試驗研究嘲北極保
２０１２年第５期
總第１３３期
芋疫病抗病性鑑定及藥劑篩選
周清平胡漢橋梁鉀賢李素賢吳仁鋒
（江漢油田農林處
湖北潛江
４３３１２４；２．廣東海洋大學農學院生物技術系湛江５２４０８８；
３．武漢蔬菜科學研究所
４３００６５）
中圖分類號：￥４３６．３２
文獻標識碼：ｂ
文章編號
摘要：芋頭疫病的抗病性鑑定及藥劑篩選對芋頭疫病的防治具有重要的意義。從芋頭疫病的標本中分離出病原菌，經形態學觀察和菌落ｐｃｒ鑑定為疫黴菌。
從我國南方４個芋頭產區收集４０多個芋頭品系，採用離體葉片抗病性鑑定方法，從中鑑定出８個抗病品系，１１個中抗品系。從６種藥劑中篩選出３種可用於芋頭疫病的防治的藥劑。
關鍵詞：芋；疫病；抗病性；鑑定；藥劑篩選
芋頭主要種植於熱帶地虹，２００１），至今還未見芋頭品種抗疫病的報道。區，在東南亞和太平洋地區是一種重要的經濟作本文收集從廣東、廣西、湖南和湖北等主要芋頭
物。芋頭的種植量在食根作物中位於馬鈴薯、木產區收集芋頭品種，並用離體葉片法進行了疫病薯、甘薯和山藥之後，位列第五。據國際糧農組的抗病性鑑定。
並選擇感病品種在大田進行了織２０１１年報告，２００９年世界芋頭產量１１００萬ｔ，防治芋頭疫病的藥劑篩選。這些研究對我國芋中國的產量位列第二。２００８年中國芋頭出口位頭的生產具有重要的意義。
列第一，每年４．９萬ｔ。依食用部位不同，分為葉
用變種及球莖變種。球莖變種主要分為２種類１材料與方法
型：魁芋類和多子芋類
１．１芋頭不同品種的收集
芋頭疫病由卵菌門的芋疫黴菌從廣東、廣西、湖南和湖北等主要芋頭產區侵染所致。疫病是芋頭生產過收集芋頭品種和野生種，種植於實驗田中。
程中的一種主要限制因素，可引起芋頭減產２５％
１．２病原菌的分離及鑑定
～國外已有收集芋頭芋頭疫黴菌的分離參考李智軍等的方法。品種，並鑑定其疫病抗性的報道從辣椒發病田塊採集具有芋頭疫病典型症狀的已從芋頭品種中鑑定出９種抗疫病的基因（ｓｈａｒｍａ，病葉，切取病健交接部位２～３小塊，置於含抗
２００８）。用對印度芋頭品種
生素胡蘿蔔培養基（ｃａ）平板（青黴素５０ｍｇ、利進行了遺傳多樣性分析，並找到了與疫黴病抗**平１００ｍｇ、胡蘿蔔２００ｇ榨汁、瓊脂２０ｇ／ｌ）上，基因連鎖的分子標記。國內對芋頭的研究較少，２５℃～２８℃培養２ｄ後，挑取菌落邊緣菌絲少許，
只有用ｒａｐｄ對芋頭的多樣性進行了研究（龍雯
轉接至不含任何藥劑的ｃａ培養基上在同樣溫
收稿日期
專案**：《水生蔬菜主要病蟲害無害化綜合防控技術研究》公益性行業（農業）科研專項經費子課題分專案（專案編號作者簡介：周清平（１９６９一），男，農藝師，長期從事基層植保工作。
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度條件下培養３ｄ～５ｄ。經形態學觀察為疫黴菌。上而下調查全部葉片的發病情況，根據病害分
儲存菌種作抗病性鑑定（李智軍，２００７）。
用聚合酶來擴增真菌ｉｔｓ。用引物ｉｔｓ和ｉｔｓ４來擴增真菌的ｉｔｓ。ｉｔｓ４和ｉｔｓ５分別為和
用６０ｐｌ的反應體系，按如下組成
配製：２５．５ｐｌ滅菌雙蒸水緩
