測微尺有兩片組成：目鏡測微尺（安裝在目鏡裡面）和台測微尺尺（放在載物台上）。
目鏡測微尺一般是16 mm劃分成160等份,那麼目鏡測微尺的刻度每個格就是0.1mm，這是目鏡測微尺每個格的實際長度，但是顯微鏡要測量的是經過目鏡和物鏡同時放大得到的，所以不能用目鏡測微尺的0.1mm對應不同放大倍率下物體的實際長度。
目鏡測微尺的每乙個格代表的數值要通過台測微尺計算。台尺是有刻度的，通常是1mm分成100格，也就是每格0.01mm。
由於台測微尺與標本是處於同一位置，都要經過物鏡和目鏡的兩次放大成象，即台測微尺隨著顯微鏡總放大倍數的放大而放大，因此從台測微尺上得到的讀數就是標本的真實大小，所以用台測微尺的已知長度在一定放大倍數下校正目鏡測微尺，即可求出目鏡測微尺每格所代表的長度，然後移去台測微尺，換上待測標本片，用校正好的目鏡測微尺在同樣放大倍數下測量標本大小。
讀數的方法：
將目鏡側為尺的起始刻度和在目鏡內看到的台測微尺的起始刻度重合，然後再找出另一邊的乙個重合位，或者最接近重合的位置，數出兩個尺的格數。
此時可以計算在此倍數物鏡下目鏡測微尺每格所代表的實際長度：
目鏡測微尺每格刻度值（mm）＝台尺重合格數x0.01mm/目尺重疊的格數
在相同物鏡倍數下，移走台測微尺，放上標本調焦至清晰，在目鏡內找到需要測量的標本長度所對應的目鏡測微尺格數，對應的格數乘以每格代表的長度就是標本實際長度。
舉例：在20倍物鏡**測微尺刻度的10格與10x目鏡測微尺刻度的5格重合，那麼在20倍物鏡下，目鏡測微尺每格代表的實際長度就是10x0.01mm/5＝0.02mm，即20微公尺。
測試標本在目鏡下的長度與目鏡測微尺的10格刻度一樣長，那麼標本的實際長度為：10x20=200微公尺。
原理：採用刻有一定刻度的測微尺來測量，先用絕對長度的物鏡測微尺來校正不表示絕對長度的目鏡測微尺，計算後者每格所代表的實際長度，然後放上待測的標本，用目鏡測微尺測定標本上的結構佔目鏡測微尺的格數，就可計算該細胞的大小
構造：目鏡測微尺是一塊圓形玻片，通常是將5mm劃分為50格，實際每格等於100μm。用前必須用物鏡測微尺來標定。
物鏡測微尺一塊特製的載玻片，其**有一小圓圈。圓圈內刻有分度，將長1mm的直線等分為100小格，每小格等於10μm。
目鏡測微尺的標定
(1)取下接目鏡，旋下目鏡上的目透鏡，將目鏡測微尺放人接目鏡的中隔板上，使有刻度一面朝下，再旋上目透鏡，並裝入鏡筒內。
(2)將物鏡測微尺置於顯微鏡的載物台上，使有刻度的一面朝上，同觀察標本一樣，使具有刻度的小圓圈位於視野**。
(3)先用低倍鏡觀察，對準焦距，待看清物鏡測微尺的刻度後，轉動目鏡，使目鏡測微尺的刻度與物鏡測微尺的刻度相平行，並使兩尺的左邊第一條線相重合，再向右尋找兩尺的另外一條重合線
4)記錄二條重合線間的目鏡測微尺的格數和物鏡測微尺的格數。
例如，在10×物鏡下，目鏡測微尺的10格等長於台式測微尺的10格，即目鏡測微尺每小格的長度為10 m。一般情況下，當目鏡為10×時，若物鏡為4×，目鏡測微尺每小格的長度為24 m；若物鏡為l0×，目鏡測微尺每小格的長度為10 m；若物鏡為40×，目鏡測微尺每小格的長度為2.5 m；若物鏡為100×，目鏡測微尺每小格的長度為1m
鴨蹠草表皮細胞大小的測定方法：
1、將目微尺放於目鏡內
2、將物微尺放在顯微鏡的載物台上。
3、小心轉動目鏡測微尺，移動物微尺使兩尺平行，起點線重合，然後找出另一處兩尺刻度重合處。
4、記錄起點線到重合線之間的各尺的刻度數（格數），按下式計算，在該放大系統下目微尺每格所代表的實際長度：
物微尺格數
目微尺每格所代表的實際長度10μm
目微尺格數
5、將製作的鴨蹠草臨時裝片置於載物台上，測定細胞的大小（包括長徑和短徑）
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