抑菌試驗方法

抑菌圈測量是微生物分析的經典方法。它是利用抑菌物質在塗佈特定試驗菌的瓊脂培養基內成球形立體狀擴散，抑制試驗菌的繁殖，在抑菌物質的周圍形成透明圈，即抑菌圈。

管碟法測定生物效價：利用抗生素在瓊脂培養基內的擴散作用，採用量反應平行線原理的設計，比較標準品與供試品兩者對接種的試驗菌產生抑菌圈的大小，以測定供試品效價的一種方法。

製藥企業，藥檢所常常進行抗生素的效價測定，最普遍的方式就是管碟法測定生物效價。管碟法測定生物效價實驗中存在大量抑菌圈測量工作，常規都是用游標卡尺手工測量抑菌圈的直徑，如今可以用儀器自動進行分析，提高檢測精度，減少測量誤差。

迅數-自動抑菌圈測量系統是通過ccd採集數字影象後，進行自適應差分濾波預處理，採用改進的四叉樹交叉熵分割演算法進行準確快速的分析，精確檢測出抑菌圈直徑資料，最後對資料建模統計，自動得到分析結果。所有分析過程只要一秒就可以完成。

手動測量存在的問題有：

1.重現性差，準確性不夠：同一培養皿，不同的人測量結果有差異；

2.當抑菌圈呈卵原形、邊緣模糊或出現雙層圈時，邊界確

定的人為誤差大；

3.乙個培養皿內有大量抑菌圈時，如做菌種篩選時，無法人工測量；

自動抑菌圈測量的好處在於：快速、精度高、重現性好、操作簡單。

示意;將試樣剪成直徑為2-3公分的園片,緊緊平貼在已接種試驗菌種的fda瓊脂培養基表面上,經37℃24小時培養,培養基表面上長出密密麻麻的菌落,而試樣周圍有乙個不長菌落的"暈圈".測量暈圈環的寬度,用公釐表示.(如果沒有暈圈,應揭開試樣,檢查樣品覆蓋若無菌落可視為樣品具有非溶出性抗菌作用.

應進一步用搖晃燒瓶--菌落數測定法評價效將細菌植入或嫁接入營養瓊脂培養基的表面，通過在營養瓊脂培養基上形成的抑制圈來評估其抗菌效果。目前普遍採用該方法來觀測抗菌素的抗菌效果。圖1描述了抑菌圈測試方法。

圖1:塗層後基於抑菌圈的抗菌測試日本工業標準(jis)z2801:20009和astme2180-0110是目前使用最廣泛的測試評估方法。

使用jisz2801方法，在塗層表面接種細菌細胞懸液並通過無菌聚丙烯膜或無菌載玻片使其緊密接觸一定時間，通常為24h。只要求(但不限於)測試兩種菌株：金黃色葡萄球菌(atcc#6538)和大腸桿菌(atcc#11229)。

抗菌活性值由抗菌產品和未經處理產品在24小時接觸後的活細胞數的對數值的差異決定。通過測試的產品，其細菌對數減少值不應

小於2.0。圖2描述了jis測試方法。