生化實驗電泳技術及其應用
電泳技術及其應用
一：電泳（electrophoresis）：帶電粒子在直流電場中向著
所帶電性相反的電極移動的現象。
電泳分析技術：利用電泳現象進行物質分離的技術。
二：影響電泳的因素：
1．帶電粒子的帶電狀態（電量和電性）。
2．帶電粒子的分子量大小和分子形狀。
3．電場強度。
4．緩衝液的ph值，組成成分及離子強度。
5．支援介質的吸附和電滲作用。
三：蛋白質電泳的機理
1．蛋白質是兩性電解質：
當 ph=pi時，所帶淨電荷為零；當 ph>pi時，所帶
淨電荷為負；當 ph距離pi越遠時，所帶電量越多。
2．不同蛋白質等電點不同，在同一緩衝液中所帶電性及
電量不同，電泳時遷移的方向和速率不同。
3．不同蛋白質分子量大小和分子形狀不同，故遷移率不
同。四：實驗：血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳
（一）原理：
1．人血清蛋白質的分類，等電點，分子量及遷移率：第 1 頁共 4 頁武漢科技大學醫學院生物化學教研室陳勇
血清蛋白質等電點
（pi）分子量
（mw）
遷移率μ
（cm2/
白蛋白（a） 4.8 68500 5.9×10-5
α1球蛋白（α1-g） 5.06 >10萬 5.1×10-5
α2球蛋白（α2-g） 5.06 >10萬 4.1×10-5
β球蛋白（β-g） 5.12 >10萬 2.8×10-5
γ球蛋白（γ-g） 6.85-7.3 >10萬 1.0×10-5 2．在ph8.6的緩衝液中均帶負電，泳向正極。
3．染色漂洗後，可見5條帶（定性）。
4．洗脫比色後可定量（今天不做）。
（二）器材和試劑：
1．電泳儀 2. 電泳槽 3. 載波片，點樣器，鑷子
4.染缸
5. 醋纖膜
6. 巴比妥緩衝液
7. 氨基黑染液8. 漂洗液
（三）操作：
1．準備：
1）將緩衝液倒於電泳槽中（每池約500ml）。
2）將醋纖膜浸泡在緩衝液中20min。
3）每人取一張醋纖膜（用鑷子夾取），用濾紙吸乾水分，找到粗糙面，在距一端2cm處劃點樣線，
用鉛筆或原子筆寫上學號。
2．加樣：用加樣器加樣；取樣要適量、均勻（點樣器下端均勻沾有一層血清即可）；點樣於劃線處，點樣
時用力要均勻，只能點一次。
3．上橋：粗糙面向下，點樣端位於負極。紗布搭橋。4．平衡：蓋上蓋子，靜置5min。
5．電泳：120v，電泳45min（電泳使不得用手觸控電泳槽內任何物品，以防觸電）。
6．染色和漂洗：染色5min；初漂、次漂各2min：用鑷子夾拄醋纖膜輕輕搖動，或輕輕晃動染缸。
7．定量：剪下各條帶，洗脫，比色。（不做）
（四）結果：參見原理。
（五）臨床意義：
1．白蛋白降低：
1）合成能力不足：肝功能下降。
2）合成原料不足：飢餓，腹瀉，腫瘤晚期。
3）去路增加：腎病綜合症，嚴重燒傷，大出血等。
4）消耗過多：糖尿病，甲亢等
2．球蛋白增加：感染，多發性骨髓瘤，自身免疫性疾病等。
3．球蛋白降低：皮質功能亢進，免疫缺陷病。
4．肝病時：a ,α2-g ,β- g α1-g , γ-g
a/g下降甚至倒置。
5．腎病時：
1）早期：選擇性蛋白尿：分子量較小的蛋白質丟失，含量下降。如白蛋白。
2）後期：非選擇性蛋白尿：除分子量較小的蛋白質
丟失，含量下降外，分子量較大的蛋白質（如γ
-球蛋白）也丟失，含量也下降。
電泳技術發展簡史
1809年 物理學家 泳現象。首次發現電泳現象。他在溼粘土中插上帶玻璃管的正負兩個電 極，加電壓後發現正極玻璃管中原有的水層變混濁，即帶負電荷的粘土顆粒向正極移動，這就是電1909年michaelis首次將膠體離子在電場中的移動稱為電泳。他用不同ph的溶液在u形管中測定了轉化酶和過氧化氫酶的電泳移動...
爆破技術相關知識
光面爆破和預裂爆破的相關技術知識 段位 延時相同的非電毫秒雷管為同一段位，常使用的段位有 ms1 延時小於13ms ms2 延時25ms ms3 延時50ms ms4 延時75ms ms5 延時110ms ms6 延時150ms ms7 延時200ms ms8 延時250ms ms9 延時310ms...
相關技術措施
1 鋼板 1.1 碳素鋼和低合金鋼鋼板 1.1.1 鋼板的標準 使用狀態及許用應力按表1的規定。1.1.2 殼體用鋼板 不包括多層容器的層板 應按表2的規定逐張進行超聲檢測,鋼板超聲檢測方法和質量等級按jb t 4730.3的規定。1.1.3 受壓元件用鋼板，其使用溫度下限按表3的規定，表3中q24...