玉公尺鬚報告

2022-06-06 09:57:05 字數 1712 閱讀 1560

三、儀器和試劑

1.儀器

圓底燒瓶、冷凝管燒杯2只,10ml、50ml量筒各1個,濾布,滴管,蒸發皿,ph試紙,玻璃棒,恆溫槽,減壓裝置一套。紫外分光光度計,容量瓶。

2.試劑

玉公尺鬚10.0g(乾燥至恒重,過40目篩,精密稱取)乙醇、蒸餾水、濃鹽酸、濃硫酸、苯酚、三氯化鋁、鋅粉、萘酚

四、實驗步驟

1g玉公尺鬚放入150ml的圓底燒瓶中,以30倍水量、恆溫水浴鍋加熱至90℃,開始計時,反應1h,離心3min(3500轉/min),上清液抽濾,

1.提取

(1)黃酮苷

取玉公尺鬚柱頭2.0g放入圓底燒瓶中,以1∶20為料液比,用60%乙醇於80℃水浴內提取1h;倒出,加入10ml溶劑提取30min,共提取2次,合併兩次提取液過濾後,置50ml容量瓶中定容。

(2)多醣

取玉公尺鬚柱頭2.0g放入圓底燒瓶中,以1∶20為料液比,用蒸餾水於90℃水浴內提取1h,倒出,加入10ml溶劑提取30min,共提取2次,合併兩次提取液過濾後,置50ml容量瓶中定容。

2.鑑別

(1)α萘酚試驗(molisch紫環反應)

取檢品的水溶液1ml,加5%萘酚試液數滴振搖後,沿管壁滴入5-6滴濃硫酸,使成兩液層,待2-3分鐘後,兩層液面出現紫紅色環(糖、多醣或甙類)。

多醣類遇濃硫酸被水解成單醣,單醣被濃硫酸脫水閉環,形成糠醛類化合物,在濃硫酸存在下與α萘酚發生酚醛縮合反應,生成紫紅色縮合物。

(2)鹽酸一鎂(或鋅)粉試驗

取檢品的乙醇溶液1ml,加放少量鎂粉(或鋅粉),然後加濃鹽酸4-5滴,置沸水浴中加熱2-3分鐘,如出現紅色示有游離黃酮類或黃酮甙(以同法不加鎂或粉做一對照,如兩管都顯紅色則有花色素存在。如繼續加碳酸試液使成鹼笥即變成紫色雙轉變為藍色,即證明含花色素)。

黃酮類的乙醇溶液,在鹽酸存在的情況下,能被鎂粉還原,生成花色甙元而呈現紅色或紫色反應(個別為淡黃色、橙色、紫色或藍色)。這是由於酮類化合物分子中含有乙個鹼性氧原子,致能溶於稀酸中被還原成帶四價的氧原子即鋅鹽。本法是鑑別黃酮類的乙個反應。

但花色素本身在酸性下(不需加鎂粉)呈紅色,應加以區別。

3.含量測定方法

(1)黃酮含量測定

2g玉公尺鬚40ml乙醇,提取出來的提取液濃縮至接近50ml(小於50ml),然後用60%乙醇定容至50ml,搖勻,過濾, 精密移取續濾液4ml於10ml容量瓶中,精密加入0.1mol/l三氯化鋁甲醇顯色劑溶液4ml,搖勻,定容,放置10分鐘。以60%乙醇為空白,測定吸光度,代入上述回歸方程中,計算出百分含量。

y=29.302x+0.0213 相關係數:

r=0.9999。黃酮在4ug-20ug/ml範圍內,吸收度和糖含量呈良好的線性關係。

(2)多醣含量測定

取玉公尺鬚柱頭2.0g放入圓底燒瓶中,以1∶20為料液比,用蒸餾水於90℃水浴內提取1h,倒出,加入10ml溶劑提取30min,共提取2次,合併兩次提取液過濾後,置50ml容量瓶中定容。取濾液5ml,定容於25ml容量瓶,搖勻。

從25ml容量瓶中移液0.5ml至10ml具塞試管,加1ml5%苯酚,3.5ml濃硫酸,40℃恆溫水浴30min,自然冷卻15min至室溫,在490nm處測吸光度,在標準曲線上計算出濃度,最後計算出得率。

同時精密吸取蒸餾水0.5ml, 於10ml試具塞試管中,加入5%苯酚溶液1 ml,迅速加入3.5ml濃硫酸,迅速搖勻,同法做空白在490 nm波長處測定吸收度(a)值如下:

y=0.0038+5.91x,相關係數,r=0.9999,在糖含量60~140μg/ml範圍內,吸收度和糖含量呈良好的線性關係。

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