3用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體

2022-12-27 04:48:03 字數 3133 閱讀 7875

一、 葉綠體的觀察

(一)目的

使用高倍顯微鏡觀察葉綠體的形態與分布

(二)實驗前的思考

葉肉細胞中的葉綠體,呈綠色,扁平的橢圓形或球形。葉綠體高等植物(如葫蘆蘚)的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至於被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源,在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。

因此,在不同光照條件下採集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣

(三)實驗材料與試劑

1、材料:水王蓀(黑藻),(葫蘆蘚或牆蘚或菠菜葉)

2、器材:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子,滴管

(四)實驗步驟

製作臨時裝片: 潔淨玻片滴清水鑷取一片黑藻葉加蓋玻片

觀察葉綠體先低倍鏡後高倍鏡觀察葉綠體的形態與分布

觀察細胞質的流動

(五)參考資料:

1、加速細胞質的流動方法

①進行光照,即在陽光或燈光下放置15~20 min;

②提高盛放黑藻的水溫,可加入熱水將水溫調至25 ℃左右;

③切傷一小部分葉片。

2、觀察細胞質流動的代替實驗材料觀察細胞質流動的材料,如果找不到黑藻,可用以下材料代替:

①紫鴨蹠草雄蕊的花絲表皮毛;

②鴨蹠草的藍色花瓣,觀察韌皮部篩管細胞中的細胞質流動;

③向日葵舌狀花花冠的表皮;

④萬壽菊管狀花的花瓣表皮;

⑤新鮮大白菜內層葉片寬大中脈處的表皮;

⑥黃瓜嫩莖的表皮毛;

⑦小麥的根毛。

二、 線粒體的觀察

(一)目的

認識最重要的細胞器之一線粒體的基本形態和分布,學會在光學顯微鏡下觀察線粒體的技能。

(二)實驗前的思考

線粒體是廣泛存在於動、植物細胞中的重要細胞器。它呈短棒形,長0.4~3微公尺,寬0.

3~0.8微公尺,光學顯微鏡剛好能看清它的輪廓(光學顯微鏡解析度在0.2微公尺)。

線粒體是細胞內糖、氨基酸、脂肪酸最終氧化的場所,所以有「動力工廠」之稱。利用這個性質,線粒體可使特異性染料詹姆斯綠(janus green b)保持氧化狀態,呈藍綠色,線粒體周圍的細胞質中的詹姆斯綠被還原成無色狀態,從而顯示線粒體。

(三)實驗材料與試劑

1、材料:人的口腔上皮細胞、洋蔥內表皮、幼苗或幼根

2、器具:顯微鏡,載玻片,蓋玻片,消毒牙籤,吸水紙,鑷子;

3、試劑的配製

(1) 0.5g詹姆斯綠溶解於50ml生理鹽水中——1%詹姆斯綠染液

(2) 配製0.9%的生理鹽水200ml。稱取1g詹姆斯綠,溶於50ml生理鹽水中,再用生理鹽水稀釋100倍,得0.02%詹姆斯綠染液裝入棕色瓶備用。

(3)0.05g 詹姆斯綠溶解於5ml ringer液。

ringer液(復合生理鹽水):0.25g kcl+0.85gnacl+0.03gcacl 加入100ml水)(四)步驟

1.觀察人口腔上皮細胞線粒體

(1)把清潔的載玻片平放在桌上,滴上數滴詹姆斯綠染液於載玻片**。

(2)用消毒牙籤的鈍端在自己口腔頰粘膜處稍用力刮取口腔上皮細胞,均勻地塗到載玻片的染液中。蓋上蓋玻片,四周溢位的染液用吸水紙吸乾。

(3)5分鐘後用高倍鏡或油鏡觀察,可以看到在接近無色的口腔上皮細胞的細胞質中,特別是在細胞核周圍,散布著許多被染成藍綠色的短棒狀或顆粒狀結構,即為線粒體。

2.觀察洋蔥鱗莖表皮細胞線粒體

(1)撕取5×5公釐一塊新鮮洋蔥鱗莖內表皮,展平在潔淨載玻片**。

(2)滴上數滴詹姆斯綠染液染色10分鐘,蓋上蓋玻片,用吸水紙吸去周圍溢位的染液。

(3)在高倍鏡或油鏡下可以觀察到細胞質中的線粒體被染成藍綠色,呈條狀或顆粒狀。

(五)注意事項

詹姆斯綠染液濃度不宜過高,染色時間不宜太長,否則細胞質會重新氧化成有色狀態而不能充分還原染料成無色狀態。

配製時間:詹姆斯綠染液宜在使用時配製新鮮液,不可久存。

(六)分析和討論

真核細胞內一般都存**粒體,但存在的數量相差較大。動物細胞中的心肌細胞和肝臟細胞中線粒體數量最多;植物細胞中幼苗和貯藏組織的細胞中線粒體較多。選取植物細胞的材料應該避免組織堅硬、細胞壁厚老及富含葉綠體的材料,宜選黃化幼苗或新鮮、生長勢旺的組織。

