一、考試專案
細菌革蘭氏染色及鏡檢
二、儀器裝置與材料
1．操作台、計時錶、電光源顯微鏡、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、酒精燈、火柴、細菌固體純培養物、接種環、載玻片、生理鹽水、草酸銨結晶紫染色液、革蘭氏碘液、95%酒精、稀釋的石炭酸複紅染色液、染色缸、染色架、洗瓶、鑷子、吸水紙、搪瓷托盤、試管架、汙物桶等。
2．工作服、一次性口罩、酒精消毒棉球、肥皂、毛巾等。
三、操作規範與要求
1．準備工作穿著工作服，配戴口罩，清點物品。
2．細菌塗片接種環火焰滅菌，蘸取適量生理鹽水置於載玻片**，再取少量細菌培養物與載玻片上的生理鹽水混勻，做成塗面。
3．乾燥自然乾燥或火焰加熱乾燥。4．固定火焰固定。5．革蘭氏染色
（1）將塗片置於染色架上。
（2）初染滴加草酸銨結晶紫染色液，染色1～3min，水洗、甩乾。（3）媒染滴加革蘭氏碘液，染色1～2min，水洗、甩乾。（4）脫色滴加95%酒精，脫色30s，水洗、甩乾。
（5）復染滴加稀釋的石炭酸複紅染色液，染色0.5～1min，水洗、甩乾。（6）乾燥用吸水紙吸乾或自然乾燥。
6．顯微鏡準備取下防塵罩，接通電源，開啟電源開關。
7．調節視野亮度選擇油鏡，調節光圈、聚光器和燈泡亮度，使視野均勻、明亮。
8．油鏡鏡檢在塗片待檢部位滴加一滴香柏油，將塗片固定於載物台上，正確使用粗調節旋鈕和細調節旋鈕，直至出現清晰的細菌影象。
9．結果判定判定並報告鏡檢結果：革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌。
10．顯微鏡保養與維護顯微鏡使用完畢，關閉開關，切斷電源，下降載物台和聚光器，取下塗片，將油鏡頭擦拭乾淨。套上防塵罩。
11．安全操作遵循安全技術規範，注意操作安全，防止裝置損壞，避免發生安全事故。12．考場紀律遵守考場紀律，服從監考人員安排。考試結束，整理所用物品。
四、考試時間及考試組織
1．考試時間：60分鐘。
2．考試組織：採用現場實際操作形式，每位考生乙個工位。
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