藥品微生物實驗室規範指導原則用於指導藥品微生物檢驗實驗室的質量控
制。藥品微生物的檢驗結果受很多因素的影響，如樣品中微生物可能分布不均勻、
微生物檢驗方法的誤差較大等。因此，在藥品微生物檢驗中，為保證檢驗結果的
可靠性，必須使用經驗證的檢測方法並嚴格按照藥品微生物實驗室規範要求進行
試驗。藥品微生物實驗室規範包括以下幾個方面：人員、培養基、菌種、實驗室的
布局和執行、裝置、檔案、實驗記錄、結果的判斷等。
人員從事藥品微生物試驗工作的人員應具備微生物學或相近專業知識的教育背
景。實驗人員應依據所在崗位和職責接受相應的培訓，在確認他們可以承擔某一
試驗前，他們不能獨立從事該項微生物試驗。應保證所有人員在上崗前接受勝任
工作所必需的裝置操作、微生物檢驗技術和實驗室生物安全等方面的培訓，經考
核合格後方可上崗，同時，實驗室應制定所有級別實驗人員的繼續教育計畫。
檢驗人員必須熟悉相關檢測方法、程式、檢測目的和結果評價。微生物實驗
室的管理者其專業技能和經驗水平應與他們的職責範圍相符。如：管理技能、實
驗室安全、試驗安排、預算、實驗研究、實驗結果的評估和資料偏差的調查、技
術報告書寫等。
實驗室應通過參加內部質量控制、能力驗證或使用標準菌株等方法客觀評估
檢驗人員的能力，必要時對其進行再培訓並重新評估。當使用一種非經常使用的
方法或技術時，有必要在檢測前確認微生物檢測人員的操作技能。
所有人員的培訓、考核內容和結果均應記錄歸檔。
培養基培養基是微生物試驗的基礎，直接影響微生物試驗結果。適宜的培養基製備
方法、貯藏條件和質量控制試驗是提供優質培養基的保證。
1．培養基的製備
培養基可按處方配製，也可使用按處方生產的符合規定的脫水培養基。
在製備培養基時，應選擇質量符合要求的脫水培養基或單獨配方組分進行配
制。脫水培養基應附有處方和使用說明，配製時應按使用說明上的要求操作以確
保培養基的質量符合要求，不得使用結塊或顏色發生改變的脫水培養基。
脫水培養基或單獨配方組分應在適當的條件下儲存，如低溫、乾燥和避光，
所有的容器應密封，尤其是盛放脫水培養基的容器。商品化的成品培養基除了應
附有處方和使用說明外，還應註明有效期、貯存條件、適用性檢查試驗的質控菌
和用途。
為保證培養基質量的穩定可靠，各脫水培養基或各配方組分應準確稱量，並
要求有一定的精確度。配製培養基最常用的溶劑是純化水，特殊情況下，可能需
要用去離子水和蒸餾水。應記錄各稱量物的重量和水的使用量。
配製培養基所用容器和配套器具應潔淨，可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清
潔劑和外來物質的殘留。對熱敏感的培養基如糖發酵培養基其分裝容器一般應預
先進行滅菌，以保證培養基的無菌性。
脫水型培養基應完全溶解於水中，再行分裝與滅菌。配製時若需要加熱助溶，
應注意不要過度加熱，以避免培養基顏色變深。如需要新增其它組分時，加入後
應充分混勻。
應按照生產商提供或使用者驗證的引數進行培養基的滅菌。商品化的成品培
養基必須附有所用滅菌方法的資料。培養基滅菌一般採用濕熱滅菌技術，特殊培
養基可採用薄膜過濾除菌。
培養基若採用不適當的加熱和滅菌條件，有可能引起顏色變化、透明度降低、
瓊脂凝固力或 ph 的改變。因此，培養基應採用驗證的滅菌程式滅菌,培養基滅菌
方法和條件，應通過無菌性試驗和促生長試驗進行驗證。此外，對高壓滅菌器的
蒸汽迴圈系統也要加以驗證，以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢
上公升的高壓滅菌器可能導致培養基的過熱，過度滅菌可能會破壞絕大多數的細菌
和真菌培養基促生長的質量。滅菌器中培養基的容積和裝載方式也將影響加熱的
