3，反應：加酶結合物100ul，室溫（21-25℃）靜置20+/-2分鐘。甩去，每孔加洗滌液一滴，蒸餾水洗滌5次，拍乾。
4，顯色：每孔加底物和顯色液各100ul，室溫（21-25℃）靜置10+/-2分鐘。以陽性對照出現明顯藍色為準。
[結果判定
1、目測法：在白色背景下觀察各孔顏色，明顯蘭色為陽性，無色或極淡蘭色為陰性。
2、酶標儀檢測（選擇波長450nm）：每孔加終止液一滴，用空白孔校零，測定各孔od值。
臨界值（陰性對照od值
（1）樣本od值s/判為陽性；
（2）樣本od值s/判為陰性。
（3）樣本od值s/介於0.9與1.0之間，判為可疑，需重複檢測。
注：（1）當陽性對照/陰性對照od值≥5時，試驗結果有效；
（2）陰性對照od值小於0.05時，按0.05計算；大於0.05時，按實際值計算。
[質量控制]
為確保測試結果準確可靠，每批測試均應放置陰陽性質控血清與被檢樣品同時測試，用以檢查試劑效能。
[注意事項
1、不同批號的試劑不可混用。
2、試劑盒用前先平衡至室溫。含血球的標本易出現假陽性，應避免使用。
3、未用完的板條應及時封存於易封袋中。
4、滴加試劑前，應將滴瓶翻轉數次混勻。滴加時瓶身應保持垂直。
5、試劑盒置於2-8℃貯存，有效期6個月
6、本試劑應視為有傳染性物質，請按傳染病實驗室規程操作。
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