東莞常平醫院
檔案編號：
dgcph-bk-sop-08
血庫版序：2005-1
頁碼：第1頁，共3頁
抗體分類鑑定試驗（凝聚胺法）
[原理]
凝聚胺試驗是利用低離子溶液促進紅細胞抗原與血清（漿）中的抗體反應，再利用凝聚胺引起紅細胞間非免疫性的凝集，讓已有抗體（igg）反應的紅細胞間的距離縮短。距離縮短後更能引起已反應的抗體和別的紅細胞產生反應形成免疫性的凝集。而由凝聚胺所引起的非免疫性紅細胞凝集反應可被後來加入的復懸液所中和而散開，如有免疫反應，凝集就不會散開，為陽性反應。
如沒有免疫反應，凝集就會散開，為陰性反應。抗體分類鑑定是用於鑑定患者血清（漿）中存在的具有臨床意義的紅細胞異體抗體種類。
[試劑組成]
1．抗體分類鑑定紅細胞2．凝聚胺試劑：
*1低離子介質溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2鈉及穩定劑。
*2凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化鈉及穩定劑。*3復懸液：含檸檬酸鈉，葡萄糖及穩定劑。
*4陽性對照血清：含抗d血清，氯化鈉及穩定劑。
[試劑儲存和穩定性]
1．篩檢紅細胞，凝聚胺試劑須儲存在2-8℃。2．有效期內可使用。
[標本收集和準備]
抽取受血者靜脈血3-4ml（操作中小心防止紅細胞破損），放入一已貼標
籤乾燥潔淨的試管中為血清管。待標本凝固後離心分離血清使用。
以上標本有效期為三天；若受血者抽取標本後，輸用過血液或血液製品，且輸用時間超過12小時的，必須重新採集標本。
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dgcph-bk-sop-08
血庫版序：2005-1
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抗體分類鑑定試驗（凝聚胺法）
[操作步驟]
1．取出10支乾燥潔淨小試管分別標記測試（1）、（2）…（10）：
測試（1）：加入被檢血清2滴，再加入3-5%鑑定紅細胞（1）1滴。
測試（2）：加入被檢血清2滴，再加入3-5%鑑定紅細胞（2）1滴。……
測試（10）：加入被檢血清2滴，再加入3-5%鑑定紅細胞（10）1滴。2．各加入*1低離子介質溶液0.
6ml，輕輕混勻，於室溫下靜置1分鐘。3．再滴入2滴*2凝聚胺溶液，輕輕混勻，於室溫下靜置15秒。
4．3400rpm離心1分鐘，然後把上清液倒掉，管底保留大約0.1ml的液體。5．目測紅細胞有無變成凝塊，如果沒有凝塊，則必須重做，（請看注意事項6）。
重做後仍然沒有凝集現象出現，可能試劑失效。
6．各滴入2滴*3復懸液，並輕輕混勻，觀察結果。若為凝聚胺引起的非免疫
性凝集，應該在1分鐘內散開抗體鑑定結果為陰性；若是異體抗體所引起
的免疫性凝集，則不會散開，抗體鑑定結果為陽性。
[結果判斷]
若抗體鑑定結果為陰性，即對應於該鑑定紅細胞抗原的抗體為陰性。若抗體鑑定結果為陽性，即對應於該鑑定紅細胞抗原的抗體為陽性。可再進一步對該抗體進行鑑定。
[質量控制和附註]
1．試劑超過有效期或有汙染現象出現，必須更換。
2．檢驗人員必須熟悉操作步驟，尤其是凝聚胺所引起的凝集反應，更要特別
注意。3．在冬天氣溫極低的情況下，操作交叉配血試驗，某些病人血清（漿）中可
能含有寒冷凝集素等因子而導致假陽性的結果出現。若有此懷疑，請再滴入2滴*3復懸液，將試管立即置入37 c水浴中輕輕混勻，並在一分鐘內觀察結果。
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抗體分類鑑定試驗（凝聚胺法）
4．如果不凝集，可能是標本中含有肝素。如洗腎病人的標本或其他干擾存在，
此時需多加2-4滴*2凝聚胺溶液以中和肝素或干擾因子。5．注意離心速度必須達到要求。
6．抗體篩檢應嚴格控制溫度與時間，因部分抗原、抗體集反應凝塊比較脆弱，
觀察反應結果時，應輕輕側動試管，不可用力振搖。
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