衝液聚合酶，３．０ ｌ引物混合液（按等體積混合和ｉｔｓ５前導引物和隨後引物）。用牙籤挑菌落到ｐｃｒ混
合液中。ｐｃｒ的條件如下
個迴圈。取５ ｌ點樣，取
剩餘的擴增陽性的反應液送公司測序。
１．３芋頭的疫病抗病性鑑定
用塑膠袋取第２或第３嫩的葉片到室內，於搪瓷盤放２層沙布，加適量的滅菌水，將葉片平鋪於搪瓷盤中，在葉片選４個點，其中３個點各點２０ｐｌ每公升１０６個分生孢子液的孢子懸液，另一
個點點２０￣ｔｌ滅菌水作對照。點樣後小心用塑料薄膜蓋住搪瓷盤保濕。於２８℃光照培養箱中培養。４ｄ後測量病斑的直徑
１．４芋頭藥效試驗１．４．１施藥方法
選用感病的湛江－８芋頭品種作材料，種植於大田，芋疫病零星發病時開始進行藥劑防治。所選藥劑均為對疫黴菌有效的農藥。按照藥劑使用說明確定稀釋倍數和用藥量，葉片正反面均勻噴霧，噴霧過程中用塑料膜將不同處理間隔。
４月２４ ｅｔ第１次用藥，經檢查；５月２日第２次用藥；５月９日第３次用藥。試驗期間除施用殺蟲劑外未施用其他殺菌劑，水肥等田間管理按常規
管理。。
１．４．２調查方法
在施藥前ｌｄ（即６月５日）調查發病情況，計算藥前病情指數，第３次噴藥後７ｄ（即５月１６日）
調查發病情況，計算病情指數和防治效果。每小區隨機調查３個點，每個點５株，共查１５株，自
２８一級，計算病情指數和防治效果。
ａ）芋疫病分級標準：
０級為無病斑；
１級為病斑面積佔整個葉面積５％以下；３級為病斑面積佔整個葉面積６％～１０％；５級為病斑面積佔整個葉面積１１％～２５％；
７級為病斑面積佔整個葉面積２６％～５０％；
９級為病斑面積佔整個葉面積５０％以上。ｂ）病情指數和防治效果按下面公式計算：病情指數＝
ｘ１００
防治效果＝（１一）×１ｏ０
式中：ｃ ——對照區施藥前病情指數
ｃｋ——空白對照區施藥後病情指數ｐ ——藥劑處理區施藥前病情指數屍 ——藥劑處理區施藥後病情指數
２結果與分析
２．１病原菌的分離及鑑定
在ｃａ培養基上，菌落均勻，氣生菌絲較少，
邊緣明顯，生長較慢。菌絲形態簡單，較細，粗２ｐｍ～７ｐｍ；孢囊梗不規則分枝、傘形分枝或合軸分枝，直徑孢子囊卵形、長卵形、橢圓形，基部圓形，頂部有一乳頭狀突起（圖１）。
圖１芋頭疫黴菌孢子形態
用ｉｔｓ引物從所有的所分離的真菌中擴增出９００ｂｐ左右的產物，測序後用ｂｌａｓｔ進行同源性分析，與
ｔｉｏｎ）中具有
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９７％的一致性，因此所分離的真菌為芋頭疫黴菌。
２．２抗病性鑑定
離體葉片抗性鑑定結果，其中有５個芋頭品種接種後病症為水浸狀，無法測定病斑直徑。這些材料在接種６ｄ後，葉片腐爛，因此認為這些為
感病品系。其餘３９個品系經接種鑑定後形成明
顯的病斑，測定病斑的直徑後，經方差分析，ｆ值為４１．２６，都比ｆ ＝１．５４顯著大，說明各品系間抗病性差異顯著。芋頭品系的抗性按下列標準劃分：病斑直徑小於０．５ｃｍ為抗病為中抗；大於１．０ｃｍ為感病。
在這些品系中，抗病品系只有８個，分別為惠州一１、惠州一２、廉江一１、湛江一５、湛江一ｌｏ、韶關一１、韶關一２和武漢一１，佔１８．２；中抗１１個，分別為佛山一２、廣州一２、江門一１、茂名．２、
