三、立論依據(包括科學意義和應用前景，國內外研究概況，主要參考文獻目錄。純基礎研究，著重結合國際科學發展趨勢，論述專案的科學意義；應用基礎研究著重結合學科前沿，圍繞國民經濟和社會發展中的科技問題，論述其研究特色及應用前景)
蜱類隸屬節肢動物門、蛛形綱、蜱蟎亞綱、寄蟎目，分為三個科：硬蜱科 (ixodidae)、軟蜱科 (argasidae) 和納蜱科 (nuttallielliae)。全世界約有850種[1],中國已描述定名110種[2]。
這個類群是專性吸血的外寄生動物, 傳播病毒(如森林腦炎、出血熱)、立克次體(如q熱、 蜱媒斑疹熱)、細菌(如土拉菌、布氏菌)、螺旋體(如萊姆病)、原蟲(如巴貝蟲、泰勒蟲)以及毒素(如蜱傳麻痺症)等多種病原體而導致疾病，給人類健康和畜牧業發展帶來極大危害 [3]。 據世界糧農組織（fao）報道，全世界每年由蜱類造成的經濟損失達70億美元[4],對人類健康的危害僅次於蚊類[5] 。因此,對其研究具有重要的意義。
長角血蜱（haemaphysalis longicornis neumann）廣泛分布於河北省太行山區、燕山山區、邯鄲、滿城、淶水和玉田等地，嚴重危害我省畜牧業的發展[6]。申請者在主持國家自然科學**和河北省自然科學**期間，發現該種蜱在邢台、衡水、滄州、張家口、承德等地也廣泛分布，且種群數量極大（如在河北小五台山國家自然保護區每只羊體上寄生5000頭若蟲，每頭牛體上寄生數量高達9600頭若蟲），構成河北省優勢種類。由於長角血蜱是瑟氏泰勒蟲 （theileria sergenti）的主要傳播媒介，引起寄主高熱、出血、消瘦和體表淋巴結腫脹等症狀及繼發**染而導致疾病，且種群數量大、繁殖率高（每頭雌蜱可產卵3017粒）[7]，因此造成巨大危害。
目前對蜱類的防治尚無有效的手段，主要是使用化學殺蟲劑和人工去除法，殺蟲劑的使用不僅使蜱產生抗性，而且對人、畜產生毒性並造成嚴重環境汙染。因此，探索防治蜱類的有效對策，是亟待解決的問題。
蜱類的危害程度與其種群數量密切相關，而種群數量主要取決於繁殖的成功率，特別是性資訊素在雌雄識別和繁殖中起關鍵作用。由於該類群身體結構與生理的特殊性，有關蜱類性資訊素的研究遠遠落後於昆蟲，到目前為止，僅在少數種類中確定2，6-二氯酚（2,6-dichlorophenol, 2，6-dcp）作為早期雌雄識別的資訊素成分[8,9,10]，其他性資訊素成分尚不明確。劉敬澤等[7]對長角血蜱的生殖行為進行了較詳細的研究，提出其生殖行為的完成可分為三個主要階段，即雄蜱離開吸血附著點靠近雌蜱、雄蜱在雌蜱體上刺探和攀緣、雄蜱對雌蜱生殖孔的定位和精莢的輸送，確定了第一階段的完成是由雌蜱分泌的2，6-dcp引導[11]，並對2，6-dcp的合成分泌位點、分泌動態和內分泌調控機制進行了系統研究[12，13，14，15]，提出了2，6-dcp作用的模型，但雌雄識別過程中後兩個階段的性資訊素成分、結構、生物學功能等尚不明確，其他蜱種也未有發現。
本專案以河北省優勢蜱種——長角血蜱為研究物件，在申請者前期工作積累的基礎上，運用生物化學、層析色譜（tlc）、氣相色譜（gc）、氣相色譜/質譜（gc/ms）和生物測定等多學科交叉的研究技術，對其性資訊素進行深入而系統的研究，揭示長角血蜱生殖行為過程中性資訊素的成分、化學結構和生物學功能。並以長角血蜱為模式動物，綜合分析蜱類生殖行為過程中的性資訊素調節機制，為開展更為深入的研究以及制定蜱類的有效防治對策建立基礎，具有重要的理論意義和實際應用潛能。
主要參考文獻
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[2] 鄧國藩. 中國蜱蟎概要. 北京：科學出版社. 1989.
[3] 鄧國藩，姜在階. 中國經濟昆蟲志第三十九冊蜱蟎亞綱硬蜱科. 北京：科學出版社. 1991.
[4] report. a practical field manual. vol. 1, tick control. ( rome, 1984).
[5] chinzei,y. and d. taylor.
hormonal regulation of vitellogenin biosynthesis in ticks. in advances in disease vector research, vol.10.
new york：springer-verlag, 1994，pp: 1-22.
