維修血球儀基礎知識

2021-03-04 01:20:10 字數 4769 閱讀 8404

一、血液的組成和功能:

普通正常人血液量約為體重的7%左右,可分為液體的血漿(pla**a)和血細胞(blood cells)兩部分,其中血漿約佔55%,血細胞約佔45%。

血漿由水、食物營養成份、代謝廢物、激素、抗體、酶、蛋白質等組成。

紅細胞(rbc)(內含血紅蛋白)

血細胞分為3種白細胞(wbc)

(俗稱血球) 血小板(plt)

三者在血液中的數量比約為rbc:wbc:plt=500:1:30。

嗜中性粒細胞(neutrophil)

粒細胞(75%) 嗜酸性粒細胞(eosinophil)

granulocyte) 嗜鹼性粒細胞(basophil)

wbc又分為淋巴細胞(25%)

lymphcyte)

單核細胞(5%)

monocyte)

人類生理和病理的變化,往往會引起血液組分的變化,比如全身各組織的感染性炎症可引起血液內白細胞總數和分類計數的改變。所以及時了解血液組分的變化,可以為醫生提供診斷與**疾病的重要依據。所謂血球計數主要是計數單位容積中紅細胞、白細胞和血小板的個數,它已成為各級醫院進行血液常規檢驗的必做專案之一。

rbc、plt和大多數wbc在骨髓生成,其功能特點如下:

二、血液標本的收集和處理:

血液自血管內採出後如不加抗凝劑將很快發生凝集反應,形成血凝塊(由血細胞和纖維蛋白等凝縮而成)和淡黃色的血清(serum),該反應是不可逆轉的,標本將無法用於血細胞測定。所以要進行血細胞分析必須對血液進行抗凝處理,國外大多數已採用靜脈抗凝血標本,國內則以末梢血(即指尖血或耳垂血)標本為主。

抗凝劑:以edta為進行血細胞分析的首選抗凝劑,濃度為edta k2:1.

5~2.2 mg / ml全血,室溫24小時內,白細胞、紅細胞、血小板測定結果不變。白細胞分類可穩定6~8小時,血紅蛋白可穩定數日,但鏡下的白細胞分類,2小時後粒細胞形態即有變化,故需作鏡檢分類者,應及早推制血片。

標本採集注意事項:

a. 靜脈抗凝血採集後應立即連續充分混勻2分鐘,加蓋。

b. 若在4小時內測定,標本放室溫下;若要在4小時後測則要放在5 c,但低溫貯存時血小板和mpv值會受影響。

c. 冰箱內取出的抗凝血應恢復至室溫時才能測定。

d. 毛細取樣管採取的末梢血要立即加入稀釋液中混勻,避免形成血凝塊和plt聚集,應特別注意稀釋溶血現象。

三、 血液細胞分析儀的工作原理:

傳統的血細胞計數是將血液稀釋後,滴在有分劃的玻璃片上,在顯微鏡下用人工計數。這種計數方法速度慢、勞動強度大、眼睛易疲勞、計數精度低,且誤差因人而異,通常在±5%~±10%之間。隨著檢驗標本量的增加和對精度要求的提高,使得這種傳統的血細胞計數方法遠不能滿足臨床要求。

隨著電子工業和計算機技術的發展,人們已研製成精密的電子血液細胞分析儀,簡稱血球計數儀或血球儀。

工作原理:變阻法(又稱電阻抗法)

血細胞是電的不良導體,標本稀釋液為電解質溶液,能使血細胞保持在血液中的原有形狀。懸浮在稀釋液中的血細胞在負壓作用下乙個乙個地通過內外電極間的計數微孔時,將明顯增大整段電解液的等效電阻,而該電解液外接恆流電源,則此時電解液兩極產生電壓脈衝訊號,電脈衝的大小直接與血細胞的電阻率成正比,即與血細胞的體積相關。如果控制定量溶有血細胞的電解液通過微孔,則可得到一連串不同幅度的脈衝訊號,對這些脈衝個數計數,就可得到血細胞數量,這就是變阻脈衝法(簡稱變阻法)的原理。

