人教版生物教材(穩態與環境)培養液中酵母菌種群數量的變化的實驗中用到了血球計數板,學生對它感到十分陌生,現對其構造和使用方法作簡要介紹：
一．血球計數板的構造
血球計數板是由一塊比普通載玻片厚的特製玻片製成的.玻片中有四條下凹的槽,構成三個平台。中間的平台較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面刻有乙個方格網。
方格網上刻有9個大方格（見圖c）,其中只有中間的乙個大方格為計數室,供微生物計數用。 計數室通常有兩種規格.一種是大方格內分為25個中方格（中方格之間用雙線分開，見圖d），每一中方格又分為16個小方格；另一種是大方格內分為16個中方格,每一中方格又分為25個小方格，但是不管計數室是哪一種構造,它們都有乙個共同的特點：
即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成（見圖d）。
血球計數板的構造
(a．俯檢視 b．側檢視 c．放大後的網格 d．放大後的計數室)
計數室邊長為1mm，面積為l mm2，每個小方格的面積為1/400 mm2。蓋上蓋玻片後，計數室的高度為0. 1mm，所以其體積為0.
1mm3，每個小方格的體積為1/4000mm3。
二． 血球計數板的使用（以計數酵母菌為例）
(1)視待測菌懸液濃度，加無菌水適當稀釋。樣品稀釋的目的是便於酵母菌懸液的計數,以每小方格內含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可。
(2)將血球計數板用擦鏡紙擦淨, 在計數室上蓋上一塊蓋玻片。
(3) 將稀釋後的酵母菌懸液搖勻，用滴管吸取少許，從計數板中間平台兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣摘入一小滴（不宜過多），讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數室，勿使氣泡產生，並用吸水紙吸去溝槽中流出的多餘菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數室上，不要使計數室兩邊平台沾上菌懸液，以免加蓋蓋玻片後，造成計數室深度的公升高。然後加蓋蓋玻片（勿使氣泡產生）。
(4)靜置片刻,待酵母菌全部沉降到計數室低部，將血球計數板置載物台上夾穩，先在低倍鏡下找到計數室後，再轉換高倍鏡觀察並計數。由於生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀察時應減弱光照的強度。
(5) 計數時若計數室是由16個中方格組成，按對角線方位，數左上、左下、右上、右下的4個中方格（即100小方格）的菌數。如果是由25個中方格組成的計數室，除數上述四個中方格外，還需數**l個中方格（即80個方小格）的菌數（見圖d）。
若菌體位於中方格線上,一般只計數中方格的上方和右方線上的酵母細胞（如下圖用紅圈標出），以減少誤差。計數時應不時調節細準焦螺旋，才能觀察到不同深度的菌體。
(6) 每個樣品計數應重複3次（每次數值不應相差過大，否則應重新操作），取其平均值,求出每乙個小格中細胞平均數，按下列公式計算出每ml菌懸液所含酵母菌細胞數量。
16格×25格的血球計數板計算公式：
酵母細胞數/ml=100小格內酵母細胞個數/100×400×104×稀釋倍數
25格×16格的血球計數板計算公式：
酵母細胞數/ml=80小格內酵母細胞個數/80×400×104×稀釋倍數
(7) 測數完畢，取下蓋玻片，用清水將血球計數板沖洗乾淨，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網格刻度。洗淨後自行晾乾或用吹風機吹乾，放入盒內儲存。
附：為熟悉血球計數板的構造，便於清楚的觀察方格網和計數室，可用棕色水彩筆對其染色，線條染色後呈不透明狀，非常容易辨認。用棕色水彩筆塗佈時，用力要輕，以免磨損平台上的線條，塗佈後放置2-3分鐘，再用擦鏡紙輕輕擦去表面上的染料顏色，並反覆擦幾次，此時只有方格網上的線條被染成棕色，便於觀察。
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