009問答4#-----綠色螢光蛋白（gfp）的發現及研究者獲得了2023年諾貝爾化學獎，他們的具體貢獻是什麼？該成果在細胞生物學有關領域研究中有何應用？簡述應用的原理與主要步驟。
答案：2023年10月8日，日本科學家下村修（伍茲霍爾海洋生物學研究所）、美國科學家馬丁·查爾菲（哥倫比亞大學）和錢永健（加利福尼亞大學聖地牙哥分校）因為發現和改造綠色螢光蛋白而獲得了當年（2008）的諾貝爾化學獎。在細胞生物學與分子生物學領域中，綠色螢光蛋白基因常被用作為乙個報導基因(reporter gene)。
一些經修飾過的型式可作為生物探針，綠色螢光蛋白基因也可以轉殖到脊椎動物上進行表現，並拿來映證某種假設的實驗方法。
gfp螢光極其穩定,在激發光照射下，gfp抗光漂白(photobleaching)能力比螢光素(fluorescein)強，特別在450～490nm藍光波長下更穩定。gfp需要在氧化狀態下產生螢光，強還原劑能使gfp轉變為非螢光形式，但一旦重新暴露在空氣或氧氣中，gfp螢光便立即得到恢復。而一些弱還原劑並不影響gfp螢光。
中度氧化劑對gfp螢光影響也不大,如生物材料的固定、脫水劑戊二酸或甲醛等。由於gfp螢光是生物細胞的自主功能，螢光的產生不需要任何外源反應底物，因此gfp作為一種廣泛應用的活體報告蛋白，其作用是任何其它酶類報告蛋白無法比擬的。綠色螢光蛋白應用於骨架和細胞**研究（如rna剪下因子的核內運輸、細胞骨架動力和胞內運輸），細胞器動力學和泡囊運輸的研究（用gfp顯示小囊運輸、用gfp觀察tgn運輸），生物發育研究（用gfp觀察線蟲的神經發育、分析果蠅神經發育的不對稱性細胞**）等。
利用常規的dna重組技術將gfp基因與目的蛋白基因的編碼區連線形成乙個單一的融合基因表達載體，然後將這一重組表達載體匯入細胞，使融合蛋白得到瞬時或穩定表達，通過檢測這些gfp的螢光來測定這些蛋白的位置。或者利用gfp的螢光特性對某一蛋白的n-或c-末端進行標記，然後借助螢光顯微鏡或共聚焦顯微鏡便可對標記的蛋白進行細胞內活體觀察。
第二類：細胞生物學常用的研究方法
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