魚前列腺素E2 PGE2 ELISA試劑盒使用說明書

2022-09-23 10:39:05 字數 2489 閱讀 3186

**商:上海喬羽生物****

產品名稱:魚前列腺素e2(pge2)elisa試劑盒使用說明書

【有效期】6個月

【庫存狀態】現貨**。

【儲存】2-8℃,避光儲存。

【適用範圍】僅用於科研實驗,禁用於臨床。

【elisa試劑盒種屬】人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物elisa

試劑盒等。

【試劑盒檢測目的】用於測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血

清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

魚前列腺素e2(pge2)elisa試劑盒使用說明書實驗內容與方法

1.在微量反應板每孔加入待檢標本50μl,設陽性、陰性對照各2孔,每孔加入陽性(或陰性)對照各1滴,並設空白對照1孔。

2.每孔加入酶結合物1滴(空白對照除外),充分混勻,封板,置37℃孵育30分鐘。

3.棄去孔內液體,洗滌液注滿各孔,靜置5秒,甩乾,重複5次後拍幹。

4.每孔加顯色劑a液、b液各1滴,充分混勻,封板,置37℃孵育15分鐘。

5.每孔加終止液1滴,充分混勻。

6.用酶標儀讀數,取波長450nm,先用空白孔校零,然後讀取各孔od值。

本試劑僅供研究使用標本:全血

試驗原理:

hla- b27試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(elisa).已知hla-b27濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。魚前列腺素e2(pge2)elisa試劑盒使用說明書先將hla- b27和生物素標記的抗體同時溫育。

洗滌後,加入親和素標記過的hrp。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然後加入底物a、b,和酶結合物同時作用。產生顏色。

顏色的深淺和樣品中hla-b27的濃度呈比例關係。

試劑盒組成:

魚前列腺素e2(pge2)elisa試劑盒使用說明書自備材料

1.蒸餾水。

2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3.振盪器及磁力攪拌器等。

安全性1.避免直接接觸終止液和底物a、b。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2.實驗中不要吃喝、抽菸或使用化妝品。

3.不要用嘴吸取試劑盒裡的任何成份。

魚前列腺素e2(pge2)elisa試劑盒使用說明書樣品收集、處理及儲存方法

1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液後,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、血漿-----edta、檸檬酸鹽、肝素血漿可用於檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 儲存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃儲存,避免反覆冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。

人白細胞抗原elisa檢測試劑盒不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振盪混勻。

2.洗滌緩衝液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。

2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。

3.加入稀釋好後的標準品50ul於反應孔、加入待測樣品50ul於反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振盪混勻,37℃溫育1小時。

4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振盪30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍乾。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-hrp,輕輕振盪混勻,37℃溫育30分鐘。

6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振盪30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍乾。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

7.每孔加入底物a、b各50ul,輕輕振盪混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。

9.在450nm波長處測定各孔的od值。

侷限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到精確的結果。

魚前列腺素e2(pge2)elisa試劑盒使用說明書試劑盒效能

1. 靈敏度:最小的檢測濃度小於1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關係數r值為0.990。

2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。

3. 重複性:板內、板間變異係數均小於10%。

結果判斷與分析

1、儀器值:於波長450nm的酶標儀上讀取各孔的od值

2、以吸光度od值為縱座標(y),相應的hla-b27標準品濃度為橫座標(x),做得相應的曲線,樣品的hla-b27含量可根據其od值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值範圍:0-8.0iu/ml

4、敏感度: 0.01 iu/ml

大鼠前列腺素E2 PGE2 ELISA試劑盒說明書

2.加樣 分別設空白孔 空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘各步操作相同 待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40 l,然後再加待測樣品10 l 樣品最終稀釋度為5倍 加樣將樣品加於酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育 用封板膜封板後置37 溫育30分鐘。4.配液 將2...