速度。因此，應根據滅菌培養基的特性，進行全面的滅菌程式驗證。
應確定每批培養基滅菌後的 ph（冷卻至室溫 25℃測定）。若培養基處方中未
列出 ph 的範圍，除非經驗證表明培養基的 ph 允許的變化範圍很寬，否則，ph
的範圍不能超過規定的±0.2。
製成平板或分裝於試管的培養基應進行下列檢查：容器和蓋子不得破裂，裝
量應相同，盡量避免形成汽泡，固體培養基表面不得產生裂縫或漣漪，在冷藏溫
度下不得形成結晶，不得汙染微生物等。應檢查和記錄批數量、有效期及培養基
的無菌檢查。
2.培養基的貯藏
自配的培養基應標記名稱、批號、配製日期等資訊，並在已驗證的條件下貯
藏。商品化的成品培養基標籤上應標有名稱、批號、生產日期、失效期及培養基
的有關特性，生產商和使用者應根據培養基使用說明書上的要求進行儲存，所採
用的保藏和運輸條件應使成品培養基最低限度的失去水分並提供機械保護。
培養基滅菌後若儲藏在高壓滅菌器中，質量可能會受影響，一般不提倡這種
存放法。瓊脂培養基不得在 0℃或 0℃以下存放，因為冷凍可能破壞凝膠特性。
培養基應避光儲存，若要長期儲存，應置於密閉容器中以防止水分流失。瓊脂平
板最好現配現用，如置冰箱儲存，一般不超過一周，且應密閉包裝，若延長儲存，
儲存期需經驗證確定。
固體培養基滅菌後的再融化只允許一次，以避免因過度受熱造成培養基質量
下降或微生物汙染。培養基的再融化一般採用的水浴加熱或流通蒸汽。若使用微
波爐，應避免培養基過度受熱及水分的蒸發，更要注意安全。融化的培養基應置
於 45～50℃的水浴中，不得超過 8 小時。傾注培養基時，應擦乾培養基容器外
表面的水分，避免容器外壁的水滴進入培養基中造成汙染。
使用過的培養基（包括失效的培養基）應按照國家汙染廢物處理相關規定進
行。3.質量控制試驗
實驗室應對試驗用培養基建立質量控制程式，以確保所用培養基質量符合相
關檢測的需要。
實驗室配製或商品化的成品培養基的質量依賴於其製備過程，採用不適宜方
法製備的培養基將影響微生物的生長或復甦，從而影響試驗結果的可靠性。
所有配製好的培養基均應進行質量控制試驗。實驗室配製的培養基的常規監
控專案是 ph，適用性檢查試驗，定期的穩定性檢查以確定有效期。培養基在有
效期內應依據適用性檢查試驗確定培養基質量是否符合要求。有效期的長短將取
決於在一定存放條件下（包括容器特性及密封性）的培養基其組成成分的穩定性。
除藥典附錄另有規定外，在實驗室中，若採用已驗證的配製和滅菌程式製備
培養基且過程受控，那麼同一批脫水培養基的適用性檢查試驗可只進行一次。如
果培養基的製備過程未經驗證，那麼每一批培養基均要進行適用性檢查試驗，試
驗的菌種可根據培養基的用途從相關附錄中進行選擇，也可增加從生產環境及產
品中常見的汙染菌株。
培養基的質量控制試驗若不符合規定，應尋找不合格的原因，以防止問題重
復出現。任何不符合要求的培養基均不能使用。
用於環境監控的培養基須特別防護。用於關鍵區域監控的培養基最好要雙層
包裝和終端滅菌，如果不能採用終端滅菌的培養基，那麼在使用前應進行 100%
的預培養以防止外來的汙染物帶到環境中及避免出現假陽性結果。
菌種試驗過程中，生物樣本可能是最敏感的，因為它們的活性和特性依賴於合適
的試驗操作和貯藏條件。實驗室菌種的處理和保藏的程式應標準化，使盡可能減
少菌種汙染和生長特性的改變。按統一操作程式製備的菌株是微生物試驗結果一
致性的重要保證。
藥品微生物檢驗用的試驗菌應來自認可的國內或國外菌種收藏機構的標準
菌株，或使用與標準菌株所有相關特性等效的商業派生菌株。
標準菌株的復活或培養物的製備應按**商提供的說明或按已驗證的方法
進行。從國內或國外菌種收藏機構獲得的標準菌株經過復活並在適宜的培養基中
生長後，即為標準儲備菌株。標準儲備菌株應進行純度和特性確認。標準儲備菌
