現代分子生物學樣卷部分答案

2022-12-21 02:03:04 字數 2715 閱讀 4271

一、是非題

1.**大公尺是通過轉基因技術將蘇雲金芽胞桿菌bt基因轉入到大公尺胚乳中形成的轉基因作物n)不僅決定遺傳性狀,而且還直接表現遺傳性狀n)的生物合成不需要引物y)4.人類基因組的物理圖與遺傳圖必然大不相同y) quantitative pcr既可以用於對pcr擴增產物進行絕對定量分析,也可以用於對pcr擴增產物進行相對定量分析y)

二、選擇題

1.下列哪種試劑不能抑制轉錄a)

a.阿奇黴素

b.利福黴素

c.α-鵝膏蕈鹼

d.放線菌素d

2.真核生物蛋白質生物合成的終止訊號是由d)

a. trna識別

b. if識別

c. ef識別

d. rf識別

3.下列有關c值的敘述正確的是b)

a.生物的進化程度越高,其c值越大c.其與有機體的形態學複雜性成正比

b.每乙個生物門中的c值與有機體的形態學複雜性大致成比例d.其與有機體的形態學複雜性成反比

4.下列有關tata盒(hogness box)的敘述,哪個是正確的c)

a.它位於第乙個結構基因處c.它和rna聚合酶結合

b.它編碼阻遏蛋白d.它和反密碼子結合

5.酵母雙雜交系統被用來研究d)

a.哺乳動物功能基因的表型分析c.基因的時空表達資訊

b.酵母細胞的功能基因d.蛋白質的相互作用

三、填空題

1.在細菌中常見兩種啟動子突變,一種叫_ ____下降突變_,如果把pribnow區從tataat變成aataat就會大大降低其結構基因的轉錄水平;另一

類突變叫_____上公升突變___,即增加pribnow區共同序列的同一性。2.____ dna聚合polⅲ___是大腸桿菌dna複製中鏈延長反應的主導聚合酶。

3.最簡單的轉座元件是is元件。is元件由兩段短的反向(填「同向」或「反向」)重複序列和一段夾在重複序列之間的負責轉座的轉座酶基因組成。

當整合到新位點後,轉座元件總是在靶位點產生一段同向(填「同向」或「反向」)重複序列。的二級結構主要有三種螺旋形式,包括左手螺旋形式的z-dna以及右手螺旋形式的b-dna和a-dna。

四、簡答題

1.請設計乙個實驗證明某基因存在乙個內含子?

答:內含子的鑑定是通過所謂的「berk-sharp「製圖法又稱s1核酸製圖法來實現的,其原理是:利用s1核酸酶的單鏈特異性,核酸酶ⅶ的單鏈外切特異性,以及稀鹼溶液能分解rna的特性,來對雜交分子做不同的處理以得到外顯子的長度。

內含子的長度以及基因的總長度。

具體操作:首先將dna進行轉錄,製備mrna,然後將dan與mrna分子進行雜交,對雜交分子做不同的處理。乙份雜交分子用s1酶處理,核酶能降解所有的單鏈區,留下乙個有缺口的dna與mrna雜交雙鏈分子,如果直接走電泳,可以得到乙個帶,相當於外顯子連線起來的長度;如果經鹼溶液處理在走電泳,則得到多條帶,為外顯子帶。

另外乙份雜交分子用外切核酸酶ⅶ處理,去除兩端沒雜交的dna,在用鹼溶液處理,去除rna,走電泳得到一條帶為外顯子及其之間的內含子的總長度。從而鑑定內含子。

2.請寫出下列英文縮寫的英文全稱和中文名稱:

race、est、2-de、snp

答:rapid amplification of cdna ends,cdna末端快速擴增expressed sequence tag,表達序列標籤

two - dimensional gel electrophoresis,雙向凝膠電泳

single-nucleotide polymorphism,單核苷酸多型性

3.移液器使用前要檢查是否有漏液現象,方法是吸取液體後懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致可能有哪些方面?

4.請簡述原核生物dna的主要特徵。

五、問答題(共14分)

樣卷第1頁共3頁

引物設計應主要遵循哪些主要原則?1.一般性原則

(1)長度:15—30bp,其有效長度[ln=2(g十c)十(a十t)]一般不大於38,否則pcr的最適延伸溫度會超過taq酶的最佳作用溫度(74度),從而降低產物的特異性。(2)g十c含量:

應在45%一55%之間,pcr擴增中的復性溫度一般是較低tm值引物的tm值減去5—10度。引物長度小於20時,其tm恆等於4×(g十c)十2×(a十t)。

(3)鹼基分布的隨機性:應避免連續出現4個以上的單一鹼基。尤其是不應在其3』端出現超過3個的連續g或c,否則會使引物在g十c富集序列區錯誤引發。

(4)引物自身:不能含有自身互補序列,否則會形成髮夾樣二級結構。

(5)引物之間:兩個引物之間不應有多於4個的互補或同源鹼基,不然會形成引物二聚體,尤應避免3』端的互補重疊。(6)特異性:

與非特異擴增序列的同源性應小於70%,或少於連續8個的互補鹼基。

2.引物的3』端:引物的3』端很人程度上影響taq酶的延伸效應,除特殊情況(as-pcr)外,3』端不應發生錯配。等發現,引物的3』端發生錯配時,a:

a使產量下降至l/20,a:g或c:c下降至1/100。

當末位鹼基是t時,即使錯配也能引發鏈的合成,而為a時錯配的引發效率最低,g、c居間。因此,引物的3』端鹼基最好選用a、g、c,而盡可能地避免選用t,尤應避免連續出現2個以上的t。此外,如果擴增編碼區域,引物的3』端不要終止於密碼了的第3位,因此處易發牛簡併,從而影響擴增持異性。

3.避開引物的二級結構區:某些引物無效的原因是引物重複區二級結構的影響,因此選擇擴增片段時應注意避開二級結構區,有些計算機軟體可幫助確定該區域,如不能避開,則可用7-deaza-2』-脫氧gtp取代『dgtp,有助幹pcr成功。

樣卷第2頁共3頁

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