洗板機是用於清洗酶標板中殘留溶液的儀器,洗板機酶標板是否清洗乾淨是決定酶標分析儀檢測結果是否正確的關鍵因素之一。
1 校準方法
1·1 校準條件
環境溫度20±5℃,相對濕度不大於85%。室內溫度變化不能大於1℃/h,水溫與室溫之差不應超過2℃。
1·2 校準用標準物質
純水(蒸餾水或去離子水)。
1·3 校準裝置
分度值為0·1mg的天平,分度值為0·1℃的水銀溫度計。
1·3 校準方法
(1)水溫測定
首先將洗滌液全部換為蒸餾水或去離子水,將分度值為0·1℃的水銀溫度計插入蒸餾水或去離子水中,待溫度計示值穩定5min後測定蒸餾水或去離子水的溫度。
(2)空杯質量
選用1排(每排12個杯)乾淨的酶標杯放入天平中稱量,得到空杯質量m0。
(3)清洗
把該酶標杯放入酶標空板中,開啟洗板機用蒸餾水或去離子水對酶標杯進行清洗。
(4)清洗後每杯殘留量
把清洗後的酶標杯放入天平中進行稱量,得到清洗後的酶標杯m1。則清洗後每杯的殘留量m2按下式計算:m2=(m1-m0)/12其中:
m2—清洗後每杯的殘留質量(mg);m1—清洗後12個杯的質量(mg);m0—清洗前12個空杯質量(mg)。
(5)清洗後每杯殘留體積
酶標板清洗後每杯的殘留體積按下式計算v=m2/ρw其中:v—清洗後每杯的殘留體積(μl);m2—清洗後每杯殘留質量(mg);ρw—測定溫度下純水密度值(mg/μl)。
2 數學模型v=(m1-m0)/(ρw×12)(1)由於純水的密度在常溫下變化不大,以水溫20·0℃時純水的密度為0·998203g/ml為例來進行評定,式(1)可簡化為:v=(m1-m0)/11·978 (2)靈敏度係數為:c1=vm1=111·978c2=vm0=-111·978標準不確定度:
u1=|c1|u(m1)u2=|c2|u(m2)
3 輸入量的標準不確定度的評定
不確定的主要的**包括稱量過程中引入的不確定和測量重複性引入的不確定。
3·1 稱量過程中引入的不確定度
稱量過程中引入的不確定度主要為電子天平的不確定度引起的測量體積的不確定度,採用b類方法進行評定。電子天平不確定度的由檢定證書給出,其擴充套件不確定度為0·4 mg,包含因子k=2,則其標準不確定度為:u(mi)=0·2 mg。
u1=|c1|u(m1)=111·978×0·2=0·017μlu2=|c2|u(m2)=111·978×0·2=0·017μl另外估計自由度v1=v2=50。由電子天平不確定度引入的測量體積不確定度為:ucb=u21+u22= 0·0172+0·0172=0·024μl合成標準不確定度的有效自由度:
veffb=0·02440·017450+0·017450=99
(3)傳播率公式
由上式和各量關係可知其標準不確定度:uδt=u2ti+u2t0= 2ut
3.3各項不確定度分析
(1)電測裝置誤差引入的標準不確定度為:u1=2·2·6mk2·33k=0·05%輸入模擬溫度訊號,經多用數字表校準,所引起的不確定度
(2)流量訊號發生器不確定度:u2=0
(3)熱係數查表誤差:u3=0·1%3=0·058%
(4)測量時的接觸電阻及導線電阻影響:u4=232mω100ω=0·002%
(5)被檢熱能表分辨力產生的引入的不確定度檢定時,熱量表的熱能變化量至少為500個數字,所以引入不確定度為0·2%,矩形分布μ5=0·2%3=0·12%
3·4 不確定度彙總:通過以上分析,將各分量列於表5。
3·5 合成現對不確定度:
(1)合成相對不確定度為uc=0·05%
(2)有效自由度veff=(0·05)40·054/∞+0·0584/∞+0·0024/∞+0·124/∞=∞3·6 擴充套件不確定度的評定:取置信概率p=95%,有效自由度veff取∞,查t分布表得k95=t95(∞)=1·960所以擴充套件不確定度ue95rel=1·960* 2(u2t1+u2t3+u2t4+u2t5=0·28%p=95%
3·7 熱能表計算器示值誤差的測量不確定度結果的報告熱能表計算器示值誤差的擴充套件不確定度ue95rel=0·28%,veff=∞。
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