琥珀酸脫氫酶作用的實驗

2022-06-13 20:24:02 字數 736 閱讀 2168

1 實驗目的

**生物體內琥珀酸脫氫酶的催化反應;**不同溫度對琥珀酸脫氫酶活性的影響。

2 實驗原理

琥珀酸脫氫酶是生物體內有氧呼吸中三羧酸迴圈的乙個重要的脫氫酶,可催化琥珀酸脫氫,生成延胡索酸,並將脫下的氫交給氫受體(fad)。在無氧條件下,可以用甲烯藍作為氫受體,氧化型的甲烯藍(藍色)接受了氫、被還原生成還原型甲烯藍(無色),又叫甲烯白。其反應如下:

3 實驗器材與試劑

剪刀、研缽、試管、恆溫水浴鍋、冰箱、燒杯、膠頭滴管、天平、鴿子。

生理鹽水: 0.9% nacl。

0.1 m 琥珀酸溶液:1.

8 g琥珀酸加少量蒸餾水溶解後,用0.2 n naoh調節ph至7.4,再用蒸餾水配成100 ml溶液。

(0.2 n naoh:4 g naoh配成250 ml溶液。

)ph7.4磷酸緩衝液:0.2 m nah2po4 19 ml與 0.2 m na2hpo4 81ml混合而成。

(0.2 m nah2po4溶液:1.56 g nah2po4加蒸餾水配成50 ml溶液;

0.2 m na2hpo4溶液:14.32 g na2hpo4·12h2o 加蒸餾水配成200ml溶液。)

0.01% 甲烯藍溶液:0.01 g甲烯藍加蒸餾水配成100 ml溶液。

4 實驗操作

4.1 處死鴿子(剪斷鴿子的頸總動脈),剪開胸脯處**,取胸脯處肌肉約3 g。剪碎。加4~5 ml生理鹽水,研磨均勻,得到肌肉勻漿。

4.2 按下錶操作

乳酸脫氫酶偏高

1.肌營養不良 肌營養不良病人血液中ldh4 ldh5顯著公升高。2.肝臟疾病 肝臟病變,肝細胞受損的時候,血液中ldh4和ldh5會顯著公升高。ldh5 ldh4 1常提示是原發性肝癌。急性肝炎ldh5明顯公升高,ldh4不增。而慢性肝炎則表現為ldh5持續公升高或者下降後再公升高。3.肺部疾病 ...

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