分子生物學複習知識總結

2021-10-24 14:27:59 字數 4425 閱讀 6364

一、名詞解釋

1.gene and genome 基因和基因組

基因:是遺傳的物質基礎,是dna(脫氧核糖核酸)分子上具有遺傳資訊的特定核苷酸序列的總稱,是具有遺傳效應的dna分子片段。能夠表達和產生蛋白質和rna的dna序列,是決定遺傳性狀的功能單位。

基因組:細胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質的總和。一般的定義是單倍體細胞中的全套染色體為乙個基因組,或是單倍體細胞中的全部基因為乙個基因組

2. signal peptide 訊號肽

分泌蛋白新生肽鏈n端的一段20~30氨基酸殘基組成的肽段。將分泌蛋白引導進入內質網,同時這個肽段被切除。現這一概念已擴大到決定新生肽鏈在細胞中的定位或決定某些氨基酸殘基修飾的一些肽段。

3. opening reading frame 開放式閱讀框

開放閱讀框是dna上的一段鹼基序列,由於擁有特殊的起始密碼子和直到可以從該段鹼基序列產生合適大小蛋白才出現的終止密碼子,該段鹼基序列編碼乙個蛋白。

4. sense strain 有意鏈:dna雙鏈中序列和方向與mrna的序列完全相同的那條dna鏈,又稱編碼鏈。

5. expressed sequence tag(est) 表達序列標準

從互補dna(cdna)分子所測得部分序列的短段dna(通常300~500bp)。從cdna文庫所得到的許多表達序列標籤集合組成表達序列標籤資料庫,代表在一定的發育時期或特定的環境條件下,特定的組織細胞基因表達的序列。可用於驗證基因在特定組織中的表達,推導全長cdna序列,或作為標籤標誌基因組中的特殊位點以確定基因的位置等。

6. microarray 基因晶元

,然後與標記的樣品雜交,通過對雜交訊號的檢測分析,即可獲得樣品的遺傳資訊。由於常用計算機矽晶元作為固相支援物,所以稱為dna晶元。

7. genomics and rnomics

rnomics:rna組學,既是核糖核酸組學,研究所有rna的不同時空表達譜及其生物學意義。

研究rna組的學科,主要是直接鑑定生物體中非信使小rna(snmrna)在特定條件和不同狀態下的種類、功能、差異及其與蛋白質的相互作用,是基因組學和蛋白質組學研究的擴充、發展和延伸。

genomics:基因組學,研究基因組的結構與功能的學科,主要包括dna的核苷酸序列、遺傳資訊含量、基因組織和基因數目等,基因組的產物不僅是蛋白質,還有許多複雜功能的rna。包括三個不同的亞領域,即結構基因組學、功能基因組學和比較基因組學。

8. rnai rna干擾

rna干擾,利用雙鏈小rna分子高效、特異的降解細胞內同源rna,從而阻斷體內靶基因的表達,使細胞出現靶基因缺失的表型。

9. microrna 微小分子rna

是一種大小約21—23個鹼基的單鏈小分子rna,是由具有髮夾結構的約70-90個鹼基大小的單鏈rna前體經過dicer酶加工後生成,不同於sirna(雙鏈)但是和sirna密切相關。據推測,這些非編碼小分子rna(mirnas)參與調控基因表達,

10. intron and exon 內含子和外顯子

內含子,在不連續基因中無編碼功能的區段(在初始轉錄產物hnrna加工產生成熟的mrna時,被切除的非編碼序列是內含子)

真核生物細胞dna中的間插序列。這些序列被轉錄在前體rna中,經過剪接被去除,最終不存在於成熟rna分子中。內含子和外顯子的交替排列構成了割裂基因。

在前體rna中的內含子常被稱作「間插序列」。

外顯子,在不連續基因中有編碼功能的區段(在初始轉錄產物hnrna加工產生成熟的mrna時,留下的編碼序列是外顯子)

真核生物基因的一部分,它在剪接(splicing)後仍會被儲存下來,並可在蛋白質生物合成過程中被表達為蛋白質。外顯子是最後出現在成熟rna中的基因序列,又稱表達序列。既存在於最初的轉錄產物中,也存在於成熟的rna分子中的核苷酸序列。

術語外顯子也指編碼相應rna外顯子的dna中的區域。所有的外顯子一同組成了遺傳資訊,該資訊會體現在蛋白質上。

二、簡答題

1病毒、原核生物基因組與真核生物基因組結構特點是什麼?

① 種類單一;②單倍體基因組:每個基因組在病毒中只出現一次;③形式多樣;④大小不一;⑤基因重疊;⑥動物/細菌病毒與真核/原核基因相似:內含子;⑦具有不規則的結構基因;⑧基因編碼區無間隔:

通過宿主及病毒本身酶切;⑨無帽狀結構;⑩結構基因沒有翻譯起始序列。

2、原核基因組的特點:

①為一條環狀雙鏈dna;②只有乙個複製起點;③具有操縱子結構;④絕大部分為單拷貝;⑤可表達基因約50%,大於真核生物小於病毒;⑥基因一般是連續的,無內含子;⑦重複序列很少。

3、真核基因組的特點:

①真核生物基因組遠大於原核生物基因組,結構複雜,基因數龐大,具有多個複製起點;②基因組dna與蛋白質結合成染色體,儲存於細胞核內;③真核基因為單順反子,而細菌和病毒的結構基因多為多順反子;④基因組中非編碼區多於編碼區;⑤真核基因多為不連續的斷裂基因,由外顯子和內含子鑲嵌而成;⑥存在大量的重複序列;⑦功能相關的基因構成各種基因家族;⑧存在可移動的遺傳因素;⑨體細胞為雙倍體,而精子和卵子為單倍體。