汕頭．３、湛江 ７、湛江一９、北海一１、興安一２、荊州一１和
浠水一１，佔２５．０％；感病品系２０個，加上前面接種
後症狀為水浸狀的２個芋頭品系，佔５６．８％（見表１）。
２．３藥劑篩選
表２不同藥劑防治芋頭疫病的效果
經統計分析，施藥後病指的ｆ值為６３．８，大於各處理問差異顯著。上述６種農
藥對芋頭疫病的防治效果如表２。從表中看出施用農藥的幾個處理與對照相比均具有顯著的
防效。只是不同藥劑對疫病的防效也具有顯著的差異，其中錳鋅．氟嗎啉、５０％烯醯嗎啉和霜脲．錳鋅的防效在６０％以上，可用於芋頭疫病的防治。
表１不同芋頭品系疫病的抗病性
３討論真菌的分子鑑定需要許多煩瑣的步驟，包括
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ｄｎａ的提取，有許多報道有關從細菌和真菌中
提取ｄｎａ方法的報道
２００６）。本文用一種對酶抑制物不敏感的ｍｉ—
聚合酶對疫黴菌進行菌落ｐｃｒ，該方法不需要對真菌進行任何處理，且只需要一點樣品即可，因此可降低在ｄｎａ提取過程中汙染的風險，同時也更為快捷。
我國芋頭主產區珠江流域、長江及淮河流
域，有大量的芋頭品種許多農戶不知道所種植的芋頭品種的名稱，這給芋頭品種
的收集、抗病性鑑定及種質資源的儲存造成了相當大的麻煩。國外在建立芋頭的核心種質資源
庫時，使用顯性的穩定的農業性狀可對芋頭品系進行初步分類。本文也採用形態學對所收集的
品系進行了初步篩選，然後再進行抗病性鑑定。採用２種抗病性鑑定指標，侵染頻率和病斑直徑認為離體葉片接種法是一種簡潔快速鑑定芋頭疫病抗病性的方法，接種後５ｄ的病斑平均直徑是鑑定疫黴菌的有效指標本文採用離體葉片鑑
定法對芋頭品系進行了抗病性鑑定，各品系間抗病性差異顯著，所篩選的抗病品系可用生產中防治疫病的為害。
藥劑試驗結果表明，錳鋅氟嗎啉、５０％烯醯嗎啉和霜脲錳鋅對芋頭疫病有明顯地控制作用，防治效果較好，可用於疫病的防治中。這個結論與５０％烯醯嗎啉防治芋頭疫病的效果好
一致（朱敦軍，２００９）。在生產實踐中，芋頭疫病
的防治以預防為主，特別是在高溫雨後應立即施藥預防。在芋頭種植的過程中，發現田間的水分
管理是疫病發病的１個關鍵因素。保持濕潤管理能較好地控制疫病的發生。而田間長期浸泡在水中，疫病發病十分嚴重，有時整塊田絕收。而當疫病發病很嚴重時，藥劑防治的效果很有限。
參考文獻
一３０一
４２—４８．
［６】龍雯虹，許明輝，張應華．雲南芋頭種質資源ｒａｐｄ分子標記
的初步研究．雲南農業大學學報李智軍，龍衛平，鄭錦榮，雷建軍．廣東辣椒疫黴菌分離鑑定
及其致病力和生理小種分化研究．華南農業大學學報，２００７，
血【１４】朱敦軍．５０％烯醯嗎啉水分散粒劑防治芋頭疫病藥效試驗．
現代農業科技
2023年全國區試和生產試驗品種的抗病性鑑定比較
1 試驗時間與地點 試驗於2010 2011年在雲南省菸草農業科學研究院研和基地田間病圃和溫室進行。2 試驗方法 tmv以三生 nn為抗病對照，革新三號為中抗對照，g140和紅花大金元為感病對照 赤星病以感病品種g140 中抗品種g28 抗病品種淨葉黃為對照 黑脛病以革新三號為抗病對照，金星6007...