一、 染菌確認與報告
1、 染菌確認
a、連續3個樣品鏡檢發現有雜菌且有增多趨勢，無菌試驗樣品發現染菌，發酵各項理化指標有明顯異常變化的，可判斷為染菌；
b、懷疑染菌的罐，在不影響正常生產安排的前提下，繼續培養，且取無菌樣進行肉湯培養，同時做平皿劃線分離，直到結論明確。
2、 染菌報告
發酵車間員工發現染菌和疑似染菌的情況，必須立即報告車間主任，發酵車間主任了解情況後做初步判斷，並通知菌種車間、中試車間及生產部經理，共同判斷、分析。
發酵車間應首先發現本車間的發酵染菌情況，否則車間主任和工藝員應負有責任。
二、染菌現象描述
對染菌罐樣品，應做以下描述：
1、 發現染菌的時間
確定從哪乙個樣品開始發現染菌（或懷疑染菌），之後的樣品有沒有同樣的現象、雜菌量有無變化。
2、 鏡檢描述
菌體形態（結合美蘭和品紅兩種染色方法染色同時判斷，比較所染雜菌與生產菌變化情況的形態），染色深淺，大小，數量（與生產菌比較）。
注:鏡檢應觀察5個視野以上，bt、桿菌肽發酵液樣品應稀釋10倍再塗片鏡檢。
3、 理化指標
ph變化情況，菌濃變化情況，對效價的影響，發酵液氣味
附樣品描述記錄：
染菌分析記錄表
生產批號：
三、染菌檢查與分析
1、 思想認知
發生染菌情況後，各車間負責人應實事求是，主動查詢車間範圍內的問題，杜絕本位主義，做到通力協作、齊心分析、查閱書籍、邏輯推理、認真檢查、嚴格試驗、廣泛討論、不辭辛苦。
2、染菌原因初步分析
a、種子罐早中期染菌：母瓶種子帶菌。
空氣過濾器「漏菌」。
滅菌不到位。
接種操作不嚴密。
其他意外事件（如停電、閥門壞等）。
b、發酵罐早中期染菌：種子罐帶菌。
空氣過濾器「漏菌」。
滅菌不到位。
移種操作不嚴密。
補料操作或補料液有問題。
其他意外事件（如停電、閥門壞、裝置漏等）。
3、 雜菌分離、培養
對已確定染菌和隱性染菌的罐批，應取染菌發酵液（或疑似染菌的發酵液）無菌樣, 在平皿上標明樣品的品名、**與取樣時間，然後在超淨工作台上進行平皿劃線分離,在37℃恆溫箱內培養, 每天在燈光下檢查有無雜菌生長。觀察雜菌菌落特徵，並塗片鏡檢，確定所染雜菌的型別。
4、 雜菌耐熱性實驗
取染菌發酵液（或疑似染菌的發酵液）4瓶，標明品名、**與取樣時間取1瓶作對照，另3瓶分別在110℃、115℃、121℃滅菌30分鐘。然後將四個樣品定量接入肉湯培養基，在37℃恆溫箱內培養,觀察肉湯的培養情況。
5、 裝置檢查
a、空氣淨化系統
開啟預、精過濾器殼體，拆檢過濾器橡皮墊圈，檢查是否有老化、斷裂而失去密封效能；拆檢預、精過濾器濾芯，檢查是否有老化、斷裂，濾芯外觀孔目是否有堵塞、變形現象。
拆檢結束，安裝殼體並對過濾器法蘭介面、排汙閥、空氣取樣閥、壓力表絲口、空氣閥、焊接縫等進行試壓、試漏，密封效能需達到無洩漏標準；且預濾、精濾的壓差應在≤0.05mpa的範圍之內。
b、罐體、閥門試漏
準備好洗衣粉水、刷子，蓋好罐蓋，關閉排氣閥，開啟進氣閥，給發酵罐加壓，當罐壓≥0.10mpa時，即可對該罐進行試漏。
試壓試漏方法：試外漏時，把洗衣粉水噴塗在閥門閥蓋、法蘭或絲口上，及閥門整體外部和管路焊縫等可能洩漏的地方。試內漏時，關閉待試閥門，把洗衣粉水噴塗在閥門排氣管孔上，經塗抹部分如有氣泡產生，可以確定有漏點，應及時複檢。
c、蛇管、夾層試漏
放盡罐內積水,開空氣吹乾或用布擦乾罐內壁.將蛇管、夾套內充滿水，注意觀察是否有水滲出。也可將夾套內的水放盡，將壓縮空氣通入蛇管、夾套內，用洗衣粉水噴塗，注意觀察是否有氣泡冒出。
6、 無菌試驗
