大環內酯類抗生素理化檢測方法

2022-05-22 02:00:03 字數 1825 閱讀 3849

大環內酯類抗生素(macrolide antibiotics,mals)是由放線桿菌或小單孢菌產生的一類抗生素。近年來,該類藥物被廣泛應用於畜禽、水產養殖業中。已成為全世界需求量和銷售速度增長最快的抗生素之一。

大環內酯類抗生素在結構上都具有大環內酯環,如紅黴素、麥迪黴素、乙醯螺黴素、阿奇黴素等。由於mals具有廣譜抗菌作用,可抵抗革蘭氏陽性菌、支原體菌屬和部分革蘭氏陰性菌,因此被廣泛應用於**豬、牛、羊、蝦及家禽的呼吸性和腸道傳染性疾病,或作為飼料新增劑促進動物生長發育。本文主要對mals殘留分析中理化檢測方法進行了綜述。

一、 光度法

現行的「衛生部藥品標準」與地方標準和常用對於大環內酯類抗生素所採用的鑑別反應一般都是硫酸顯色分光光度法和紫外分光光度法。

1、 薄層-紫外分光光度法

該法以正己烷-丙酮(v(正己烷)/v(丙酮)=7/3)作展開劑,在hf254 矽膠板上點樣展層後,刮取有效斑點,用甲醇溶出,測定的244nm 處吸光度,與標準曲線對照求出其含量,工作曲線在10~60μg 範圍內線性良好,相關係數r = 0.9996,平均**率在99.8%,變異係數小於0.

6%。該方法操作較簡便,快速、準確。

2、 螢光光度測定法

在硫酸存在下,四價鈰的氧化物與mals類抗生素發生反應,還原成三價鈰,分別在255nm 和348nm 處測三價鈰的螢光,在42.6~1200ng/ml 濃度範圍內成線性關係,標準加入法測得抗生素的**率為97.7%~100.

9%。3、 電荷轉移分光光度法

本方法主要針對羅紅黴素的測定。羅紅黴素與紫色素在乙醇介質中發生電荷轉移反應,電荷轉移絡合物在544 nm 處有最大吸收;該絡合物的組成為1/1,穩定常數是3×104。藥物濃度在0~120mg/l 範圍內服從朗伯比爾定律,ε=6.

56×103l·mol-1·cm-1。

4、差示分光光度法

本方法主要針對紅黴素的測定。此方法利用紅黴素在鹼性條件下反應產物的紫外吸收特徵,波長為235nm,結果紅黴素在8~80mg/l 濃度範圍內與吸收度呈良好的線性關係。此法快速、簡便、準確,適用於醫院製劑分析。

二、 化學方法

1、 薄層色譜法(tlc)

tlc是20世紀50年代發展起來的一種色譜技術,具有操作簡單、應用性廣、靈敏度高、快速和檢驗成本低的特點,特別適用於無紫外吸收的雜質的檢測。現經過改進的tlc採用有利於推廣的以甲苯-無水甲醇-吡啶(v(甲苯)/v(甲醇)/v(吡啶)=14/2/1)為展開劑、矽膠h-cmc-na 薄層板、碘薰回視顯色的方法進行測定。

2、毛細管電泳法(ce)

ce是20世紀80年代中後期迅速發展起來的一類以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力的新型液相分離分析技術,具有高效、樣品及耗溶劑少、成本低。分析快速等優點。該方法也逐漸應用於mal的分析當中。

三、 氣相色譜-質譜法

mals的分子量較大。且極性較高。上機前為了降低待測物的極性、提高質譜檢測的靈敏度。必須經過衍生化處理。由於操作繁瑣.該方法在mals分析中的應用也不多見。

採用電噴霧離子化源,正離子檢測方式對各主要成分進行一級全掃瞄,將對應的準分子離子峰進行二級全掃瞄質譜分析,通過與對照品的色譜和質譜行為對比,以對mals殘留進行分析。

四、 高效液相色譜法

由於mals具有發光團。多數具有較強的uv吸收。因此可用紫外檢測器(uv)包括二極體陣列檢測器(dad)對其進行檢測。

目前該方法已成為大多數實驗室mal殘留檢測的常用方法。以下為hplc 法對大環內酯類抗生素的分析。

五、 結語

綜上所述,可以看出,對大環內酯類抗生素的分析領域越來越廣泛,分析手段也逐漸複雜,分析抗生素的種類也趨於多樣化,可以預見,隨著人們各種安全意識的增強,以及現代儀器自動化和聯用技術的發展、普及和完善,對大環內酯類抗生素的分析研究也將會增加,而且必將趨於更加簡單、快捷、靈敏和高效。