[6] 李存栓等. 河北省長角血蜱的生物學特性及藥敏試驗研究. 中國動物科學研究，1999，pp: 373-378.
[7] 劉敬澤（1）. 實驗室條件下長角血蜱的生物學特性研究. 昆蟲學報，1998 ，43 (4): 280-283.
[8] sonenshine, d. e. biology of ticks.
volume 1, oxford university press, new york, 1991，pp:349-356.
[9] hanson, et al. biological activity of chlorinated phenols in the american dog tick, dermacentor variabilis (acari: ixodidae).
international journal of acarology, 2002; 28 (1): 55-60.
[10] yoder, et al. on the role of 2,6-dichlorophenol as a tick *** pheromone (acari: ixodidae).
international journal of acarology, 2002; 28 (1): 49-54.
[11]劉敬澤（1）. 性資訊素2,6-二氯酚在長角血蜱交配行為中的作用. 昆蟲學報，1999，42 (1): 31-36.
[12]劉敬澤（1）. 長角血蜱性資訊素2,6-二氯酚含量變化及其生物學作用. 寄生蟲與醫學昆蟲學報，1998，5（4）：253-257.
[13] 劉敬澤（1）.長角血蜱性資訊素生物合成的激素調控. 北京師範大學學報(自然科學版). 1997，33 (1): 130-134.
[14] liu，j. z. et al.
effects of juvenile hormone iii on haemaphysalis longicornis (acari: ixodidae). systematic and applied acarology, 1999，4:
3-7.
[15] liu，j. z. et al.
relationship between ecdysteroids and *** pheromone, 2,6-dcp, of female haemaphysalis longicornis (acari: ixodidae). korean journal of entomology, 1999，29 (1):
65-67.
四、研究內容和預期成果(說明專案的具體研究內容和重點解決的關鍵問題，預期成果和提供的形式。理論成果，應寫明在理論上解決哪些科學問題及其科學價值；應用性成果或基礎性資料，應寫明其應用的可能性及預期效益)
（一）主要研究內容
1. 確定雌蜱性資訊素的成分：選用不同極性的溶劑或溶劑配比，提取、分離、純化長角血蜱雌蜱分泌的性資訊素成分，結合生物測定方法，確定與雄蜱生殖行為有關的化學組分。
2. 性資訊素的結構鑑定：將分離純化出的有效成分（生物活性成分）濃集到一定量後，用氣相色譜 (gc)、氣相色譜/質譜 (gc/ms) 等方法對各組分進行結構鑑定，確定其化學結構。
3. 性資訊素的分泌動態：測定雌蜱不同發育階段性資訊素成分和含量的動態變化，並結合雌雄個體的生殖行為過程，進一步闡明性資訊素的生物學功能。
（二）重點解決的關鍵問題
有關蜱類性資訊素的研究遠遠落後於昆蟲，目前僅在某些蜱類中確定早期誘導的性資訊素成分2,6-dcp,但生殖行為後期的性資訊素成分尚不明確。本專案中的關鍵問題是揭示長角血蜱雌蜱性資訊素化學結構、組成成分及其在生殖行為中的作用。
（三）預期目標
本專案在申請者前期工作積累的基礎上，綜合運用生物化學、層析色譜（tlc）、氣相色譜（gc）、氣相色譜/質譜（gc/ms）和生物測定等多學科交叉的研究技術，對長角血蜱性資訊素進行深入而系統的研究，將闡明長角血蜱性資訊素的組分、化學結構、生物學功能和分泌活性動態。提出長角血蜱生殖行為過程中性資訊素功能組分、分泌和生物學功能的工作模型。
專案完成後提交驗收報告，組織專家對專案鑑定驗收，預期在國內外重要學術期刊發表研究**4-6篇。
五、擬採取的研究方法和技術路線(包括理論分析、計算、實驗方法和步驟及其可行性分析、創新處；研究工作的總體安排和年度進度)
（一）研究方法和技術路線
1. 確定性資訊素的成分：用不同極性的溶劑或溶劑配比提取長角血蜱雌蜱體表分泌物，通過生物測定確定哪一提取物中含有性資訊素活性成分。
然後用生物化學和tlc等方法對有效成分進行分離純化，再結合生物測定確定與生殖行為有關的化學成分。
2. 性資訊素的結構鑑定：將分離純化出的有效成分進行氣相色譜 (gc)分析。
然後將其濃集到一定量後，用氣相色譜/質譜 (gc/ms) 等方法對各組分進行結構鑑定，確定其化學結構。在色譜分析中，可根據該化合物的化學性質選擇合適的衍生試劑，以提高儀器對性資訊素的檢測率。
3. 性資訊素的分泌動態與功能：用氣相色譜法測定雌蜱不同發育階段性資訊素的含量變化，並結合生殖行為過程，進一步闡明性資訊素的功能和分泌動態。
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