食品分子檢測技術
名詞（10分）、填空（20）、選擇（10分）、判斷（10分）、簡答（35分）、簡述（15）
前兩章包括填空和簡答，如職能、基本原則重點後幾章 pcr重點圖+原理
生物晶元製備分析過程核酸探針為重點
食品檢測的必要性：重要性、商品**重要工具、反映國家檢測水平、消費者知情權、質量平衡與保證、特殊物質鑑定、打假。
中藥檢測（指紋圖譜技術）：樣品經過適量處理後，採用一定的分析手段，如光譜或色譜能得到指示該樣品特性的色譜光譜的譜圖或影象。
指紋圖譜技術：1、光譜指紋圖譜：uv（紫外）、ir（紅外）、ms（直譜）、nmr（核磁共振）2、色譜：
gc（氣相）、hplc（高壓液相）、tlc（骨髓）、hpce（毛細管）、x射線衍射3、dna：dna表達產物（pr、蛋白印跡）、dna水平（pcr、免疫、基因晶元、探針）。
食品檢測的目的：判定食品的原輔料、半成品及製成品的質量合格與否，證實原輔料、半成品、製成品的符合性，進行食品質量安全評定，考核食品質量，獲取食品質量安全資訊，仲裁食品質量糾紛。
食品檢測的職能：把關、鑑別、報告、預防等職能。
食品檢測的內容（工作程式）：1、熟悉與掌握規定要求：一些相應的基本規定—規定具體化，知道是否合格。
2、檢測：按規定方法採用相應儀器、試劑、度量工具、按程式定性定量檢查，並記錄相關資料。3、比較：
將檢測所得結果與規定要求相比較，比較一項或多項檢測指標是否符合規定要求。4、判定：根據比較結果，判定產品是否為合格品。
5、處理：（個體）單件處理—合格，即時轉入下一程式；不合格—據要求相關程度決定返工、**、報廢；批量—發現不合格—>拒收、篩選、複檢，對不合格品應填寫返修單、回用單、廢品單。
良好的實驗室操作規範：「非臨床安全性研究管理規範」—美國、良好實驗室操作規範—glp。
glp內容：1、實驗設施：用於檢測用的儀器設施，存放、試劑配製，操作處理點，清洗設施。
2、人員管理：a\總要求：具備glp意識，了解和熟悉glp的基本內容，全面掌握並嚴格執行glp的要求，具有相應的專業和文化程度，嚴謹的科學作風和職業道德，高度的責任感；b\人員構成：
（a）負責人~具備較豐富實際操作經驗、管理能力，負責實驗設計、修改、整個過程操作，確保實驗實施，保證實驗過程按glp規章制度進行，若有違glp的應先在第三者處理違反glp的事情，對可能出現問題預見、批判、對策。(b)、實驗人員專業技術、文化水平、職業道德、嚴格執行glp 。(c)、監督人員：
對所監督實驗過程難點，易錯點、儀器、實驗人員是否達到glp要求，發現問題、公平、公正、直接匯報負責人。3、標準操作：儀器裝置，微生物，標準操作規程，不應太嚴格、太專業，也不能太鬆。
4、監督體制。
檢測技術基本原則：質量原則、安全原則、快速原則、可操作原則、經濟原則。
檢驗技術操作的一般要求：1、名詞、單位符合國家規定的標準要求。2、試劑均要分析純3、稱量、劑量器具，符合規定並定期進行校準4、稱量的精確度用有效數字表示5、檢驗：
做空白試驗、平行試驗6、檢驗方法的選擇，參照gb 7、取樣必要注意樣品的生產日期、批號、代表性和均勻性。8、一般樣品在檢驗結束後應保留乙個月，以備複檢。
原始樣本：根據待檢食品的性質，按相應規則從待檢食品的各個部位採集少量的小樣，混合在一起，就是該批食品的原始樣本。
平均樣本：將原始樣本混合均勻，按4分法，平均的分出一部分作為全面檢驗用的樣本。（包括：試驗樣本、複檢樣本、保留樣本）
試驗樣本：由平均樣本分出用於全部專案檢驗的樣本。
複檢樣本：檢驗後有分歧，需要重新檢驗的樣本。
保留樣本：儲存一定時間、封存、以備不時之需。
取樣的原則：代表性原則，典型性原則，適時性原則，適量性原則，程式原則。
取樣的方法：1、散裝食品~先表面觀察，攪拌均勻，取樣。2、包裝的~分三個部分：
抽樣、混勻—>大包裝；小包裝—>對同批取樣。3、食具：濾紙，5cm2/km2生理鹽水沾濕貼在內壁，放生理鹽水、檢測水。
微生物學無菌操作方法：1、試劑和用具的滅菌：吸管、長柄勺、匙—>紙、布包起，高壓滅菌；取樣瓶；刀，鑷子—>火焰灼燒；滅菌後妥善保管。
2、無菌操作步驟：樣本、器具紫外照射，75%酒精擦手，帶膠囊的，用酒精塗擦瓶；用滅菌後的匙取樣。迅速放入無菌取樣瓶，密封。
