（2）酶反應終止液（10×）：
兩種反應終止液可供選擇。①0.1mol/l edta-na2，20%ficoll，適量橙g。
②0.25%溴酚藍，0.25%二甲苯青ff（或稱二甲苯藍），40%蔗糖水溶液（m/v）（或用30%蔗糖水溶液）。
［實驗步驟］
1，質粒dna的酶解
質粒dna酶解的反應成分及加樣量
2，瓊脂糖凝膠板的製備
（1）瓊脂糖凝膠的製備：稱取0.14g瓊脂糖，置於藍蓋試劑瓶中，加入20ml tae緩衝液，置於高壓滅菌鍋內加熱，鍋內壓力為至121kpa時維持10min，瓊脂糖即可全部融化在緩衝液中，取出搖勻，則為0.
7%瓊脂糖凝膠液。
（2）膠板的製備：取有機玻璃內槽，洗淨、晾乾。
（3）放好樣品加樣孔合適的梳子。
（4）將冷卻至65度左右的瓊脂糖凝膠液，小心地倒在有機玻璃內槽上，控制灌膠速度，使膠液緩慢地展開，直到在整個有機玻璃板表面形成均勻的膠層。室溫下靜置30min左右。
（5）待凝膠完全凝固後，將鋪膠的有機玻璃內槽放在電泳槽內備用，加入足量電泳緩衝液。
（6）輕輕拔出梳子。
3，加樣
（1）預先染色dna
（2）用微量加樣器將樣品加入膠版的樣品小槽內，加樣時槍頭垂直於樣品槽上方，注意不能碰到樣品槽的凝膠面。
（3）每次加完乙個樣品，及時更換槍頭，以防止相互汙染。加樣時，應防止碰壞樣品槽周圍的凝膠面。
4，電泳
正確連線正負極，dna向正極移動。
加完樣品後的凝膠板立即通電，進行電泳。但要注意控制一定的條件，樣品進膠前，應使電流控制在30ma，樣品進膠後電流為30ma。當橙g或溴酚蘭染料移動到距離膠板下沿約1~2cm處，停止電泳。
5，拍照觀察
［實驗結果］
［結果分析］
限制性內切酶考點小結
限制性內切酶是基因工程中最難把握的知識點，高考中對這種酶的考察特別重視，我們有必要對相關的知識先進行歸納，才有利於解答試題。1 限制性核酸內切酶的基本知識 及化學本質 主要是從原核生物中分離純化出來的。化學本質為蛋白質。作用 催化作用，可用於dna的切割獲取目的基因和載體的切割，切割的化學鍵為磷酸二...
限制性定語從句與非限制性定語從句的六點區別
區別一 形式不同 限定性定語從句主句和從句之間不用逗號隔開，口語中使用時也不停頓 而非限定性定語從句與主句之間通常有逗號隔開，口語中使用時有停頓。區別二 功能不同 限定性定語從句用於對先行詞的意義進行修飾 限制和識別，如果去掉，就會造成句意不完整或概念不清 而非限定性定語從句用於對先行詞起補充說明作...
質粒DNA的提取 定量 酶切與PCR鑑定實驗報告
一 實驗目的 1.學習並掌握用鹼裂解法提取質粒dna的方法 2.學習並掌握了解質粒酶切鑑定的方法 3.學習並掌握紫外吸收檢測dna濃度和純度的原理和方法 4.學習並掌握pcr基因擴增的實驗原理和操作方法 5.學習並掌握水平式瓊脂糖凝膠電泳的原理和使用方法。二 實驗原理 1.pcr 多聚酶鏈式反應 在...