白細胞計數、hgb測量和紅細胞/血小板計數

血細胞中紅細胞、白細胞和血小板正常體積範圍約為:rbc:60~120fl、wbc:

120~1000fl、plt:2~30fl,三者在血液中的數量比約為:rbc:

wbc:plt=500:1:

30。由於紅細胞的大小與小的白細胞類似,二者難以靠大小進行區分,因此,稀釋的血液需要先進行溶血處理以破壞紅細胞,紅細胞的碎片遠小於白細胞,這樣在專門的wbc微孔中計數wbc的數目。rbc在被破壞的同時,釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血劑反應形成血紅蛋白衍生物,進入血紅蛋白測試系統,在特定波長下比色,如氰化高鐵法中形成氰化高鐵血紅蛋白,其最大吸收峰在540nm,吸光度的變化與液體中血紅蛋白的含量成比例,由此即可測得血紅蛋白的濃度。

由於正常紅細胞的濃度比白細胞高出幾百倍,因此,必須對檢測白細胞的稀釋液預先再次進行百倍稀釋,又稱為二次稀釋。血細胞分析儀用另乙個專用檢測通道,吸入血細胞稀釋液,並根據脈衝的高低對rbc和plt分別計數,稀釋的血液進入該紅細胞檢測通道時,其中含有白細胞,其數量影響可以忽略不計。

細胞分布直方圖

儀器除了給出細胞數量結果之外,同時提供細胞體積分布圖形,這些可以表示出細胞群體分布情況的圖形,稱為細胞分布直方圖。血細胞分析儀在進行細胞分析時將每個細胞的脈衝根據其體積大小分配並儲存在相應的體積通道中,每個通道收集的資料被統計出血細胞的相對數並表示在「y」軸上,體積資料以飛公升(fl)為單位,表示在「x」軸上。

紅細胞或血小板通過微孔時,形成相應大小的脈衝,脈衝的多少即紅細胞或血小板的數目,脈衝的高度代表單個脈衝細胞的體積。紅細胞脈衝高度疊加經換算即可得紅細胞的比積(hct)。根據所測單個紅細胞或血小板體積及相同體積細胞佔總體的比例,可列印出紅細胞或血小板體積分布直方圖。

白細胞分類(群)

正常生理情況下,wbc用顯微鏡按形態、顏色、功能不同可分為淋巴細胞、中性粒細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜鹼性粒細胞五類。淋巴細胞體積最小,單核細胞體積最大,而其它三種細胞大小類似,但用儀器只能靠體積來分類,因此區分起來比較困難。因為這些細胞大小雖有差異,但每一種細胞有大有小,小的單核細胞可能與大的中性粒細胞體積很接近,儀器很難區分,相對來講淋巴細胞較小,與其它四種細胞的界限比較清楚,儀器容易區分。

而臨床上則以淋巴細胞、中性粒細胞和單核細胞對臨床診斷幫助最大。兩分類的儀器僅能將淋巴細胞從其它白細胞中區分出來,而其餘四種細胞混在一起報告成「大白細胞」,這對臨床診斷意義不大,在正規的大醫院乾脆就不報白細胞的這種分類結果,而用手工方法再作白細胞分類,這就等於兩分類如同不分類。

白細胞三分類的儀器則能夠將白細胞分成淋巴細胞、中性粒細胞和中間細胞三類(中間細胞內包含單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜鹼性粒細胞),這對臨床幫助很大,對於儀器報告結果正常的標本一般就不用再用手工方法分類了。

儀器實現白細胞三分群,除了儀器測定精密性和技術效能要比兩分類儀器高得多以外,還需要使體積大小比較接近的幾種白細胞人為地拉開距離便於儀器識別。加入溶血劑後使白細胞膜不完全破壞,細胞發生固縮,細胞漿內的液體部分排出胞外,而細胞核和胞漿中的顆粒留在胞內,這樣就使得細胞核大,胞漿顆粒多的細胞變得大,反之則較小,使不同種類的白細胞之間大小差異增大。最終使儀器測得最小體積的白細胞為淋巴細胞,最大體積的白細胞為中性粒細胞,中等體積大小的白細胞則為單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜鹼性粒細胞,這與顯微鏡下看到的細胞大小有不同。