3、注意事項：盡量從未開封的包裝內取樣；預先包好消毒的取樣工具和容器，必須在取樣時方可開啟所包的紙和布；取樣時最好兩人操作，乙個負責取樣，另一人協助開啟取樣瓶，包裝和封口；為了查明某一工序的衛生狀況，可在這一工序處理前和處理後各取乙份樣本作對照；檢查微生物和樣本要在取樣後4h內送至檢驗室。
現場取樣記錄的內容：被取樣單位；樣品名稱；取樣地點、樣本產地、商標數量、生產日期、批號、樣本狀態；被取樣的數量、包裝型別、及規格；感官所見、衛生條件；取樣方式；取樣目的；取樣現場的環境、條件；取樣機構、蓋章、取樣人簽字；取樣日期；被取樣單位負責人簽字。
樣本製備的一般方法：煙—粉碎；肉—絞肉機攪碎；罐頭—汁+固體；蛋類—清、黃混勻；水果、蔬菜—清洗、瀝乾、中軸線切開取一半。
樣本前處理：粉碎；提取；淨化、萃取、層析；濃縮，pr 凍乾/透析—>濃縮
實驗設計：文獻檢索；確定樣本處理方法；檢測方法的確定；分析方法的評價。
資料處理：1、檢驗結果的表示：a、常量檢驗結果：
毫克百分含量—mg/100g、百分含量—g/100g、千分含量—g/kg。b、微量或痕量表示：百萬分含量—mg/kg、十億分含量—ug/kg、萬億分含量—ng/kg。
2、檢驗結果的誤差：系統誤差—儀器、試劑、方法、主觀，隨即誤差—不可避免。3、檢驗結果的評價：
a、準確度：測定值與真實值的符合程度，決定檢驗結果的可靠程度。b、精確度：
在相同條件下，進行多次測定，每次測定結果相互接近的程度，表示了各次測定值與平均值的偏離程度，由偶然誤差決定c、準確度與精確度之間的關係，準確度高。精確度必須高，但精確度高，準確度不一定高。4、檢驗結果的資料處理：
a、資料處理的基本原則：記錄結果的資料只保留一位估計值b、可疑資料可根據四捨六入奇進偶舍原則c、資料相加減結果保留到小數點後，最少位數d、平均值，若有4個或4個以上資料，平均值增加乙個有效數字e、常數，稀釋1/2.1/3時，需幾個有效數字，就取幾個f、表示準確度、精確度時，保留2位有效數字。
5、提高檢測結果準確度的方法：選擇合適的分析方法，儀器、計量器具的校正，增加測定次數，做對照試驗，做**試驗。6、試劑按純度分級：
優級純—標籤顏色為綠—標識gr，分析純—紅—ar，化學純—藍—cp。
pcr反應原理：1、變性：解鏈2、退火：引物與模板結合3、延伸：dna聚合e5』—3』引物，加hntp與引物連線，與模板結合，並不斷延伸。
pcr反應的特點：1、特異性強：影響因素：
引物與模板的特異性結合、tapdna聚合e保真性2、靈敏度高：引物易與模板識別結合，所需模板少3、簡單快捷4、對標本的純度要求低。
引物：與待擴增的靶dna兩端序列互補的人工合成的核苷酸短片斷。
基因長度：1kbp—理想、1~2kbp—有效的、3kbp—無法完成。
引物設計原則：1、長度有限：一般—15~30bp，最佳：
18—24bp，不能超過38bp.2、鹼基隨機分布：gc含量45~65%—允許的，最好45~55%。
3、引物本身不允許形成二級結構4、引物之間，不允許形成引物二聚體5、引物的3』端，引端最後乙個為a，錯配紀機率大，t最小，gc含量不超過4個，最後一位最好為t。6、引物的5』端，允許出現錯配，可在5』端進行鹼基的改變，可引入限制性內切酶的切位點。7、避開簡併位點：
引物3』最後最好落在密碼子第一或第二個鹼基上。
pcr反應體系組成：模板、引物、dntp、dna聚合酶、緩衝液、mg2+、反應促進劑。
純化過程—>得到純淨dna：破壁，edta存在下用鹼性sds；除pr用酚—氯仿；除rna，用rna降解酶；乙醇沉澱。
pcr反應的迴圈引數：1、變性的時間和溫度：最常見94℃，0、5~1、5min，預變性94℃，5~10min。
2、引物的退火，55~72℃ 0、5~1min。3、延伸，最常用72℃，2000bp—>1、5min即可，0、5~2min.4、迴圈數，20~35個迴圈，25~30個時—>平台期。
標準的反應體系（100ul）：1、10×buffer 10ul 。2、dntp 200u mol/l 。
3、引物 10~100pmol。4、模板dna 0、1~2ug。5、mg2+ 1、5 nmol/l。
6、加水 100ul.7、dna聚合e 25u。
標準pcr迴圈設定：1、預變性 5~10min 94℃ 。2、變性 0、5~1、5min 94℃ 。
3、退火 0、5~15min 55℃~72℃ 。4、延伸 0、5~2min 72℃ 。5、終延伸 5~10min 72℃ .
