細胞培養室管理規章制度 1221

2022-12-06 03:12:01 字數 4225 閱讀 3564

細胞培養室是進行各種細胞培養的淨化級實驗室,所有進入實驗室的人員都必須遵守實驗室有關的規章制度,接受實驗室管理人員的管理。

第一章總則

第一條細胞培養室主要由團隊內相關科研人員使用,原則上不對外開放,其他人員如確實需使用細胞室必須預先徵得實驗室負責人和細胞室負責人同意。

第二條進出細胞室實驗需要嚴格登記。如有不符合實驗室工作和生物安全要求的,實驗室負責人和細胞室工作人員有權責令整改。

第三條使用人員需參加專門的細胞培養室使用規範培訓並通過考核後,方可獲准進入細胞培養室進行實驗。嚴禁未經許可擅自進入細胞培養室或使用相關裝置。

第四條細胞培養室正常使用過程中,人員進出應通過緩衝間和風淋間;進出實驗室的器械和樣品需通過傳遞窗,嚴禁隨身帶入。實驗用品應盡量一次帶入,嚴禁將與實驗無關的物品帶入實驗室,在細胞培養室內不得進行微生物等其它易汙染物的培養,禁止從事任何高危生化實驗。

第五條實驗人員應愛護實驗室各類儀器,按照規則使用並保持裝置清潔。實驗中的昂貴裝置,未經許可不得擅自開關。精密儀器需經專門培訓後方能操作未經許可不得改變裝置儀器的預設引數。

裝置儀器出現故障或發生事故,應及時向實驗室負責人報告,安排專業人員進行檢修。

第二章條例

第一條常規操作

1. 穿著專用實驗服。實驗人員必須在細胞室緩衝間內更換細胞室專用實驗服,嚴禁不穿實驗服或直接穿著普通實驗室實驗服進入細胞室。

2. 穿著專用拖鞋。在準備間換下自己的鞋子,盡量避免在緩衝間走動、停留。

3. 細胞室最多可6個人同時使用。

4. 實驗過程中嚴禁喧嘩,閒聊,反覆進出培養室。

第二條培養箱使用規則

1. 從培養箱取放物品前,用酒精清潔雙手(或手套),盡量縮短開門時間和減少開門次數。

注:培養箱中的空氣是經過過濾的潔淨空氣。長時間敞開或頻繁開關培養箱,容易造成汙染。

2. 從培養箱拿取細胞時輕拿輕放,動作迅速,隨手關緊培養箱門。未經允許,禁止翻看、移動他人細胞或樣品,如有特殊需要的,請聯絡實驗室負責人協調。

3. 培養瓶皿放入培養箱前,用酒精消毒表面,並稍等至酒精揮發後再放入,以免培養箱內滯留過多乙醇蒸氣。

4. 培養箱內細胞培養的放置需整潔有序,方便查詢,同時應盡量提高培養箱的使用效率,負責老師可視實驗情況啟用或停止空培養箱的使用,節約資源。

5. 普通培養中的細胞,若非實驗特殊需要,每瓶/板細胞每天只需要觀察生長狀態一次,2人以上共用的細胞,可約好時間一起觀察。

注:頻繁將細胞拿出觀察,容易給培養箱造成汙染,同時也會影響細胞生長條件的恆定。

6. 原代細胞需放置在原代培養專用培養箱培養,不得放置於其他培養箱,如一段時間內無原代細胞實驗,負責人可協調安排培養箱供其他細胞培養使用。

7. 實驗人員應經常注意檢查培養箱溫度、co2氣體量是否相符設定值。密切注意培養箱內的增濕盤,定期更換無菌水並進行消毒。

密切注意培養箱內情況,如出現霉變、菌斑、支原體和衣原體感染或其他明顯染菌跡象,應立即通知管理員及其它使用者。

第三條顯微鏡使用規則

1. 倒置相差顯微鏡使用前,用酒精棉從中間至周圍擦拭載物台。

2. 離開細胞室時或較長時間不需使用時,及時關上電源,延長燈泡壽命。盡量避免頻繁開關顯微鏡電源。

3. 一次細胞實驗使用完畢後,在顯微鏡使用記錄本上登記。

4. 螢光顯微鏡屬於貴重儀器需遵循貴重儀器預約使用規程。

第四條超淨臺相關操作規則

1. 超淨臺使用遵循預約原則。在細胞室入口處預約,細胞室內填寫使用登記。

a:無預約者若有必要在他人預約時段內使用,需先徵得預約者的同意,否則應無條件讓出工作台,以免耽誤他人實驗。

b:使用記號筆在預約**上提前預約下一周的使用時間,請注意週六週日是指上週的週末。

c:預約內容請包括:時間範圍,姓名,如特殊實驗請寫明。

2. 超淨臺使用前用紫外燈照射15分鐘滅菌,使用前、後需用酒精棉球擦拭工作區消毒,所有物品放入超淨台內使用前均應消毒,超淨台內嚴禁堆放過多物品影響風路平衡,不同超淨台內物品嚴禁頻繁交換使用。