(七)參與資料

線粒體是一種動態的易變結構。經過處理在光學顯微鏡下呈現為顆粒狀、棒狀或彎曲細線。線粒體的形態和數量隨不同生物、不同組織及不同生理狀態而發生變化,例如肝細胞、胰細胞的線粒體通常呈線狀,成熟的卵細胞內線粒體呈顆粒狀,腎細胞內的線粒體呈棒狀。

顯示線粒體的方法可以概括為以下幾種:

1、 生活細胞的觀察。

如將組織培養細胞或其他生活細胞,放在相差顯微鏡下,就可以看到細胞質內有線狀小體活動,這就是線粒體。

2、 活細胞染色法。

就是利用某些無毒或毒性較小的染料,顯示出細胞內某些特殊結構存在的真實性,而並不對細胞的活動有影響,如janus green b(詹納斯綠b),就是一種毒性較小的鹼性染料。將其配製成一定濃度,對活細胞進行染色,在細胞質內可以看到被染成藍綠色的線狀或顆粒小體,這就是線粒體。還可看到其在細胞質內的活動狀況。

線粒體所以能顯示出藍綠色,是由於線粒體中具有細胞色素氧化酶系統,它是染料始終處於氧化狀態呈藍綠色,而在周圍的細胞質中的染料被還原呈無色。

3、固定染色法(即永久製片法)。

用特殊的固定液染色處理動物的組織或細胞後,可顯示出線粒體的形態。但所用材料必須新鮮,否則線粒體常因已經破壞而顯示不出,線粒體的組成成分主要是脂蛋白,脂類又以磷脂為主,用於線粒體的固定液含有餓酸,重鉻酸鉀等。因為兩者均能使脂類物質儲存下來,故可顯示出線粒體的形態。

用於顯示線粒體形態的固定、染色方法較多,常用的有altmann染色法、regand染色法及chmpy-kull染色法等,但欲顯示線粒體的細微結構,則要用電鏡技術。

線粒體的觀察

1、取玉公尺的幼根作徒手切片。

2、切片於固定液(3%重鉻酸鉀水溶液:4%****=8:2)固定1小時。

3、3%重鉻酸鉀浸洗0.5小時。

4、蒸餾水浸洗20分鐘,多次換水。

5、4%硫酸鐵銨5分鐘。

6、0.5%蘇木精5分鐘。

7、蒸餾水浸洗3分鐘

8、2%硫酸鐵銨分色至細胞核褪至棕黃色。

9、0.5%氨水浸係至細胞核及線粒體成藍黑色或灰黑色。

4、分離提取方法。

在一定的低溫條件下,將組織細胞破碎製備成勻漿,用於線粒體組分及其在不同生理狀態的分離分析研究。

用高倍顯微鏡觀察葉綠體實驗步驟

活動目標 1 使用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體的形態和分布。2 識別光學顯微鏡下的葉綠體和線粒體。背景資料 1 相關知識 地球上絕大多數生命活動所需能量的最終源頭是太陽能。綠色植物是主要的能量轉換者,完成這一能量轉換的細胞器是葉綠體。葉綠體利用光能將二氧化碳和水合成醣類等有機物,同時產生氧。在高等植...

顯微鏡和望遠鏡學案

課型新授課題 5.5顯微鏡和望遠鏡年級八年級學科物理設計人宗 核人授課人 編號 5.5 日期2012.8 基本思路 學習目標 1 知識與技能 了解顯微鏡和望遠鏡的結構和原理。2 過程和方法 通過自製望遠鏡培養學生動手動腦的習慣。3 情感 態度 價值觀 樂於參與觀察 實驗 製作等科學實踐。重點 知道顯...

顯微鏡的構造和使用

實驗名稱 金相顯微鏡的構造 使用 所屬課程 工程材料及其成型基礎 一 實驗目的 了解普通金相顯微鏡的構造和使用方法 二 實驗概述 研究金相顯微組織的光學顯微鏡稱為金相顯微鏡。金相顯微鏡可分為台式 立式和臥式三大類,構造由光學系統 照明系統和機械系統三大部分組成。有的顯微鏡還附有攝影裝置。三 實驗裝置...