免疫固定電泳與交又免疫電泳

2022-11-22 08:21:06 字數 791 閱讀 5250

免疫固定電泳(immuno fixationel ectrophoresis,ife)是alper和johnson於2023年推薦的一項具有實用價值的電泳加沉澱反應技術,可用於各種蛋白質的鑑定。該方法原理是先將待檢樣品在凝膠板上作區帶電泳,將蛋白質分離成不同區帶,然後在其上覆蓋抗血清!當抗血清與某區帶中的單轉殖免疫球蛋白結合,便形成抗原抗體複合物而沉澱。

最後通過漂洗和染色,並與蛋白質參考泳道對照分析,可對各類免疫球蛋白及其輕鏈進行分型。

免疫固定電泳圖

左圖為iggκ型;右圖為iggλ型

免疫固定電泳最常用於m蛋白的鑑定。方法是:①先將患者血清或血漿在醋酸纖維膜或瓊脂上作區帶電泳(6孔),根據血清蛋白質的電荷不同將其分開;②將igg、iga、igm、κ輕鏈和λ輕鏈的抗血清加於分離的蛋白質泳道上,參考泳道加抗正常人全血清用於區帶對照;③作用30min後,洗去游離蛋白質,待乾燥後用氨基黑染色;④結果判新,m蛋白被固定,形成窄而緻密的沉澱帶。

本法可用於鑑定遷移率近似的蛋白和m蛋白,免疫球蛋白輕鏈,尿液、腦脊液等微量蛋白,游離輕鏈,補體裂解產物等。免疫固定電泳最大的優勢是解析度強,敏感度高,操作周期短,僅需數小時,結果易於分析,目前已作為常規檢測。

交叉免疫電泳(crossed immuunoelectrophoresis,ciep)是將區帶電泳和火箭免疫電泳相結合的免疫電泳分析技術。

ciep是一種有效的抗原蛋白定量技術,可一次同時對多種抗原定量。解析度較高,有利於各種蛋白組分的比較,對於蛋白質遺傳多型性、微小異質性、蛋白質裂解產物和不正常片段等進行定性分析。

上海越研生物科技****提供

+86-02155785281

免疫電泳實驗報告

2 2 2 微量電泳法用移液管取煮沸的瓊脂糖凝膠鋪板 7.5 2.5cm 共2塊,每塊約鋪3ml凝膠 雙擴同樣方法,鋪3塊 給微量電泳板打抗圓孔 抗體槽,並在抗原孔內分別加入陽性抗原和陰性抗原 約10 l 電泳約40 60min電壓 4 6v cm 電流 1 5ma cm 電泳結束後,取出抗體槽的凝...