博落回提取物生物鹼HPLC檢測方法

2022-06-05 23:18:05 字數 766 閱讀 4694

試劑和溶液

——乙腈:色譜純,通過0.45μm孔徑油相膜過濾

——水:二次蒸餾水,通過0.45μm孔徑水相膜過濾

——甲醇:分析純

——磷酸:分析純

儀器——高效液相色譜儀(waters 2996);

——色譜柱: ods c18 (200mm×4.6mm 5μm);

高效液相色譜條件

——流動相:乙腈+水=30+70(v/v)(每100ml水中加0.1ml磷酸);

——流速:1.0ml/min;

——柱溫:35℃;

——檢測波長:270 nm;

——進樣體積:20μl;

測定步驟

1 標準溶液的配製

精密稱取血根鹼標樣約0.02g(),置於10ml容量瓶內,用甲醇溶解,超聲30min,冷卻定容,再用甲醇稀釋配製成0.2mg/ml的對照品溶液。

用0.45μm的微孔濾膜過濾備用。

精密稱取白屈菜紅鹼標樣約0.02g,置於10ml容量瓶內,用甲醇溶解,超聲30min,冷卻定容,再用甲醇稀釋配製成0.1mg/ml的對照品溶液。

用0.45μm的微孔濾膜過濾備用。

2 試樣溶液的配製

精密稱取供試品粉末約0.02g(提取物稱樣量為0.04g),置於100ml容量瓶內,用甲醇溶解,超聲30min,冷卻定容。用0.45μm的微孔濾膜過濾備用。

測定在上述操作條件下,待儀器基線穩定後,連續注入數針標樣溶液,直至相鄰兩針生物鹼響應值相對變化小於1.5%後,按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行色譜測定。

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