Leica全自動染色封片工作站的使用體會

2021-09-07 02:20:12 字數 2225 閱讀 5451

隨著病理學技術的迅速發展,全自動染色封片一體化工作站以其卓越的效能和良好的處理效果,特別是其穩定、高效的染色過程,逐漸被各大醫院和相關實驗室接受並使用,並逐步替代目前的人工染色。自將工作站應用於常規he染色以來,經過近10萬例的實際應用,切片染色效率明顯提高,染色效果穩定,染色質量顯著改觀 。

1 材料與方法

1.1 儀器裝置

德國leica全自動染色封片工作站,包括全自動染色機(st5020)、封片機(cv5030)、染色架8個(每個染色架可裝30張玻片)。

1.2 試劑

二甲苯,無水乙醇,95%乙醇,80%乙醇,75%乙醇,harris蘇木素,0.5%水溶性伊紅,1%鹽酸乙醇,1%氨水,苯酚二甲苯混合液,中性樹膠。

1.3 處理過程

各種組織經固定、脫水、透明、石蠟包埋後製成3μm切片,按病理編號依次插入染色架,70℃烤箱烤片10 min左右,即可上機染色,具體染色步驟見表1。染色完成後,染色架由機械臂自動轉入封片機中,使用國產玻璃蓋玻片(24 mm×50 mm),中性快乾膠封片。

2 結果

石蠟切片he染色均勻、色彩鮮豔,紅藍分明,胞質、胞核結構對比清晰;無氣泡、無溢膠現象。

3 討論

傳統手工染色操作繁瑣,勞動強度大,溫度、時間、試劑、環境、個體差異等因素皆可影響染色效果,不適合大批量標本的染色處理。而全自動組織切片染色機因其獨特的以人為本的智慧型化設計理念、周到而完善的處理程式,不但極大地保證了切片染色質量的高效性、穩定性,還可以減輕工作強度和改善工作環境。

3.1 優點

3.1.1 效率高可進行批量標本的染色,最多12個染色架同時染色,每個染色架裝30張切片,並可同時執行多個程式,尤其適用於標本量大的單位。

與傳統手工染色相比,染色同時工作人員可進行其他工作(如切片),工作時間統籌化,整體工作效率得以提高。

3.1.2 穩定性好染色封片工作站的各步驟均由微控制器控制,時間控制精準、嚴密。

在程式設定合理的前提下,染色效果更穩定[3]。有報道,室溫低於15℃時染色效果不佳,應適當提高室溫[2]。我科室日常工作中室溫始終保持在23℃左右,染色效果穩定,無明顯差異。

可設定數個精確步驟(如蘇木素、分化),當相鄰染色架出現時間衝突時,優先確保精確步驟染色。

3.1.3 保障具有斷電記憶功能,斷電重新啟動後,可以繼續染色流程,不必從頭重複染色。可選配ups電源,在主電源缺乏時持續供電,保障染色工作繼續完成。

3.1.4 安全工作站在相對密閉的空間中進行染色封片,大大減少了有毒揮發性試劑(尤其是二甲苯)對工作環境及工作人員的危害。

我科室將染色工作站放於通風櫥中,更加有利於對環境和人員的保護。

3.1.5 便於質控自動染色機調整好各步驟時間,可產生精確而連貫的染色、分化、脫水等過程,與傳統染色相比,受人為因素影響較小;同時可以限定各染色切片的數量,到達使用期限,機器會自動報警提示,對常規染色的質量控制提供了可靠平台。

3.2日常使用時的注意事項

3.2.1 染缸的排列染缸中的液體盡量按照染色步驟依次排列,所有需要沖水的步驟都應靠近水缸,並使機械臂行進的路線時間最短化;機械臂前進時有一定的迴轉,合理設計避免玻片上的試劑滴入其他染缸造成汙染;透明用二甲苯靠近染色機出口位置,便於將玻片快速轉入封片機進行封片。

3.2.2 試劑的使用與更換根據實際工作情況,我科使用成品harris蘇木素染液(珠海貝索),染片約2500張;使用0.

5%水溶性伊紅,滴加1~2滴冰醋酸促染,染片約2500張;其他脫蠟二甲苯、脫水梯度酒精、透明二甲苯、分化1%鹽酸乙醇及返藍用1%氨水,染片600張左右。保證每缸液體量在最低限度以上,染色時間可根據具體情況適當調整。

3.2.3 蓋片機使用注意每日工作前,檢查滴加中性樹膠的管道及噴嘴是否通暢,出膠量是否合適;蓋片機的浴槽中保持一定量的二甲苯,保證封片時玻片的濕潤;新增蓋玻片時最好帶手套操作,防止水汽進入玻片中間,保持蓋玻片的乾燥,方便吸取,避免出現重疊、碎片現象;切片全部蓋完後,染色架自動送入右側滑道,當≥2個染色架累積於滑道時,機器出現報警聲,所以應及時取出空染色架;每個輸出架能裝30張切片,封片機最多連續封片60張,染色蓋片完成後,及時將切片取出,保證輸出架有足夠的空槽接收新的玻片。

3.2.4 機器的維護保養染片機水槽底部有數個漏孔,為流水沖洗時的進水孔,每天染色結束後將水排淨,防止生霉,注意定時清洗,避免被水垢、染料等堵塞;染色缸每週更換試劑時及時用紗布擦拭及清洗,各種試劑用專門的染色缸,避免交叉使用,影響染色效果;必要時和廠家服務人員聯絡進行專業維護和保養。

綜上所述,全自動染色封片工作站操作簡單方便,染色效率高效果好,改善工作環境。除應用於常規he染色外,在部分特殊染色和快速冰凍切片染色中也得到較好應用,充分發揮其優勢,更好促進病理技術的發展。

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