2舉例說明差示篩選組織特異cdna的方法

製備兩種細胞群體,目的基因在其中一種細胞中表達或高表達,在另一種細胞中不表達或低表達,然後通過雜交對比找到目的基因。

例如:在腫瘤發生和發展過程中,腫瘤細胞會呈現於正常細胞表達水平不同的mrna,因此,可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關的基因。也可利用誘導的方法,篩選出誘導表達的基因。

3分別寫出6種以上rna的功能

m rna

t rna

r rna

silencing rnasirna主要參與rna干擾(rnai)現象,以帶有專一性的方式調節基因的表達

mirnamicrornas(mirnas)是一種小的,類似於sirna的分子,由高等真核生物基因組編碼,mirna通過和靶基因mrna鹼基配對引導沉默複合體(risc)降解mrna或阻礙其翻譯。mirnas在物種進化中相當保守,在植物、動物和真菌中發現的mirnas只在特定的組織和發育階段表達,mirna組織特異性和時序性,決定組織和細胞的功能特異性,表明mirna在細胞生長和發育過程的調節過程中起多種作用。

hnrna:核內不均一rna胞核中的一大類分子質量不一致的rna分子。被視為信使核糖核酸(mrna)的初級轉錄產物,經過一系列加工步驟才能產生成熟的、有功能的mrna

snrna;核內小rna參與hnrna的剪下和轉運

snorna:核仁小rna: rrna的加工與修飾

:4以你將要開展的分子生物學研究為例,如何撰寫開題報告?

開題報告包括綜述、關鍵技術、可行性分析和時間安排等四個方面 。由於開題報告是用文字型現的**總構想,因而篇幅不必過大,但要把計畫研究的課題、如何研究、理論適用等主要問題寫清楚。開題報告的總述部分應首先提出選題,並簡明扼要地說明該選題的目的、目前相關課題研究情況、理論適用、研究方法。

開題報告的內容大致如下:課題名稱、承擔單位、課題負責人、起止年限、報名提綱。開題報告以及怎麼寫

1、課題**及研究的目的和意義;

2、國內外在該方向的研究現狀及分析;

3、主要研究內容及創新點;

4、研究方案及進度安排,預期達到的目標;

5、為完成課題已具備和所需的條件和經費;

6、預計研究過程中可能遇到的困難和問題及解決的措施;

7、主要參考文獻;

5舉出分子生物學研究中常用的工具酶及良好載體的條件

工具酶連線酶:①dna連線酶:t4dna連線酶、大腸桿菌dna連線酶②rna連線酶

聚合酶:①dna聚合酶:

1、 依賴於dna的dna聚合酶:大腸桿菌dna聚合酶 ⅰ、klenovo酶、t4 dna聚合酶、天然的t7 dna聚合酶、經修飾的t7 dna聚合酶、taq dna聚合酶

2、 不依賴於dna的dna聚合酶(末端轉移酶)

3、 依賴於rna的dna聚合酶(反轉錄酶)

②rna聚合酶:依賴於dna的rna聚合酶、不依賴於dna的rna聚合酶(poly(a)聚合酶)

激酶、磷酸酶:鹼性磷酸酶、t4多核苷酸激酶

核酸酶:①核酸外切酶:

1、 單鏈5ˊ→3ˊ和3ˊ→5ˊ核酸外切酶(exoⅶ)

2、 雙鏈5ˊ→3ˊ末端外切酶:λ噬菌體核酸外切酶、t7基因6核酸外切酶

3、 雙鏈3ˊ→5ˊ核酸外切酶(exoⅲ)

②核酸內切酶:bal 31核酸酶、核酸酶s1、綠豆核酸酶、微球菌核酸酶

③脫氧核糖核酸酶(dnase i)

④核糖核酸酶(rnase):核糖核酸酶a(rnasea)、核糖核酸酶h(rnaseh)、核糖核酸t1(rnaset1)

其他常用酶:①dna甲基化酶②dna結合蛋白:單鏈dna結合蛋白(ssb)、reca蛋白③拓撲異構酶i

良好載體的條件:

1能在宿主細胞中大量複製,得到大量的重組dna分子

2載體上的內切酶微點對於一種酶來說只能有乙個(置換型載體上被置換片段的兩側各有乙個內切酶位點

3轉殖載體要有複製起點,表達載體要有啟動子

4載體上有報告基因或選擇標記基因

5在不影響載體複製和表達的dna序列上有內切酶酶切位點

6具有較高的外源dna裝載能力

分子生物學

清道夫細胞 處理氧化修飾了的膽固醇,不具備膽固醇轉化作用,最終導致膽固醇細胞破裂。2 逆轉錄 以病毒rna為模板,指導含有全部病毒資訊的dna合成過程。3 細胞凋亡 在基因程式性控制下有別於細胞壞死的一種,有規律的自我消亡。4 dna的c值 同種生物基因組dna含量是恆定的,乙個單倍體基因組中的dn...

分子生物學

第一章緒論 一 dna的發現 1928年英國科學家griffith等人發現肺炎鏈球菌使小鼠死亡的原因是引起肺炎。首先用實驗證明基因就是dna分子的是美國著名的微生物學家 ery。1952年,美國冷泉港卡耐基遺傳學實驗室科學家hershey和他的學生chase從事噬菌體侵染細菌的實驗。二 分子生物學簡...

分子生物學

一 名詞解釋 1 基因 能夠表達和產生蛋白質和rna的dna序列,是決定遺傳性狀的功能單位。2 基因組 細胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質的總和。3 端粒 以線性染色體形式存在的真核基因組dna末端都有一種特殊的結構叫端粒。該結構是一段dna序列和蛋白質形成的一種複合體,僅在真核細胞染色體末端存...