一， 名詞解釋
1，cdna與cccdna；cdna是由mrna通過反轉錄酶合成的雙鏈dna；cccdna是游離於染色體之外的質粒雙鏈閉合環形dna。
2，cap；大腸桿菌分解代謝物基因活化蛋白，這種蛋白可將葡萄糖飢餓訊號傳遞給有許多操縱子，使細菌在缺乏葡萄糖時可以利用其他的碳源。
3， micrna；互補干擾rna或稱反義rna，與mrna序列互補，可抑制mrna的翻譯。
4，訊號肽；真核細胞的分泌蛋白一般在n端含約20個氨基酸殘基的訊號肽，含高度疏水的氨基酸，訊號肽的c端含有訊號肽酶識別的位點。
5，上游啟動子元件；是指對啟動子的活性起到一種調節作用的dna序列，-10區的tata、-35區的tgaca及增強子，弱化子等
6，回文序列；dn**段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制性酶切位點。
7，模體；蛋白質分子空間結構中存在著某些立體形狀和拓撲結構頗為類似的區域性區域
8，sd序列；核醣體結合位點中富含嘌呤的序列，一致序列為aggaggu，能被核醣體16srrna識別並結合，從而起始翻譯。
9，藍-白斑篩選；含lacz基因（編碼β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物x-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-半乳糖苷)產生藍色，從而使菌株變藍。當外源dna插入後，lacz基因不能表達，菌株呈白色，以此來篩選重組細菌。稱之為藍-白斑篩選。
10，順式作用元件；是指那些與結構基因表達調控相關，能夠被基因調控蛋白特異識別和結合的特異dna序列，包括啟動子、上游啟動元件，增強子等。
二， 填空題
1原核生物有三種起始因子是if-1，if-2，if-3
2，啟動子中的元件通常可以分為兩種；核心啟動元件和上游啟動元件
3，證明dna是遺傳物質的兩個關鍵實驗，肺炎球菌感染小鼠，t2噬菌體感染大腸桿菌 ）這兩個實驗中主要的論點證據是：（生物體吸收的外源dna改變了其遺傳潛能 ）。
4，蛋白質多亞基形式的優點是（亞基對dna的利用來說是一種經濟的方法 ）、（可以減少蛋白質合成過程中隨機的錯誤對蛋白質活性的影響）、（活性能夠非常有效和迅速地被開啟和被關閉 ）。
5，質粒的複製型別有兩種：受到宿主細胞蛋白質合成的嚴格控制的稱為（嚴緊型質粒），不受宿主細胞蛋白質合成的嚴格控制稱為（ 鬆弛型質粒）。
6，隨著研究的深入，第一代抗體稱，多轉殖抗體第二代抗體稱，單轉殖抗體第三代抗體稱，基因工程抗體。
7，蛋白質的跨膜需要（ 訊號肽 ）的引導，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈摺疊成天然構象的蛋白質）
8，分子生物學的研究內容主要包含（結構分子生物學 ）、（基因表達與調控 ）、（ dna重組技術 ）三部分。
9，hnrna與mrna之間的差別主要有兩點：（ hnrna在轉變為mrna的過程中經過剪接，）、（ mrna的5′末端被加上乙個m7pgppp帽子，在mrna3′末端多了乙個多聚腺苷酸(polya)尾巴）。
10，dna重組技術也稱為（基因轉殖）或（分子轉殖）。最終目的是（把乙個生物體中的遺傳資訊dna轉入另乙個生物體）。
11，質粒dna具有三種不同的構型分別是：（線型 sc構型 ）、（有缺口的環形 oc構型 ）、（超螺旋 l構型 ）。在電泳中最前面的是（ sc構型 ）。
三， 問答題
1， 分別說出5種以上rna功能？
轉運rna :trna 轉運氨基酸核蛋白體rna: rrna 核蛋白體組成成
信使rna: mrna 蛋白質合成模板核不均一rna: hnrna 成熟mrna的前體
小核rna: snrna 參與hnrna的剪接
小胞漿rna: scrna/7sl-rna 蛋白質內質網定位合成的訊號識別體的組成成分
反義rna :anrna/micrna 對基因的表達起調節作用核酶 :ribozyme rna 有酶活性的rna
2， 對天然質粒的人工構建主要表現在哪些方面？
天然質粒往往存在著缺陷，因而不適合做基因工程的載體，必須對之進行改造建設；
a， 加入合適的選擇基因，如兩個以上，易於用作選擇，同通常是抗生素基因。
b， 增加和減少合適的酶切位點，便於重組。
c， 縮短長度，切去不必要的片段，提高匯入率，增加裝載量。
d， 改變複製子，變嚴謹為鬆弛，變少拷貝為多拷貝。
e， 加裝特殊的基因組件使更具基因工程特殊的要求。
3， 啟用蛋白cap對轉錄的正調控作用？
環腺苷酸（camp）受體蛋白crp（camp receptor protein），camp與crp結合後所形成的複合物稱啟用蛋白cap（campactivated protein ）。當大腸桿菌生長在缺乏葡萄糖的培養基中時，cap合成量增加，cap具有啟用乳糖（lac）等啟動子的功能。一些依賴於crp的啟動子缺乏一般啟動子所具有的典型的-35區序列特徵（ttgaca）。
因此rna聚合酶難以與其結合。
cap的存在（功能）：能顯著提高酶與啟動子結合常數。主要表現以下二方面：
①cap通過改變啟動子的構象以及與酶的相互作用幫助酶分子正確定向,以便與-10區結合，起到取代-35區功能的作用。
②cap還能抑制rna聚合酶與dna中其它位點的結合，從而提高與其特定啟動子結合的概率。