株儲存時，可將培養物等份懸浮於抗冷凍的培養基中，並分裝於小瓶中，建議採
用低溫冷凍乾燥，液氮儲存，超低溫冷凍（低於-30℃）等方法儲存。低於-70
℃或低溫冷凍乾燥方法可以延長菌種儲存時間。標準儲備菌株可用於製備每月或
每週一次轉種的工作菌株。冷凍菌種一旦解凍轉種製備工作菌株後，不得重新冷
凍和再次使用。
工作菌株的傳代次數應嚴格控制，不得超過 5 代（從菌種收藏機構獲得的標
準菌株為第 0 代），以防止過度的傳代增加表型變化的風險。1 代是指將活的培
養物接種到微生物生長的新鮮培養基中培養，任何亞培養的形式均被認為是轉種
或傳代一次。必要時，實驗室應對工作菌株的特性和純度進行確認。
工作菌株不可代替標準菌株，標準菌株的商業衍生物僅可用作工作菌株。
實驗室必須建立和儲存其所有菌種的進出、收集、貯藏、儲存、確認試驗以
及銷毀的記錄，應有檔案化的程式管理菌種（從標準菌株到工作菌株），該程式
包括：標準菌種的申購記錄；從標準菌株到工作菌株操作及記錄；菌種必須定期
轉種傳代，並做純度、特性等實驗室所需關鍵診斷指標的確認，並記錄；每支菌
種都應適當標註，註明其名稱、標準號、接種日期、所傳代數；菌種生長的培養
基和培養條件；菌種儲存的位置和條件；其它需要的程式。
實驗室的布局和執行
實驗室應具有進行微生物檢測所需的適宜、充分的設施條件。實驗室的布局
與設計應充分考慮到良好微生物實驗室操作規範和實驗室安全的要求。實驗室布
局設計的基本原則是既要最大可能防止微生物的汙染，又要防止檢驗過程對環境
和人員造成危害。合適的規劃及活動區域的合理區分將提高微生物實驗室操作的
可靠性。
通常，實驗室應劃分成潔淨或無菌區域和活菌操作區域，同時應根據試驗
目的，在時間或空間上有效分隔不相容的試驗活動，將交叉汙染的風險降低到最
低。一般情況下，藥品微生物檢驗的實驗室應有符合無菌檢查法（附錄ⅹⅲb）
和微生物限度檢查法（附錄ⅹⅲc）要求的、用於具有開展無菌檢查、微生物限
度檢查、無菌取樣等檢測活動的、獨立設定的潔淨室（區）或隔離系統，並為上
述檢驗配備相應的細菌（真菌）等實驗室、培養室、培養基及實驗用具準備（包
括滅菌）區、樣品接收和儲藏區、標準菌株儲藏區、汙染物處理區和文件處理區
等輔助區域，同時，應對上述區域明確標識。
實驗室應對進出潔淨區域的人和物建立控制程式和標準操作規程（如更衣程
序等），應按相關國家標準建立潔淨室（區）和隔離系統的驗證、使用和清潔維
護標準操作規程，對可能影響檢測結果的工作（如潔淨度驗證及監測、消毒、清
潔維護等）能夠有效地控制、監測並記錄。
微生物實驗室檢測規範
6 儀器裝置應保持清潔，一般應有儀器套罩。7 使用儀器時，應嚴格按操作規程進行，對違反操作規程的因管理不善致使儀器械損壞，要追究當事者責任。三 藥品管理 使用制度 1 依據本室檢測任務，制定各種藥品試劑採購計畫，寫清品名 單位 數量 純度 包裝規格，出廠日期等，領回後建立帳目，專人管理，每半年做出消...
微生物實驗室規範要求清單
一 實驗室面積 微生物實驗室的面積最低符合3個緩衝間 12 的面積36 劃分汙染區 半汙染區 清潔區。二 實驗室人員 從事臨床微生物檢驗技術的相關專業人員3人 要求至少1人具有相關3年以上臨床微生物檢驗經驗 三 實驗室裝置 2.1 工作台 用以接收標本 處理標本 2.2 試劑櫃 用以存放器具或材料的...
微生物實驗室管理
二 微生物實驗室安全規範操作要求 1 檢驗人員在實驗過程中需嚴格按照要求進行操作，不得隨意減少或更改工序。2 高壓鍋 熱空氣消毒箱每次使用時需進行溫度監控，生化培養箱每班進行一次溫度監控，並填寫裝置使用及溫度監控記錄。3 微生物實驗操作人員在稱量配製培養基過程中注意佩戴隔熱手套和防護口罩，煮沸時邊加...