由於溶血劑可使白細胞的胞漿發生繞核皺縮,血細胞分析儀得到的白細胞直方圖所反映的只是白細胞的相對大小,白細胞體積在35~90fl範圍內的為淋巴細胞,體積在90~160fl範圍內的為中間細胞,主要包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜鹼性粒細胞,體積在160~450fl範圍內的為中性粒細胞。因此,利用白細胞的直方圖可以對淋巴細胞、中間細胞和中性粒細胞進行初步分類(群),並計算出各類(群)白細胞的絕對值和百分比。

四、血液細胞分析儀的分類:

血液細胞分析儀分為幾種檔次。

根據白細胞分類結果可以將血液細胞分析儀分為三種檔次:

1. 二分類血液細胞分析儀:該類儀器只能報出淋巴細胞和粒細胞(或稱小白細胞和大白細胞)二項百分比和絕對值。

2. 三分類血液細胞分析儀;該類儀器能報出淋巴細胞、中間細胞和粒細胞三項百分比和絕對值(部分可以進行嗜酸性細胞、嗜鹼性細胞的半定量分析)。

3. 五分類血液細胞分析儀:該類儀器能報出淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性細胞、嗜鹼性細胞和中性粒細胞五項百分比和絕對值。

其中,二分類和三分類血液細胞分析儀是應用電阻抗法和光電比色法進行血常規檢查的基本儀器。但二分類儀器很難正確地反映病人狀況,難以用於白細胞分類的篩選。三分類儀器適用於血常規檢查和作規模較大的過篩檢查。

五分類儀器由於使用了新技術(如雷射散射、射頻電導、細胞化學染色等等),使細胞分析更精確,篩選後需鏡檢的標本假陽性約從30%降為10%左右,更適用於較大規模標本量的醫院使用。

此類分類方法列表概述如下:

根據儀器的自動化程度又可以將血液細胞分析儀分為三種檔次:

(1) 半自動血液細胞分析儀:該類儀器的操作程式是標本經機外兩步預稀釋、手工加溶血素並手工混勻後上機自動定時檢測、分析、顯示和列印結果。

(2) 準全自動血液細胞分析儀:該類儀器的操作程式是標本經機外兩步預稀釋後上機自動加溶血素並自動混勻,自動定時檢測、分析、顯示和列印結果。

(3) 全自動血液細胞分析儀:該類儀器的典型操作程式是標本直接被吸入機內自動稀釋、分流,自動加溶血素並自動混勻,自動定時檢測、分析、顯示和列印結果。

此類分類方法列表概述如下:

五、各項引數的代號、參考值及簡要臨床意義:

1. 白細胞(wbc):(3.2~9.7)×109/l

絕對值和百分率:

淋巴細胞(lymph#):(1.0~3.3)×109/l

中間細胞(mid#):(0.2~0.7)×109/l

中性粒細胞(gran#):(1.8~6.4)×109/l

lymph%:18.7%~47%

mid%:3.5%~7.9%

gran%:46%~76.5%

臨床意義:

a. 增多:

a) 中性粒細胞:急性化膿感染、粒細胞白血病、急性出血、溶血、手術後、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性鉛中毒等。

b) 嗜酸性粒細胞:**反應、寄生蟲病、某些血液病、手術後、燒傷等。

c) 嗜鹼性粒細胞:慢性粒細胞白血病、何杰金病、癌轉移、鉛及鉍中毒等。

d) 淋巴細胞:百日咳、傳染性單核細胞增多症、慢性淋巴細胞白血病、麻疹、腮腺炎、結核、傳染性肝炎等。

e) 單核細胞:結核、傷寒、亞急**染性心內膜炎、瘧疾、黑熱病、單核細胞白血病、急性傳染病的恢復期等。

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