1 試驗時間與地點
試驗於2010~2023年在雲南省菸草農業科學研究院研和基地田間病圃和溫室進行。
2 試驗方法
tmv以三生-nn為抗病對照，革新三號為中抗對照，g140和紅花大金元為感病對照；赤星病以感病品種g140、中抗品種g28、抗病品種淨葉黃為對照；黑脛病以革新三號為抗病對照，金星6007為中抗對照，小**1025為感病對照，紅花大金元為感病輔助對照；根結線蟲病以感病品種長脖黃、中抗品種k326及抗病品種nc95為對照。
按照田間病圃自然誘發和人工接種誘發鑑定方法，對全國區試和生產試驗品種y101、lj237、cf222、優選1號、ly0414、y8190、408、nc89、黔煙1號、yn110、cf224、pvh1452、hb029、畢納1號、c4288、6517、k-2、cy99、fj312、cf223、y8342、9808、yn105、ql-3、fl209、fl57、k326進行tmv、赤星病、黑脛病和根結線蟲病四種主要病害的抗性測定，得出全國區試和生產試驗各品種對不同病害的抗性評價。每個品種每種病害設3次重複，每次重複8-10株，隨機排列，田間管理參照優質煙生產標準執行。各病害抗性鑑定的詳細方法如下：
tmv抗性鑑定方法及病情調查：2023年田間鑑定採用高壓噴槍接種病毒稀釋液，噴射壓力為1.5-2kg/cm2，接種濃度為1%，移栽後15-20天接種，現蕾期調查病情。
2023年溫室盆栽鑑定，接種4-5片真葉期菸苗，接種後15-21天，感病對照品種病情指數不低於60時進行病情調查。
赤星病抗性鑑定方法及病情調查：採用人工接種誘發鑑定方法，在病圃田四周的保護行及誘發行種植感病品種g140，待g140進入成熟初期時，將在培養基上分離培養好的赤星病病原菌製成1%的葡萄糖孢子懸浮液（孢子濃度為104-106個/ml），噴霧接種於g140中下部成熟葉片，延期採收或不採收腳葉，最終誘導病圃內赤星病偏上流行。於每次採烤前一天進行病情調查，調查3次。
2023年在參鑑品種四周種植淨葉黃作保護行。下部葉開始成熟時進行人工輔助接種。
黑脛病抗性鑑定方法及病情調查：田間病圃採用莖基部菌谷接種法，於團棵期接種，接種量5g/株，分別於旺長期、現蕾期、成熟期調查病情。
根結線蟲病抗性鑑定方法及病情調查：田間鑑定採用病圃（南方根結線蟲和花生根結線蟲混合種群）自然誘發抗性的方法，田間採烤末期一次性拔根調查病情。
以上病害嚴重度的分級標準按國家標準gb/t 23222-2008規定執行，根據病害嚴重度及對照品種的發病情況，確定病級並計算病指。根據感病對照達到感病時調查的各品種病指，將品種的抗性劃分為四級：抗病（r）：
病指25以下；中抗（mr）：病指在25.1-50；中感（ms）：
病指在50.1-75；感病（s）：病指75以上。
3鑑定結果
表1 全國區試黑脛病
表2 全國區試tmv
表3 全國區試赤星病
表4 全國區試根結線蟲
hb029、ly0414抗黑脛病，高抗tmv，中抗赤星病和根結線蟲病；cf224抗黑脛病，高抗tmv，中抗赤星病，中感根結線蟲病；cf222抗黑脛病、中感tmv、中抗赤星病和根結線蟲病；y101抗黑脛病，中感tmv、根結線蟲病，中抗赤星病；6517抗黑脛病，中感tmv，赤星病，中抗根結線蟲病；畢納1號、k-2、fl57抗黑脛病，感tmv，中抗赤星病、根結線蟲病；優選1號、cy99、y8190抗黑脛病，感tmv，中抗赤星病，中感根結線蟲病；lj237、cf223中抗黑脛病，高抗tmv，中抗赤星病、根結線蟲病；fj312、中抗黑脛病，高抗tmv，中抗赤星病，中感根結線蟲病；y8342中抗黑脛病、tmv、赤星病，中感根結線蟲病；408、pvh1452中抗黑脛病、赤星病，中感tmv、根結線蟲病；*黔煙1號、yn110、yn105、fl209中抗黑脛病，感tmv，中抗赤星病，中感根結線蟲病；9808、k326中抗黑脛病，感tmv，中抗赤星病、根結線蟲病；c4288、ql-3中抗黑脛病，感tmv，中感赤星病，中抗根結線蟲病；nc89中抗黑脛病，感tmv，中感赤星病、根結線蟲病。
供試27個全國區試和生產試驗品種中，有4個品種*lj237、ly0414、hb029、cf223同時抗4種病害，9個品種*cf222、cf224、畢納1號、*k-2、fj312、y8342、9808、fl57、k326(ck)同時抗3種病害，13個品種*y101、優選1號、y8190、*黔煙1號、408、*yn110、pvh1452、*c4288、*6517、*cy99、yn105、ql-3、fl209同時抗2種病害，1個品種nc89僅抗1種病害。
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