4， 基因文庫的構建對重組子的篩選，舉三種方法並簡述一種篩選過程？
抗生素抗性篩選、抗性的插入失活、蘭-白斑篩選或pcr篩選、差式篩選、dna探針
多數轉殖載體均帶有抗生素抗性基因（抗氨苄青黴素、四環素）。當質粒轉入大腸桿菌中後，該菌便獲得抗性，沒有轉入的不具有抗性。但不能區分是否已重組。
在含有兩個抗性基因的載體中，如果外源dn**段插入其中乙個基因並導致該基因失活，就可用兩個分別含不同藥物的平板對照篩選陽性重組子。 如puc質粒含lacz基因（編碼β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物x-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-半乳糖苷)產生藍色，從而使菌株變藍。當外源dna插入後，lacz基因不能表達，菌株呈白色，以此來篩選重組細菌。
5， 原核生物與真核生物啟動子的主要差別？
原核生物:ttgaca --- tataat------起始位點
-3510
真核生物:增強子---gc ---caat----tataa-5mgpp-起始位點
-110 -70 -25
6，利用雙氧末端終止法（sanger）測定dna序列一級結構的原理和方法
原理；採用核苷酸終止劑-2,3，-雙脫氧核苷酸終止dna的延長。由於它缺少形成3/5/磷酸二脂鍵所需要的3-oh，一旦參入dna中，此dna連就不能進一步延長。根據鹼基配對原則，每當dna聚合酶需要dnmp參入到正常延長的dna鏈中時，就有兩種可能，一是參入ddntp，結果導致脫氧核苷酸鏈延長的終止，二是參入ddnmp使鏈仍可繼續延長，直至參入下乙個ddntp，根據這一方法，就可以得到一維以ddntp結尾的長短不一的dn**段。
方法；是分成四組為別為ddamp,ddgmp,ddcmp,ddtmp反應後，聚丙烯醯胺凝膠電泳可讀出dna序列。
7，典型的dna重組實驗通常包括哪些步驟？
①提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一dna分子上（轉殖載體），形乙個新的重組dna分子。
②將這個重組dna分子轉入受體細胞並在受體細胞中複製儲存，這個過程稱為轉化。
③對那些吸收了重組dna的受體細胞進行篩選和鑑定。
④對含有重組dna的細胞進行大量培養，檢測外援基因是否表達。
8，pcr的反應體系要具有以下條件有哪些？
a、被分離的目的基因兩條鏈各一端序列相互補的 dna引物（約20個鹼基左右）。
b、具有熱穩定性的酶如：tagdna聚合酶。
c、dntp
d、作為模板的目的dna序列
四，分析題
1現在分離一段dn**段，可能會有編碼多肽的基因前幾個密碼子，該片段為
5‵cgcaggatcagtcgatgtcctgtg 3‵
3′gcgctccagtcagctacaggacac 5‵
那條鏈作為轉錄的模板鏈?
兩條鏈的mrna序列為；a，3′gcgcuccagucagcuacaggacac 5b, 5′cgcaggaucagucgauguccugug 3′ 起始密碼子為，aug,guc,uug,可知，第二條連為轉錄模板鏈，
寫出mrna的鹼基序列？
5′cgcaggaucagucgauguccugug 3′
此mrna能否形成二級結構嗎？
cgcaggaucagucgauguccugug
guguccuguagcugacuaggacgc
通過比較可以得到有agga
uccu，回文序列，可以形成二級結構。
翻譯從哪兒開始朝方向進行？
此鏈含有aug，gug，密碼子，如是一aug，為起始密碼子則為從第二個問之中的mrna的5′到3′若是gug為初始密碼子的話，兩方都可以進行。
此dna分離自原核生物細胞還是真核細胞？
真核生物及大部分原核生物以aug(甲硫氨酸)為起始密碼,少數細菌（屬於原核生物）以gug(纈氨酸)為起始密碼。 一般原核生物的mrna起始密碼子的前面有一段sd序列。一般為agga。
在這段mrna之中有這麼一段序列。而真核生物的mrna的通常在5′段有數個起始密碼子，構成單順反子。但是在這段序列中沒有，可以斷定這段序列來自原核生物。
2 1鏈 5′tgcaggatcagtcgatgtcctgcg 3′
2鏈 3′acgtcctagtcagctacaggacgc 5′
若以第一條鏈為模版連，則翻譯出的mrna序列為3′acguccuagucagcuacaggacgc 5′
若以第二條連為模版連，則翻譯出的mrna序列為5′ugcaggaucagucgauguccugcg 3′
分子生物學
清道夫細胞 處理氧化修飾了的膽固醇，不具備膽固醇轉化作用，最終導致膽固醇細胞破裂。2 逆轉錄 以病毒rna為模板，指導含有全部病毒資訊的dna合成過程。3 細胞凋亡 在基因程式性控制下有別於細胞壞死的一種，有規律的自我消亡。4 dna的c值 同種生物基因組dna含量是恆定的，乙個單倍體基因組中的dn...
分子生物學
第一章緒論 一 dna的發現 1928年英國科學家griffith等人發現肺炎鏈球菌使小鼠死亡的原因是引起肺炎。首先用實驗證明基因就是dna分子的是美國著名的微生物學家 ery。1952年，美國冷泉港卡耐基遺傳學實驗室科學家hershey和他的學生chase從事噬菌體侵染細菌的實驗。二 分子生物學簡...
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