摘要題目(題目：宋體,三號字,加粗,居左)
作者1,通訊作者2*(作者：宋體,小四號字,加粗)
1部門1,單位1,位址1,城市1,國家1;(單位位址：宋體,五號字,斜體)2
部門2,單位2,位址2, ,城市2,國家2.
摘要正文:宋體，小四號字，行距20磅；其中，參考文獻應用方括號和數字標註[1]和[2,3]
關鍵詞:宋體,小四號字
致謝:宋體,小四號字,單倍行距參考文獻:
[1]姓名,姓名(年)檔名.雜誌名,卷期,頁碼範圍.(宋體，小五號字,單倍行距)[2] smith, brown (year)file name.
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構建「轉錄因子-啟動子」耦聯載體開展植物生物鹼次生代謝工程
張磊1，陳萬生2*
12萜類吲哚生物鹼(terpenoidindolalkaloid,tias)是一大類有著重要藥用價值的植物生物鹼。夾竹桃科長春花（catharanthus roseus）可以合成多達百餘種tias，其中許多被廣泛地作為藥物應用。植物tias生物合成途徑的研究已經相當深入。
一種受茉莉酸甲酯誘導的植物轉錄調控因子orca3，通過調控初級和次級代謝途徑中的關鍵酶基因的表達來調節tias合成。通過構建傳統的35s啟動子植物表達載體，分別對轉錄因子orca3和關鍵酶基因牻牛兒醇羥化酶(geraniol10-hydroxylase,g10h)進行了單轉和雙基因共轉化。結果顯示在長春花中同時過量表達orca3和g10h不能取得最佳的含量提公升效果。
進一步通過基因融合(gene fuse)技術，用帶有甲基茉莉酸誘導響應元件（jasmonate-and elicitor-responsive element, jere）特異序列的異胡豆苷合成酶（strictosidine synthase,str）啟動子替換g10h野生型啟動子，和orca3一起構成耦聯植物表達載體轉化長春花。實時定量pcr結果顯示通過對g10h啟動子的替換，orca3可以通過作用於jere調控g10h的表達。轉化髮根中目標產物長春鹼的含量為1.
32 mg/g，是對照（0.33 mg/g）的4倍。阿瑪鹼的含量為0.
87 mg/g，是對照（0.23 mg/g）的3.8倍。
但是長春質鹼的含量（0.19 mg/g）僅為對照（0.25 mg/g）的76%。
本專案著眼於真核生物基因的表達調控以及轉錄因子和啟動子的相互作用，針對植物次生代謝途徑中的關鍵酶基因的啟動子序列進行結構改造，使其受特定的轉錄因子調控，為克服合成途徑中的限速步驟，提高目標化合物的產量提供了新的思路。
關鍵詞：代謝工程；基因修飾；轉錄因子；啟動子；萜類吲哚生物鹼*
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