3. 點燃酒精燈前需檢查瓶中酒精是否足夠,液面應佔瓶高1/3-2/3。

注: 消毒用75%的酒精,酒精燈用95%以上的酒精,向噴壺或燈內新增酒精時請留意。

4. 超淨台中應擺放廢液杯,用於暫時存放廢棄物,實驗結束後將杯內加入naoh溶液處理片刻,廢液垃圾倒入水池並同時用水衝釋,固體垃圾倒入生物樣品專用垃圾桶中

注:廢液缸應及時處理,嚴禁長時間放置,以免留有大量培養液滋生細菌。

5. 細胞實驗後任何含有細胞培養汙物的培養瓶,離心管,移液管等必須及時帶出細胞房。

第五條器具的清洗規則

1. 可**的移液管、離心管、培養瓶皿等,放入裝有清水的塑料桶中浸泡,桶內需有足量的清水以沒過浸泡物品。

注:可**器皿必要時先初步涮洗後再放入桶內,尤其是培養瓶或血清管中有大量高營養的液體殘留時,容易使桶內的清水長菌。保證浸泡的瓶、管內完全被清水充滿,而不是在裝有大量空氣的情況下被壓倒桶底。

2.清水沖洗後及時放入酸缸浸泡,應由使用者本人及時清洗晾乾備用,操作時請注意帶橡膠手套,小心操作。

注: 禁止長時間浸泡於清水中,此時細菌可能已在桶中生長並釋放內毒素。細菌內毒素很難通過常規濕熱滅菌步驟去除乾淨,即使乾烤也不能保證其完全失活。

內毒素對細胞生長及多種實驗均有較大影響。

洗滌程式:清水衝十次以上去除重金屬殘留,然後衝去離子水5次,再用超純水5次,倒置於烘箱中晾乾。並及時包紮滅菌。

第六條冰箱、試劑等相關操作規則

1. 從冰箱取放物品動作要迅速,關門時要檢查門是否關好。按類別存放試劑。嚴禁長時間敞開冰箱門。

2. 各人存放於冰箱內的培養液、生化試劑、樣品要註明姓名、配製日期、樣品名稱,特殊試劑需獲得細胞室管理人員同意後方能放置。不得使用他人的培養液或其他生化試劑。

3.分裝好的血清長時間儲存於-80℃,使用前放於4℃預解凍。原則上解凍好的血清應全部配成含血清的培養基備用,若有剩餘,則暫存於4℃並盡快使用。

盡量不要使用他人開過的血清,以免交叉汙染。

4. 細胞室內的冰箱空間有限,盡量僅放置使用頻率較高的試劑。請勿將一些閒置試劑,汙染試劑長期放置在細胞室。

5. 工作人員會定期對冰箱進行清理,發現無標記,過期試劑等違規物品將全部清除出去,並且查詢試劑配置人給予警告。

第七條進入細胞室物品控制

1. 所有進入細胞室的物品需經過傳遞窗,盡量經過紫外照射,酒精表面消毒。

2. 嚴禁將可能含有汙染物或病原菌的實驗物品帶入細胞室。

3. 細胞室內僅放置少量實驗必須耗材即可,不得整箱搬入,出現潔淨室內物品堆積狀況。

4. 細胞室內儲物櫃的物品放置由相關管理人員安排,並做標記。

第八條細胞室清潔守則

1.每週值日生時間從週六開始,至下周五結束。

2.日常維護:注意培養箱顯示正常,顯微鏡,冰箱,超淨臺的正常使用與維護。細胞室內以及門口生物樣品專用垃圾桶的及時清理。

3. 每週大清潔:每週五下午五點用新潔爾滅打掃細胞室。

清潔順序:擦超淨臺(用酒精棉球);用新潔爾滅擦桌面,培養箱,超淨臺以及冰箱外壁,及桌上的儀器,細胞室牆面,傳遞窗,風淋室;給水浴鍋加水或換水,細胞室衣櫃和拖鞋擺放整齊,拖地,紫外消毒細胞室30分鐘。

注:若上週值日生及時給培養箱內水槽加足水,根據經驗未來一周內培養箱不會乾水,但值日生仍應經常檢查,以便及時發現異常情況。切記給培養箱加滅菌水。

4. 在沒有出現問題的情況下,每2個月清潔一次培養箱:先將培養箱中的物品取出暫存於超淨台內,對於比較敏感的細胞可以暫存於另乙個培養箱;將培養箱內的不鏽鋼板取出,包括4塊橫板和左右2塊立著的架子,用酒精棉球清潔鋼板和培養箱內壁;啟動培養箱自消程式。

第九條人員培訓

1. 由將要做細胞實驗的人員提出申請,填寫細胞培養室使用申請表。

2. 細胞室負責老師視申請人數酌情安排培訓時間,培訓內容包括安全培訓、理論知識與實踐操作培訓。

3. 培訓考核合格後由導師、培訓老師、細胞室負責人簽字確認授予其細胞室使用許可權。

4. 培訓不合格者重新參加培訓。

第十條制度的實施與處罰

1. 細胞室負責人以及管理人員密切關注細胞室的使用情況,發現違反規章操作者首先給予提醒,但須做記錄。

2. 對於一周內違反3次以內者予以警告,3-5次者給予停止細胞室使用許可權2周,超過5次者停用其對細胞室使用許可權,需重新參加培訓後才能再次使用。

第三章附則

本規章制度從公布之日起開始執行,由生物醫學工程團隊實驗室管理委員會負責解釋及更正。本實驗室追求不斷地進步,各位老師及使用人員若有良好的建議可與細胞室負責人或實驗室管理委員會成員溝通,我們會及時協調,旨在為團隊提供和諧,高效的實驗條件。

生物醫學工程實驗室管理委員會二零一一年十二月二十一日訂

細胞培養室使用申請表

編號:注:本表一式3份,細胞實驗室負責人乙份,導師和本人乙份,實驗室委員會存檔乙份。

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