注意：xfect polymer 不要在室溫下擱置長於30min
4. 充分混均每個管
5. 把tube2新增到tube1中，中速渦旋10秒。
6. 在室混下孵育dna-xfect混合物10min，這時可形成奈米複合物。
7. 把1200l的dna-xfect溶液（第5步製備）加入到第1步準備好的細胞中，前後左右輕輕晃動培養血，使其均勻。
8. 在37℃條件下培養。
9. 4小時或過夜後，換10ml的完全生長培養基，在37℃條件下在培養24-48h。病毒滴定量在48h後可達到最高。注意：移棄的培養液包含了可感染的慢病毒。
10. 吸取慢病毒懸液。在500g下離心10min。注意：懸浮液包含可感染的慢病毒。
11. 用lenti-x gostixtm鑑定病毒產物或者滴定病毒株。然後可用病毒產物轉導靶細胞。也可在-80℃儲存。
b：lenti-viruses轉導靶細胞
1. 轉導前12-18h，用完全生長培養基培養靶細胞
2. 輕輕混合凍融的病毒株或從細胞包裝得到的病毒株，不要渦旋。需要提醒的是每次的凍融都降低2-4倍的病毒效價
3. 根據靶細胞的培養液的量調節病毒和聚凝胺的新增量。在轉導中可用足量的聚凝胺（ ）來獲得需要的最終濃度
4. 用細胞培養液稀釋病毒株，獲得需要的moi。如要不知道病毒效價，可連續稀釋病毒株或包裝懸液，使得用於轉導的病毒總量不會超過病毒包裝時培養液的1/3。
5. 在靶細胞中加入病毒懸液，轉導8-24h。離心的培養液可以增加感染效率。
6. 移除丟棄存留病毒的轉導培養液，換成新鮮的生長培養液。注意：移棄的培養液包含可感染的慢病毒。
7. 繼續培養細胞24-48h，在靶細胞中積累基因產物。
8. 收集細胞進行分析，或者用合適的抗生素再進行篩選。
注意：為了檢測轉導效率，可以選取少量細胞用抗生素處理。剩餘的細胞可進行後續的分析。細胞進可能用完，但不要轉導後少於24h內進行分析。
慢病毒包裝操作方案
一 材料 1 細胞培養試劑 2 慢病毒包裝試劑 3 耗材 50 ml離心管 15 ml離心管 10 cm細胞培養皿 0.45 m過濾器 2 ml ep管 二 操作流程 1 細胞培養 1.1 293t 293ft細胞的復甦 1 將完全培養液從4 c中取出放置到室溫預熱30 min左右。在超淨台內，用吸...
包裝操作說明
包裝前準備 1.仔細檢驗待包裝產品，保證產品無髒汙 並貼有銘牌和生產編號後方可開始包裝。2.仔細檢驗包裝盒，保證包裝盒無破損 壓痕 劃傷後方可開始包裝。3.檢驗電池 usb插頭和產品是否裝袋 usb線和導聯線是否已纏綁絲。包裝過程和步驟 1.把包裝盒內底的海綿更換成夾層 如圖所示 2.放上底托棉 如...
包裝流水線操作說明
1.首先物料從噴霧乾燥機出來，通過軟連線落入料倉內，料倉由乙個筒蓋與三隻料筒組成，料筒底部設有腳輪，當乙隻料筒差不多滿了只需提起蓋子，即可方便調換料筒。2.放滿料的料筒移動到w型混合機下方，把真空輸送機的吸料筒放入料筒入，啟動真空輸送機，即可把料筒內的物料吸入混合機。3.等混合機內裝入所需的混合量後...