生物第一單元知識點總結

2021-12-21 14:26:22 字數 1088 閱讀 3320

基因的表達包括轉錄和翻譯理論基礎①密碼子具有通用性②轉錄和翻譯課形成蛋白質

限制酶和dna解旋酶的區別:限制酶切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯鍵

dna解旋酶將dna兩條鏈的氫鍵開啟形成2條單鏈

限制酶和dna水解酶的區別:限制酶切割磷酸二酯鍵,形成片段的dna.

dna水解酶切割磷酸二酯鍵,形成單個的脫氧核苷酸

把兩種**不同的dna用同一種限制酶來切割會產生相同的黏性(平)末端,然後讓兩者的黏性(平)末端黏合起來,就似乎可以合成重組的dna分子了。

1.2基因工程的基本操作程式

主要4個步驟:①目的基因的獲取②基因表達載體的構建③將目的基因匯入受體細胞④目的基因的檢測與鑑定

一、目的基因的獲取:

三種方法①從基因文庫中獲取②pcr擴增技術③人工合成

從基因文庫中獲取目的基因

概念:將含有某種生物不同基因的許多dn**段,匯入到受體菌的群體中,各個受體菌分別含有這種生物的不同基因,稱為基因文庫。 具體內容見筆記本

二、pcr擴增技術

原理:dna複製

前提:已知目的基因的一段核苷酸序列

原料:模板dna;一對dna引物;四種脫氧核苷酸;taq酶(熱穩定dna聚合酶)

優點:以指數(2的n次方)方式擴增,在短時間內大量擴增目的基因

過程:變性→復性→延伸

dna變性(90℃-95℃):雙鏈dna模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈dna

復性(55℃-65℃):系統溫度降低,引物與dna模板結合,形成區域性雙鏈。

延伸(70℃-75℃):在taq酶的作用下,合成與模板互補的dna鏈

重複步驟:每重複一次,目的基因增加一倍

1個dna分子進行pcr擴增,迴圈n次,理論上至少需要2×(2的n次方-1)引物

三、人工合成

目的基因的mrna

反轉錄單鏈dna

合成雙鏈dna(即目的基因)

基因表達載體的組成:目的基因、啟動子(位於基因的首端,是rna聚合酶結合位點)、終止子(位於基因的末端,終止轉錄)、標記基因(檢測目的基因是否匯入受體細胞)

基因表達載體的作用:使目的基因在受體細胞中穩定存在並遺傳給子代

同時使目的基因能表達和發揮作用

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