6、1~99h 4℃ .
瓊脂糖凝膠電泳~原理：在ph8、0~8、3時，磷酸發生解離，帶負電；在電場力作用下，在電泳池向正極移動，採用適當凝膠介質，在分子篩的作用下，使分子大小和構象不同的核酸分子泳動率出現較大差異，分子量大的可受阻力大，在凝膠孔隙中泳動速度慢，分子量小的快，從而達到分離核酸片段的目的，核酸分子嵌入螢光染料後，在紫外燈下可觀察到核酸片段所在的位置。
螢光染料：溴化乙錠（eb）—橙黃色。
遷移率影響因素：1、dna分子量的大小~分子量的對數和泳動率流速成正比。2、瓊脂糖的濃度~濃度和泳動率流速成反比。
3、dna分子的構象~超螺旋最快開環最慢線性居中。4、電源電壓~在低壓下，電泳速度與電壓成正比5、嵌入染料的存在：eb 改變速度最高15%。
6、離子濃度的影響常用電泳緩衝液~tae tbe tpe。
pcr 技術的發展：1、巢氏pcr：模板量很低用來提高特異性，擴大產量，兩對引物（外部~提高特異性、增大模板量，內部~2次擴增）2、逆轉錄pcr ：
真核生物dna含有內含子；引物~隨機引物、6~8bp，oligo d（t），自己設計的特異性引物。3、多變pcr：檢測距離較遠的多個特異性dna序列合成多對引物。
4、不對稱pcr：合成特異長度的單鏈，其中乙個引物量多，另乙個量少。5、反向pcr：
擴增已知序列兩側位置序列。6、增效pcr：用於模板量很低，低濃度引物，高濃度引物。
7、錯定pcr：只知某一端的鹼基序列。步驟：
提取rna或mrna，進行rt—pcr得到cdna，使用dna，與3』端的已知特異引物與5』端的含g引物進行pcr擴增。
pcr技術在微生物檢測中的應用：富集培養，6~7d；李斯特氏菌，溶血基因 12h；金黃色葡萄球菌。
pcr在轉基因食品檢測中的應用：啟動子、目的基因、終止子。
啟動子常用的：花椰菜葉病毒、根瘤膿桿菌、玄參葉病毒。
pcr在動植物性成分食品~缺點：基因汙染、產物純化無統一方法、活菌和死菌無法區分、受一些基質和雜質干擾、活菌和毒素不能同時檢測。
吉林農業大學2023年工作要點
附2 2010年是學校全面實施 十一五 規劃的收官之年，是總結 十一五 期間發展建設經驗，全面謀劃 十二五 規劃的重要之年，是學校各項事業實現又好又快發展的又乙個開拓之年。2010年學校工作的指導思想是 深入貫徹落實科學發展觀，全面貫徹黨的教育方針，緊密結合 國家中長期教育改革和發展規劃綱要 圍繞我...
吉林農業大學學生會機構設定及工作職能
主席 1人 積極做好學生會的思想政治工作，確保正確的工作方向。統一負責管理 協調各部門有序開展工作，支援和保證副主席及各部門負責人充分行使職權 廣泛聽取各方面意見後決定學生會發展規則，學期工作要點 重大改革及其它重大事項 根據主席團會議的決定聘任或解聘學生幹部 負責召集並主持主席團會議及部長會議 代...
吉林農業大學本科生學分績點制實施辦法
為進一步完善學分制管理，更全面準確地反映學生學習質量，調動學生學習積極性，培養全面發展的高素質人才，結合我校實際情況，制定本實施辦法。一 學分績點制 學分績點制是以學分作為計算學生學習量的單位 以平均學分績點作為衡量學生學習質量標準的教學管理制度。學分績點制以取得一定學分和平均學分績點作為獲得學位 ...