發現染菌的裝置處理後應做無菌試驗：
a、培養基配方
消前ph6.5～7.0。
b、培養條件
37±2℃，48hr以上
注：消後應取樣塗片鏡檢，作為鏡檢對照。
7、 菌種車間接種後，將肉湯培養基15～20ml倒入接種瓶中，與殘留液混合， 37℃恆溫箱內培養48hr以上。
8、 環境檢查與清潔
a、超淨工作台沉降菌檢測
b、菌種、發酵車間環境清潔
三、 染菌處理
1、染菌料液的處理
參照《發酵異常現象的處理sop》
2、裝置處理
在染菌料液處理完後，在再次投料之前, 先徹底清洗染菌發酵罐罐體、附件, 同時進行嚴密程度檢查,以防滲漏，然後用甲醛等化學物質燻蒸處理,再用蒸汽滅菌〈包括各種附屬裝置〉。
四、 預防措施與基礎研究
1、 空氣系統
定時放水，保持乾燥。
定期拆檢,在過濾器滅菌時要防止過濾介質被衝翻或燒灼,還要防止發酵液倒流入空氣過濾器內。
2、 裝置檢修
發酵罐及其附屬裝置應做到無「滲漏」,無「死角」。定期試漏。
無菌操作室和菌種培養間定期消毒,以保持無菌狀態。
定期用甲醛薰消。
3、 操作要求
發酵罐放罐之後,對罐體和附屬裝置進行全面清洗和檢查,清除罐內的殘渣,除盡罐壁上的汙垢,清除罐內附件處的堆積物。
培養基配製時要防止物料結塊或帶入異物,配料罐和輸送料液系統要定時清洗消毒。
對進入無菌室的全部物料、器械實行滅菌。
4、 人員培訓
a、對新員工培訓，應採取學徒制，指定有資質的技術工當師傅，並對新員工的學習程序做好跟蹤考核，保證其操作水平。
b、對員工進行劃線分離、無菌取樣等基本操作培訓，保證操作的準確性、一致性。
c、定期開展崗位操作競賽，對員工的操作質量進行考核，提高員工進行日常操作培訓的積極性。
5、 整理出公司各發酵產品正常生產時各週期的典型鏡檢**各一套，收集典型的染菌料液鏡檢**和各種雜菌的鏡檢**。
6、 研究不同的雜菌單獨培養時的情況，如形態，生長速度，培養基成分、培養溫度、通氣、計數式接種量等因素的影響。
7、 研究不同的雜菌和生產菌種混合培養時的情況，重點是觀察在不同的混合時間混合時，雜菌和生產菌種的表現情況，如形態，生長速度，培養基成分、培養溫度、通氣、計數式接種量等因素的影響。
五、記錄與存檔
發生染菌情況後所做的現象描述、各項檢查、分析討論、糾正預防措施、日常培訓、基礎研究等工作均應做好記錄，並將記錄送交工藝質量可歸檔儲存。
發酵染菌應急預案
發酵染菌應急預案 發酵部分 一 染菌確認與報告 1 染菌確認 a 連續3個樣品鏡檢發現有雜菌且有增多趨勢，無菌試驗樣品發現染菌，發酵各項理化指標有明顯異常變化的，可判斷為染菌 b 懷疑染菌的罐，在不影響正常生產安排的前提下，繼續培養，且取無菌樣進行肉湯培養，同時做平皿劃線分離，直到結論明確。2 染菌...
酵母菌酒精發酵實驗報告
實驗方案 酵母菌酒精發酵的條件研究 學院 部 生物與化學工程學院 專業生物工程 學生姓名鑫 學號11018150 班級 生物工程二班 指導教師肖 一 實驗目的 1 學會實驗的設計和操作過程 2 找到酵母菌發酵時的最優條件 二 培養基和實驗方法及材料的確定 1 玉公尺粉的糖化方法 玉公尺粉的糖化採用雙...
消防應急預案預案
2.專業應急小組成員及職分工 1 撲火搶救組 組長 保安部經理 成員 物業消防主管 義務消防隊 由保安負責挑選及培訓 職責 在發生火情的第一時間，採取及時 有效的滅火措施，消防應急預案 2.專業應急小組成員及職分工 1 撲火搶救組 組長 保安部經理 成員 物業消防主管 義務消防隊 由保安負責挑選及培...